La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un metodo di laboratorio per la determinazione del DNA e dell'RNA. È stato testato per la prima volta quasi mezzo secolo fa dall'americano Carey Mullis. Questa analisi supersensibile è in grado di identificare il vettore del genoma da una singola molecola di origine contenuta nel sangue, nella saliva o nella pelle.
Il metodo PCR ha grandi prospettive, è usato non solo nella medicina, ma anche nell'ingegneria genetica e nella scienza forense. Con esso, clona e crea nuovi tipi di DNA, determina il grado di parentela. Un criminale è identificato da un pezzo di epitelio trovato sulla scena del crimine.
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Analisi PCR dell'epatite: cosa stanno facendo e perché?
Perché è necessaria un'analisi PCR per sospetta epatite C, che cos'è?
Il virus dell'epatite C è un virus a RNA che contiene 6 genotipi e fino a 500 sottotipi. Di tutte le epatiti, questo virus ha la più alta capacità di mutazione e supera la barriera protettiva del sistema immunitario. Del numero totale di casi di epatite, il virus C ha causato il 70% dei casi cronici e il 30% di cirrosi e cancro al fegato.
L'essenza del metodo: parte del gene in studio con l'aiuto di speciali enzimi e condizioni costretti a moltiplicarsi in vitro. L'analisi PCR consente di determinare il ceppo virale, senza il quale è impossibile condurre un trattamento efficace: ciascun genotipo è diversamente sensibile ai farmaci antivirali. Vengono utilizzati due tipi di PCR:
La terapia antivirale richiede un monitoraggio costante al fine di regolare tempestivamente il trattamento, e per questi scopi viene utilizzata anche la reazione a catena della polimerasi.
PCR qualitativa e quantitativa
La PCR qualitativa sull'epatite C dà la risposta: c'è un ceppo di virus C nel sangue del paziente e quale? La genotipizzazione è necessaria per chiarire la diagnosi, la prognosi della malattia e determinare i tempi del trattamento.
Secondo la classificazione accettata, un gene è indicato da un numero e un sottotipo è una piccola lettera latina.
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Istruzioni per l'uso
Decifrare la tabella dei virus del genotipo C:
- Genotipo 1a, 1b, 1c
- Genotipo 2a, 2b, 2c, 2 d
- Genotipo 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
- Genotipo 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
- Genotipo 5 a
- Genotipo 6 a
I genotipi più comuni 1,2,3. In Russia, i più comuni sono i ceppi 1a, 1b, 2 e 3 del virus C.
Il genotipo del virus 1b è più difficile di altri da trattare, nel 90% diventa cronico, di cui il 30% rinasce come cancro al fegato o cirrosi.
I genotipi 2a e 3a hanno un grado di cronicità del 33-50%, più reattivo alla terapia antivirale.
Quando si conferma la presenza del virus, viene eseguito un test quantitativo di PCR per l'epatite C, che viene utilizzato per calcolare il numero di molecole di RNA presenti nel campione di laboratorio del paziente.
Analisi di decodifica
L'analisi PCR di alta qualità ha due risposte:
Negativo PCR significa che non è stato rilevato alcun agente patogeno nei campioni di sangue.
Una risposta positiva suggerisce il contrario: si trova l'RNA di uno o un altro genotipo del virus C.
La probabilità di affidabilità del risultato è del 95%. Il restante 5% è un errore causato da una persona. Questa possibilità è consentita a causa degli elevati requisiti per lo studio:
- regole di conservazione dei reagenti;
- qualifiche appropriate del personale medico;
- purezza del biomateriale.
Il kit PCR ha una precisione diagnostica del 100%.
La PCR quantitativa dell'epatite C RNA consente di determinare la carica virale sul corpo del paziente. Con il suo aiuto:
- lo stadio della malattia è specificato (acuto, cronico);
- determina l'efficacia del trattamento antivirale;
- Si scopre la necessità di una biopsia epatica.
In alcuni casi, il paziente non avverte alcun segno della malattia, mentre l'infezione da HCV viene rilevata mediante il metodo PCR. Ciò significa che la malattia si trova in una fase iniziale di sviluppo o in una forma cronica. Sono necessari ulteriori studi per chiarire la diagnosi, per l'inizio precoce del trattamento antivirale.
Carica virale dell'epatite C.
Il carico virale mostra l'attività del virus epatico, quanto attivamente avviene la sua riproduzione.
Cos'è questo?
L'epatite C PCR quantitativa è misurata in Unità Internazionali per 1 ml o IU / ml, il che significa quante copie di acido ribonucleico di un certo ceppo di virus C si trovano in 1 ml di sangue in esame.
Cosa è alto, cosa è basso?
L'analisi della carica virale consente di determinare la presenza di RNA virale a una concentrazione di 50 UI / ml. La normale carica virale è quando nessuna molecola di RNA dell'HCV viene rilevata mediante PCR.
Tabella di carico virale:
- bassa concentrazione da 600 UI / ml 3 * 104 UI / ml;
- media concentrazione da 3 * 104 IU / ml a 8 * 105 MM;
- alto livello superiore a 8 * 105 UI / ml.
Una bassa carica virale è un segnale che il trattamento terapeutico viene scelto correttamente e la prognosi per una cura per l'epatite C è favorevole.
Un'alta concentrazione di cellule virali indica che la malattia è in fase acuta. Il sangue del paziente è una fonte pericolosa di infezione.
Il carico virale, i cui indicatori sono a livello medio, caratterizza o lo stadio cronico di HWS, o può avere due tendenze di sviluppo: aumentarlo o diminuirlo.
Al suo completamento, dopo 6 mesi, viene eseguito il controllo della PCR.
Costo della diagnostica PCR
I seguenti sintomi dovrebbero essere causa di preoccupazione:
- debolezza generale;
- decolorazione della pelle, sclera dell'occhio, scarico;
- nausea;
- diminuzione dell'appetito;
- dolore nei muscoli e nelle articolazioni;
- pesantezza nell'ipocondrio destro;
- elevati livelli ematici di AST e ALT.
In contatto con pazienti infetti, nel periodo preoperatorio, l'esame di emodialisi è anche raccomandato.
Le cliniche statali effettuano gratuitamente un esame del sangue per la PCR se vi è un riferimento da uno specialista di malattie infettive o da un epatologo.
I servizi di diagnostica a pagamento della PCR sono forniti in tutte le principali città russe. Il costo dipende dal tipo di test, dall'attrezzatura disponibile, dalla tempistica e da altri fattori.
L'analisi PCR di alta qualità a Mosca e San Pietroburgo avrà un costo compreso tra 600 e 900 rubli. Nelle regioni - da 300 a 800 rubli.
La determinazione della carica virale dell'epatite C costerà 17.000-22.000 rubli. Per altri tipi di infezione, il prezzo della ricerca quantitativa: 1200-10000 rubli.
Vantaggi e svantaggi del metodo PCR
Quali sono i vantaggi del metodo di reazione a catena della polimerasi rispetto ad altri metodi diagnostici?
- Una vasta gamma di applicazioni. Utilizzando la PCR, utilizzando l'attrezzatura standard, è possibile identificare qualsiasi virus.
- Precisione della determinazione dell'agente patogeno. Utilizzando varie combinazioni di enzimi e tecniche di analisi, si ottiene una specifica del 100% dello studio per l'infezione indicata.
- Alta sensibilità La tecnica consente di rilevare la presenza di una molecola di virus nel sangue.
- Efficienza. L'analisi qualitativa è pronta in poche ore, quantitativa - in due giorni.
- Diagnosi del virus nel periodo di incubazione. Durante la PCR, l'agente patogeno non è determinato dalla presenza di anticorpi, quando il corpo ha una risposta immunitaria, ma prima dell'inizio del processo patologico, che facilita il trattamento.
Gli svantaggi della PCR sono il risultato dei suoi vantaggi:
- la purezza dell'analisi richiede il massimo grado di purezza, compresa l'aria in laboratorio, in modo che il DNA "estraneo" non entri nel campione;
- requisiti elevati per il personale impegnato nella raccolta e analisi del biomateriale.
Analisi dell'epatite mediante PCR
L'epatite C è una malattia epatica virale causata dal flavivirus HCV (dal virus dell'epatite C inglese), la cui struttura contiene una molecola di acido ribonucleico (RNA). L'RNA porta il codice genetico del virus. La sua presenza consente l'analisi della PCR per l'epatite C.
Il pericolo di HCV per una persona risiede nel fatto che la cosiddetta finestra sierologica (il tempo che intercorre tra l'infezione e l'aspetto di una reazione del sistema immunitario) può essere piuttosto lunga, da diverse settimane a sei mesi.
Non rileva l'infezione e inizia il trattamento in tempo.
A seconda delle caratteristiche individuali dell'organismo, il portatore dell'HCV può manifestarsi in forma acuta, oltre a presentarsi come una malattia cronica che richiederà un trattamento lungo e costoso. Nel rilevamento di anticorpi anti-HCV, vengono condotti una serie di test di laboratorio, inclusa PCR per l'epatite C. Questo test viene eseguito a tutte le persone nei cui anticorpi del sangue sono stati trovati HCV.
Cos'è l'analisi PCR?
Analisi di laboratorio della PCR per l'epatite C - uno studio di materiale biologico per identificare la presenza di flavavirus.
La reazione a catena della polimerasi (come indica l'abbreviazione) mostra il valore quantitativo del danno virale del corpo, le sue caratteristiche qualitative e il genotipo del virus che contiene l'RNA.
Sulla loro base, così come sulla base di ulteriori analisi, viene determinato il metodo e la durata della terapia, nonché il fattore epidemiologico (il grado di rischio di trasmissione ad un'altra portante).
Cos'è l'analisi dell'epatite C RNA?
L'epatite C PCR è anche chiamata analisi RNA (HCV RNA), perché Il flavavirus contiene una particella di RNA con una dimensione di virione di 30-60 nm. Una delle caratteristiche di questo microrganismo è un'alta propensione alle mutazioni.
Ciascuna sottospecie (genotipo) del virus ha una resistenza diversa, che causa diversi metodi di trattamento e la natura dell'ulteriore prognosi per il paziente.
Il materiale biologico (sangue venoso) viene somministrato a stomaco vuoto e, di norma, viene testato con il metodo Real-Time PCR (diagnostica in tempo reale altamente sensibile con un limite di rilevamento inferiore di 15 UI / ml utilizzando sistemi automatici chiusi).
Esistono altri test, ad esempio COBAS AMPLICOR con una sensibilità di 50-100 UI / ml. Per qualsiasi test di laboratorio, la soglia della sensibilità è importante, vale a dire la capacità del reagente di rilevare la concentrazione minima di virus in materiale biologico.
Il valore di riferimento del test (valori normali) è "non trovato".
Tipi di analisi per l'epatite C mediante PCR
La PCR dell'epatite C include tre componenti importanti:
analisi qualitativa; analisi quantitativa; genotipizzazione.
Questi test possono determinare la natura della viremia e le caratteristiche genetiche del patogeno. A seconda della sensibilità del sistema diagnostico, lo studio viene eseguito una sola volta ea volte viene eseguito un secondo test con un reagente più sensibile per confermare o perfezionare i risultati.
Epatite C PCR di alta qualità
L'analisi PCR dell'epatite C qualitativa è un altro nome comune per l'analisi della reazione a catena della polimerasi. La sensibilità standard del test, che consente di rilevare la presenza di lesioni virali, è nell'intervallo di 10-500 UI / ml.
Un'analisi PCR negativa per l'epatite C mostra che la concentrazione del virus nel sangue del paziente è al di sotto della soglia di suscettibilità del sistema diagnostico.
Se la PCR di alta qualità ha dato la risposta "non rilevata", quindi per il trattamento successivo è importante scoprire la soglia di sensibilità del reagente.
Una risposta positiva al test PCR per l'epatite C può essere somministrata già 4-5 giorni dopo l'infezione da HCV.
Le frazioni proteiche di flavavirus appaiono molto più tardi.
PCR quantitativa dell'epatite C
Il quantitativo di PCR dell'epatite C è un indicatore della carica virale, che riflette il livello della concentrazione di RNA di flavavirus nel corpo. Questo è un indicatore che mostra quanti frammenti di RNA virale sono contenuti per centimetro cubo di sangue. I risultati della PCR dell'epatite C RNA in un test quantitativo nel sistema convenzionale sono indicati in unità internazionali per millilitro (IU / ml) e possono essere registrati in diversi modi, ad esempio 1,7 milioni o 1,700,000 UI / ml.
La diagnostica quantitativa della PCR dell'epatite C viene prescritta ai pazienti prima dell'inizio della terapia antivirale e alla 12 ° settimana di trattamento, al fine di valutare i risultati del metodo scelto per trattare l'HCV. Il carico virale consente di determinare tre importanti indicatori della malattia:
infettività, vale a dire il grado di rischio di trasmissione del virus da un portatore all'altro (maggiore è la concentrazione di RNA di flavavirus, maggiore è la probabilità di infettare un'altra persona, ad esempio attraverso il contatto sessuale); metodo ed efficacia del trattamento; la durata e la prognosi della terapia antivirale (maggiore è la carica virale, più dura il trattamento).
La diagnostica quantitativa della PCR dell'epatite C dipende dal tipo di test di laboratorio e dalla soglia della sua sensibilità. Il limite inferiore della norma è considerato l'indicatore fino a 600.000 UI / ml, il valore medio è compreso tra 600.000 e 700.000 UI / ml. I risultati di 800.000 UI / ml e oltre sono considerati alti livelli di virus contenente RNA.
Importante: non esiste una relazione diretta tra il livello di HCV RNA nel sangue e la gravità della malattia. Il paziente può avere una carica virale molto elevata, ma ciò non significa che ci sia un grave danno alle cellule del fegato.
genotipizzazione
A causa dell'alta attività mutazionale di HCV in natura, durante il test, è importante identificare quale genotipo del virus si trova nel sangue del paziente. In totale, sul pianeta sono stati registrati 11 genotipi del virus dell'epatite C, che comprendono molte sottospecie (sottotipi). Sul territorio della Federazione Russa distribuiti 1,2 e 3.
L'RNA dell'epatite C PCR insieme alla genotipizzazione è una componente molto importante dell'analisi, dal momento che consente al medico di determinare la resistenza (resistenza) del virus, selezionare i farmaci appropriati e prescrivere un ciclo di trattamento.
Genotipi HCV diversi rispondono in modo diverso alla terapia antivirale. Ad esempio, 1 genotipo richiede fino a 48 settimane di trattamento e la sua efficacia è mediamente del 60%, mentre 2 e 3 genotipi vengono trattati due volte più velocemente con un'efficienza fino all'85%.
La genotipizzazione consente anche la determinazione indiretta dello stato del fegato. Ad esempio, il genotipo 3 di HCV è spesso accompagnato da steatosi, in cui il grasso si accumula nelle cellule dell'organo.
Un esame del sangue per PCR per l'epatite C dovrebbe produrre una figura che determina il genotipo. Le risposte di laboratorio possono dire "non digitate" - e questo significa che un virus è nel sangue umano che non viene rilevato dal sistema di test. Questo potrebbe indicare che il genotipo non è tipico per una determinata area geografica. In questo caso, è necessario ripetere l'analisi con una maggiore sensibilità del sistema diagnostico.
Decodifica dell'analisi PCR per l'epatite C.
Il test per la decrittografia quantitativa della PCR dell'epatite C può essere basato sui dati sopra riportati. Quando si ottengono i risultati dei test di laboratorio, vengono solitamente scritti i seguenti dati:
"Trovato" / "non trovato" (PCR di alta qualità per l'epatite C); il numero di frazioni contenenti RNA, ad esempio 831,680 ME / ml (analisi PCR quantitativa); la figura che determina il genotipo di HCV, ad esempio - 1, 2, 3, 4; Il nome del test è più spesso in tempo reale.
La cosa più importante nel decifrare l'analisi PCR per l'epatite C è il secondo elemento, che mostra la carica virale, che determina la prognosi, il metodo e la durata del trattamento.
Importante: come risultato del test, una lettera latina, ad esempio 1a, che indica un sottotipo del virus, può apparire accanto alla figura che mostra il genotipo. Per il medico, non importa: viene scelto solo il genotipo per selezionare il metodo di trattamento.
Se il test PCR per l'epatite C è negativo e l'ELISA è positivo, che cosa significa?
Per decifrare i test di laboratorio, è importante contattare un epatologo o uno specialista di malattie infettive che spiegherà le informazioni ottenute in base al tipo di sistema diagnostico e alla sua soglia di sensibilità. Nella pratica medica, ci sono molti dati di analisi del sangue che possono indurre in errore una persona senza istruzione medica.
Ad esempio, se il test per l'epatite C PCR è negativo e il test ELISA è positivo, può significare che non vi è HCV nel sangue del paziente al momento, ma in precedenza ha sofferto di una forma acuta di epatite C. Si ritiene che un saggio positivo all'immunosorbente legato all'enzima (ELISA) mostri che ci sono anticorpi nel sangue che sono stati prodotti dopo l'invasione del virus in passato. Ma nella moderna pratica medica, l'analisi ELISA è considerata insufficientemente affidabile e spesso dà risultati atipici, quindi i medici la usano come screening primario. Durante la diagnosi di una malattia, gli specialisti vengono guidati con precisione mediante test PCR.
Video utile
Il seguente video racconta in modo molto dettagliato e interessante qual è l'essenza del metodo PCR, come viene condotta l'analisi:
conclusione
Per l'analisi della PCR dell'epatite C, di solito viene prelevato il sangue venoso. Molto spesso c'è una doppia assunzione di materiale biologico - per ELISA e direttamente per il test PCR. Per risultati corretti del test, è richiesta la conformità con le regole di base per la raccolta in laboratorio di materiale biologico:
sangue per analisi è dato nella prima metà della giornata a stomaco vuoto; tra il pasto e la raccolta del sangue dovrebbero impiegare almeno 8 ore; Anche alcol e cibi fritti dovrebbero essere esclusi prima di iniziare il test. durante il giorno prima della donazione di sangue è necessario evitare uno sforzo fisico elevato.
I risultati delle analisi del sangue sono solitamente pronti il giorno successivo.
L'epatite C è una patologia infiammatoria in cui sono colpite le cellule del fegato. La malattia si sviluppa a seguito della penetrazione del virus dell'epatite C (HVC) nel corpo umano.
La forma della malattia può essere acuta o cronica.
Molto spesso i sintomi della forma acuta di patologia nella maggior parte dei pazienti sono assenti, a volte la malattia è accompagnata da sensazioni dolorose nell'addome, diminuzione delle prestazioni, aumento della fatica, perdita di appetito, una sfumatura scura di urina, scolorimento delle feci, gonfiore della pelle e delle mucose, dolore alle articolazioni. Tali sintomi di solito si verificano 6-8 settimane dopo l'infezione, ma possono comparire dopo sei mesi.
Con lo sviluppo di tali fenomeni, è necessario contattare un'istituzione medica e sottoporsi a un esame completo dell'intero organismo. Come parte di una visita medica, viene eseguito un esame del sangue per l'epatite C.
Oggi, con l'aiuto delle moderne tecniche diagnostiche, questa patologia può essere identificata nella fase iniziale di sviluppo, che aumenta significativamente le possibilità di una cura completa della malattia.
I seguenti gruppi di persone sono tenuti a testare l'epatite C:
le donne nel periodo del trasporto di un bambino; persone con segni di epatite; personale medico; potenziali donatori di organi e sangue; tossicodipendenti, persone infette da HIV, vita intima promiscua.
Elenco degli studi richiesti
Quali test dovrei prendere per l'epatite C? Per diagnosticare accuratamente la malattia, identificarne le cause e determinare lo stato del parenchima epatico, sono necessari i seguenti studi:
esami generali delle urine e del sangue; analisi biochimica del sangue; Analisi PCR; esame del sangue per il rilevamento di anticorpi contro l'HVC; analisi del sangue per gli anticorpi disponibili alle proprie cellule epatiche; biopsia epatica.
La decifrazione di un esame del sangue per l'epatite C viene eseguita da uno specialista. Considerare ogni metodo di ricerca in modo più dettagliato, così come comprenderemo quale analisi dell'epatite C è la più accurata.
Analisi generale
Quando si esegue un emocromo completo per l'epatite C, è possibile valutare le condizioni del paziente. I cambiamenti nei parametri del sangue non sono percepiti come sintomi specifici di epatite, tuttavia, con questa malattia, ci sono tali disturbi come:
concentrazione di emoglobina, piastrine e diminuzione dei leucociti; aumenta il contenuto di linfociti; la coagulazione del sangue è violata; aumenti della velocità di eritrosedimentazione (ESR).
L'analisi generale delle urine rende possibile rilevare nella sua composizione l'urobelina, un pigmento biliare che si verifica nelle urine a causa del funzionamento alterato del fegato.
Analisi biochimiche
L'analisi biochimica del sangue nell'epatite C consente di identificare tali disturbi come:
livelli elevati di enzimi epatici (alanina transaminasi - ALT e aspartato aminotransferasi - AST), che entrano nel sangue quando gli epatociti sono danneggiati. In uno stato normale, questi indicatori per gli uomini non dovrebbero essere più di 37 IU / l, per le donne - non superiore a 31 IU // l. Un'aumentata concentrazione di ALT e AST nell'epatite C asintomatica è spesso l'unico sintomo di questa malattia. Inoltre, aumentano gli aumenti di fosfatasi alcalina glutamil transpeptidasi ematica (normalmente non superiore a 150 IU / l). il contenuto di bilirubina (sia generale che diretta) nel sangue viene superato. Se il livello di pigmento giallo nel siero supera 27-34 μmol / l, si verifica ittero (fino a 80 μmol / l in forma lieve, 86-169 μmol / l in moderatamente grave, sopra 170 μmol / l in forma grave). Il livello di albumina è abbassato, la concentrazione di gamma globuline, al contrario, è aumentata. Le gammaglobuline sono costituite da immunoglobuline - anticorpi che proteggono il corpo dalle sostanze che causano malattie. aumento della concentrazione di trigliceridi nel sangue.
Test PCR
Utilizzando la tecnica PCR, è possibile diagnosticare l'agente eziologico della malattia. L'esecuzione di questa analisi consente di rilevare un virus nel sangue, anche se la sua quantità è minima. L'analisi PCR per l'epatite C consente di determinare un'infezione esistente nel sangue già dopo 5 giorni dal momento dell'infezione, cioè molto tempo prima che compaiano gli anticorpi.
Se il risultato di un esame del sangue per epatite C mediante PCR è positivo, questo indica la presenza di un'infezione attiva nel corpo. Utilizzando questo metodo, è possibile condurre uno studio qualitativo e quantitativo di HVC RNA.
Durante l'analisi qualitativa della PCR per l'epatite C, è possibile rilevare un virus esistente nel corpo umano.
Questa procedura diagnostica viene eseguita se l'anti-HVC viene rilevato nel sangue.
La decifrazione dell'analisi per l'epatite C contiene informazioni che l'infezione è stata rilevata o non rilevata nel corpo. Normalmente, nel sangue non si trovano sostanze patologiche.
Se il test dell'epatite C è positivo, significa che il patogeno si divide continuamente e infetta le cellule del fegato.
I risultati di questa analisi possono essere inaffidabili, è possibile nei seguenti casi:
biomateriale contaminato usato; in presenza di eparina nel sangue; in presenza di sostanze chimiche o proteiche (inibitori) nel biomateriale studiato, che influenzano gli elementi della PCR.
L'analisi quantitativa dell'epatite C fornisce informazioni sulla quantità di virus contenuto nel sangue, cioè determina la carica virale. Con questo concetto si intende il volume di HVC RNA presente nel sangue (ad esempio, in 1 ml). Nell'interpretazione dell'analisi quantitativa dell'epatite C, questo valore è espresso in equivalente digitale, misurato in UI / ml.
Il sangue per PCR per l'epatite C viene assunto prima delle misure terapeutiche. Dopo l'analisi viene eseguita a 1, 4, 12 e 24 settimane. Lo studio alla settimana 12 è indicativo e viene condotto per valutare l'efficacia delle procedure terapeutiche.
Se il test per l'epatite C durante la gravidanza è positivo e vengono superati i valori di carica virale, il rischio di trasmissione di agenti patogeni dalla madre malata al bambino aumenta più volte. Inoltre, con una elevata carica virale, l'implementazione di misure terapeutiche è difficile.
Secondo la trascrizione dei test per l'epatite C, se i valori di carica virale superano 800.000 IU / ml, allora è alto. Se le cifre sono inferiori a 400.000 IU / ml, il livello di carica virale è considerato basso.
L'analisi dell'epatite C mediante PCR è considerata la più accurata e presenta numerosi vantaggi rispetto ad altre opzioni di ricerca, in particolare:
diagnosi diretta dell'agente eziologico della malattia. Quando si eseguono studi tradizionali sono determinati dalla presenza di marcatori proteici che sono prodotti di scarto di agenti patogeni. Questo indica solo che l'infezione è presente nel sangue. Durante il test per l'epatite C mediante PCR, è possibile determinare il tipo di patogeno della patologia pericolosa. specificità della tecnica. Durante questa procedura, nel biomateriale viene determinata una regione di DNA unica che corrisponde a un solo tipo di agente patogeno. Ciò minimizza la probabilità di risultati falsi. alta sensibilità. Quando si esegue l'analisi PCR, è possibile rilevare la quantità minima di virus. Questo è importante se vengono identificate sostanze patogene condizionatamente che rappresentano una minaccia solo se il loro livello aumenta. Quando si utilizza questa tecnica in un campione di biomateriale, è possibile rilevare diversi agenti patogeni contemporaneamente. può rilevare infezioni nascoste. Inoltre, l'analisi consente di diagnosticare microrganismi patogeni che vivono all'interno delle cellule e hanno un'elevata variabilità antigenica.
Se i risultati del test sono positivi, le tracce del virus si trovano nel biomateriale, quindi la rete ha un'infezione nel corpo.
Un'analisi PCR negativa per l'epatite C indica che non vi sono tracce di infezione nel biomateriale.
Studio immunologico
Questo metodo consente di identificare gli anticorpi contro tutti i tipi di virus dell'epatite, così come gli anticorpi contro le cellule del fegato del proprio corpo, la cui comparsa contribuisce allo sviluppo dell'epatite autoimmune.
I risultati ottenuti durante lo studio sono rilevanti per 3 mesi, quindi è necessario ri-donare il sangue per l'epatite C.
È anche possibile eseguire uno studio rapido utilizzando strisce reattive speciali. Questa analisi consente di determinare gli anticorpi del virus C nella composizione del sangue e della saliva, procedura che può essere eseguita indipendentemente, a casa.
Biopsia epatica
Per eseguire questa analisi, viene prelevato un elemento del parenchima epatico e viene eseguito un esame istologico del biomateriale ottenuto. Ciò consente di valutare le condizioni del corpo: identificare focolai infiammatori, necrotici, stadio di fibrosi e così via.
Oggi vengono utilizzati test che sostituiscono l'analisi istologica del parenchima epatico.
Per valutare lo stadio del danno epatico e l'intensità del processo di infiammazione, vengono utilizzati biomarcatori del sangue venoso specifici. Utilizzando Fibrotest, è possibile stimare il grado di crescita del tessuto fibroso.
Quando si esegue Actitest è possibile ottenere informazioni sull'intensità dei processi patologici nel parenchima epatico. Utilizzando Steatototesta è possibile diagnosticare il tessuto adiposo del fegato e valutare l'entità di questo processo. Fibromax comprende tutti i test sopra elencati e può includere altri studi.
Preparazione per lo studio
Quali sono i test per l'epatite C e come abbiamo scoperto questo o quel tipo di ricerca. È altrettanto importante sapere come prepararsi per l'analisi.
Per ottenere risultati affidabili, si raccomanda di rispettare i seguenti requisiti:
Le prove dell'epatite C devono essere prese al mattino, a stomaco vuoto. L'ultima volta il cibo dovrebbe essere consumato almeno 8 ore prima dello studio. Il biomateriale può essere raccolto durante il giorno o la sera. In questo caso, è importante che trascorrano almeno 5-6 ore tra l'ultimo pasto e l'analisi. prima di donare il sangue per l'epatite C, scartare il tè, il caffè, il succo o altre bevande, è ammessa solo acqua. 48 ore prima dello studio, è necessario escludere l'uso di cibi grassi, fritti e bevande contenenti alcol. per almeno un'ora prima dell'analisi, devi astenersi dal fumare. l'analisi non deve essere eseguita immediatamente dopo un esame ecografico, strumentale, a raggi X, seduta di massaggio o fisioterapia. un giorno prima dell'esecuzione dello studio, è necessario escludere l'uso di droghe e attività fisica intensiva. Lo stress emotivo è anche controindicato. Si consiglia di trascorrere 15 minuti prima di eseguire lo studio in uno stato calmo.
Effettuare la procedura di raccolta del sangue
Dove fare il test per l'epatite C? Il biomateriale viene utilizzato per ulteriori indagini nel laboratorio di un istituto medico o a casa del paziente.
Il sangue da una vena è preso come segue:
utilizzando un laccio emostatico speciale avvolto attorno all'avambraccio del paziente, il flusso venoso viene interrotto. Grazie a tali manipolazioni, le vene saranno riempite di sangue e saranno più visibili, il che faciliterà notevolmente il processo di inserimento dell'ago. l'area della pelle in cui verrà inserito l'ago viene accuratamente trattata con alcool o liquido contenente alcol. Un ago viene inserito delicatamente in una vena, quindi viene attaccata una provetta, appositamente progettata per la raccolta del sangue. Immediatamente dopo l'inserimento dell'ago nella vena, l'imbragatura viene rimossa dal braccio del paziente. dopo aver raccolto il volume di sangue necessario per l'analisi, l'ago viene delicatamente rimosso dalla vena. Sul sito di iniezione deve essere applicato un tampone di cotone sterile o una garza inumidita con alcool. per prevenire il verificarsi di un ematoma, il tampone deve essere premuto con un certo sforzo contro l'area di inserimento dell'ago, piegare il braccio all'altezza dell'articolazione del gomito e tenerlo in questa posizione per diversi minuti. Tali azioni aiuteranno anche a fermare il sangue più velocemente.
A condizione che la tecnica di amministrazione interna sia buona, questa procedura è assolutamente sicura e non causa sensazioni dolorose.
In rari casi, dopo la raccolta del sangue, le vene possono gonfiarsi. Questo fenomeno è chiamato "phlebitis". Un impacco (non caldo) aiuterà a risolvere il problema, dovrebbe essere applicato a zone gonfie della pelle più volte al giorno.
Alcuni problemi possono verificarsi anche in presenza di una patologia emorragica. L'assunzione di aspirina, warfarin e altri fluidificanti del sangue può causare sanguinamento. Ecco perché prima di eseguire l'analisi è necessario rifiutarsi di prendere qualsiasi farmaco. Se il trattamento non può essere annullato, è necessario informare lo specialista.
Date e prezzi
Quanto viene testato per l'epatite C? I risultati di un esame del sangue per l'epatite possono essere pronti in poche ore e in pochi giorni (di solito non più di 8 giorni). La durata della preparazione dei risultati dipende dal tipo di virus e dal metodo di analisi scelto. Più veloce è lo studio condotto con il metodo PCR. I risultati in questo caso saranno pronti in poche ore.
Quanto costa un test per l'epatite C? A seconda della clinica e della complessità dello studio, il prezzo della procedura può variare da 400 a 11.000 rubli.
Dovresti essere consapevole che potrebbero essere necessarie diverse settimane per formare una quantità sufficiente di anticorpi contro HVC. Pertanto, in una fase iniziale dello sviluppo della patologia, il risultato di uno studio potrebbe essere falso-negativo.
Inoltre, ottenere dati inaffidabili è possibile con analisi di scarsa qualità e violazione delle condizioni di trasporto del biomateriale ottenuto (i campioni devono essere consegnati al laboratorio per un massimo di 2 ore dopo il prelievo di sangue).
Se il risultato dello studio è positivo, è necessario contattare immediatamente un medico per le malattie infettive. Lo specialista effettuerà un ulteriore esame e prescriverà il trattamento appropriato.
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Postato da: Julia Barabash
La diagnostica PCR consente non solo di determinare la presenza del virus dell'epatite B nel sangue e la sua eziologia, ma anche di valutarne l'attività. La rilevazione della carica virale è particolarmente importante per la selezione del trattamento efficace, se è troppo alta, quindi diminuisce la probabilità di recupero. Qual è l'essenza del metodo di reazione a catena della polimerasi?
L'essenza della diagnostica PCR
In caso di epatite, la PCR viene eseguita per assicurarsi che la diagnosi sia fatta. Usando questo metodo, puoi identificare il DNA del virus e determinare la sua quantità nel sangue.
Il virus del DNA nel sangue mediante il metodo PCR per l'epatite può essere rilevato alla fine del periodo di incubazione, in questo momento HBsAg può essere rilevato sullo sfondo di un livello aumentato di transaminasi, dopo di che compare HBeAg.
Con una definizione qualitativa, è possibile stabilire con precisione la diagnosi, non esiste l'epatite. Normalmente, non dovrebbe esserci DNA nel sangue. Il metodo quantitativo consente di determinare l'intensità dello sviluppo della malattia e la riproduzione del virus.
L'analisi ha una sensibilità e un'affidabilità molto elevate. Come materiale biologico prendi sangue venoso. Grazie alla moderna tecnologia, la PCR può rilevare il virus a una concentrazione di 5 × 103-104 copie / ml nel sangue. Secondo i risultati dell'analisi, conoscendo la norma, è possibile giudicare la carica virale e prevedere il trattamento.
È importante! È il DNA del virus che contribuisce allo sviluppo della cirrosi e di altre malattie croniche del fegato.
Il rilevamento del DNA mediante PCR è necessario nei seguenti casi:
Dubbi nella formulazione dell'analisi finale dopo il test. Determinazione della fase acuta della malattia. Rilevazione di forme latenti di epatite. Valutazione dell'efficacia dopo il passaggio della terapia antivirale.
Come decifrare i risultati ottenuti dopo la diagnostica PCR?
PCR quantitativo
Con la valutazione quantitativa, è possibile non solo determinare la presenza di un virus, ma anche scoprire la carica virale, se la PCR mostra un risultato positivo.
È necessario un metodo quantitativo per scoprire tali informazioni:
L'intensità dello sviluppo della malattia. L'efficacia del trattamento. Lo sviluppo della resistenza ai farmaci antivirali.
La quantificazione è molto importante quando si effettua una diagnosi di epatite cronica. In questo caso, tutti gli indicatori non rientreranno nell'intervallo normale. Il livello delle transaminasi sarà aumentato, l'indice di attività virale sarà superiore a 4 e la concentrazione di DNA virale sarà superiore a 105 copie di DNA / ml. Se la concentrazione del virus è inferiore e il livello delle transaminasi è normale, allora possiamo parlare di portatore passivo.
Prima della nomina del trattamento antivirale, il passaggio della diagnostica della PCR, cioè l'esame quantitativo, è fondamentale per determinare la carica virale.
Esegui l'analisi ogni 3 mesi e se la carica virale aumenta di 10 volte, allora possiamo parlare della resistenza del virus al trattamento.
L'analisi quantitativa fornisce informazioni molto importanti, poiché è possibile determinare la quantità di DNA patogeno presente nel sangue. Maggiore è la sua quantità, maggiore è la carica virale e più grave è la condizione del paziente. Riducendo la carica virale dopo aver subito un trattamento, si può giudicare la sua efficacia. In alcuni casi, la PCR per l'epatite è un'indicazione per ulteriori test, come una biopsia epatica. A livelli elevati di ALT, viene eseguita la PCR. La decrittografia dei test è la seguente: se la carica virale è superiore a 105 copie di DNA / ml e il livello ALT supera la norma, ma non più di 2 volte durante metà anno, allora tale paziente ha bisogno di una biopsia. Con una forte infiammazione o fibrosi, è indicato un trattamento antivirale. Se il livello ALT supera la norma di più di 2 volte con un'elevata carica virale, il trattamento viene immediatamente prescritto senza ulteriore diagnostica.
Solo i buoni specialisti saranno in grado di decifrare correttamente i risultati della PCR quantitativa.
Qualità PCR
L'analisi qualitativa consente di determinare la presenza di epatite B nel sangue. Normalmente, dovrebbe essere assente. Grazie a questo metodo, è possibile stabilire con precisione la diagnosi.
L'analisi PCR di alta qualità fornisce un risultato accurato al 100%.
Nessun altro metodo fornisce dati così affidabili. In oltre la metà dei casi dopo aver superato la diagnosi, viene rilevato il DNA del virus, in assenza di antigene. È molto importante stabilire la diagnosi nella fase iniziale della malattia.
È dimostrato che se il DNA del virus dell'epatite B si replica attivamente nel corpo umano per due mesi, la malattia diventa cronica. Se inizi a combattere il virus già durante le prime settimane dopo l'infezione, le possibilità di un recupero completo sono molto alte.
Come interpreta i risultati ottenuti dall'indagine utilizzando il metodo qualitativo?
L'analisi della decodifica è molto semplice:
Normalmente, il risultato dovrebbe essere negativo, cioè il DNA del virus non è stato rilevato. Un risultato positivo indica la presenza di epatite.
L'analisi aiuta a identificare il virus, determinarne il genotipo e iniziare un trattamento tempestivo. Molto spesso, in presenza di DNA, insieme a una valutazione qualitativa, conducono anche uno quantitativo.
Come prepararsi per il sondaggio?
Quando si analizza l'epatite utilizzando la diagnostica PCR, il sangue viene prelevato da una vena. È meglio superare un esame al mattino, poiché il sangue deve essere sempre donato a stomaco vuoto (dopo l'ultimo pasto devono passare almeno 8 ore).
Per rendere l'analisi il più affidabile possibile, il paziente deve essere consapevole di alcuni fattori che potrebbero influire sul risultato finale:
Prima di donare il sangue da una vena, è necessario riposare per 20 minuti. Inoltre, l'analisi viene data a stomaco vuoto, quindi per altre 12 ore non è possibile bere alcolici, fumare, praticare sport e mangiare cibi grassi. Alcuni medicinali che il paziente deve assumere possono influenzare il risultato finale. Il tecnico di laboratorio dovrebbe conoscere il caso del trattamento farmacologico. Se il sangue deve essere donato a un bambino di età inferiore ai 5 anni, allora in questo caso è necessario berlo ogni 10 minuti, mezz'ora prima della diagnosi. su un bicchiere di acqua bollita.
È molto importante sottoporsi a PCR in una clinica che ha funzionato bene. Infatti, nonostante il fatto che la PCR rilevi la presenza di un virus con una precisione fino al 100%, questa cifra può scendere al 95%, se consideriamo il fattore umano.
Tecnici non qualificati o una cattiva reputazione possono portare a risultati falsi.
L'essenza dell'analisi della PCR per l'epatite B e i suoi risultati
L'epatite B virale viene trattata con successo se viene rilevata nel tempo e il numero di anticorpi e antigeni nel sangue del paziente è correttamente determinato. Con l'aiuto di un saggio immunoenzimatico per l'epatite, è possibile rilevare la presenza di marcatori virali, ma non è possibile determinare lo stadio esatto del processo.
Per la valutazione quantitativa è stata utilizzata la diagnostica PCR. Utilizzando il test, è possibile contare il numero di marker, prevedere il decorso della malattia e la probabilità di cura con l'aiuto di farmaci antivirali.
Il vantaggio principale dello studio è la capacità di rilevare anche concentrazioni minime del virus, per identificare l'agente patogeno nella fase di specie.
Diagnosi di epatite B
Il virus dell'epatite B è altamente contagioso e resistente alle influenze esterne. Rimane attivo nel sangue di un paziente per diverse settimane. Pertanto, ogni persona è a rischio di infezione, anche se si osserva la profilassi.
Per diagnosticare la malattia si prescrivono i seguenti studi:
L'essenza del metodo PCR
Il chimico americano K. Mullis ha ricevuto il premio Nobel e il suo metodo diagnostico è ancora usato.
L'antenato del metodo PCR (reazione a catena della polimerasi) è considerato uno scienziato norvegese H. Kleppe. Inizialmente ha iniziato a eseguire l'amplificazione (recupero) del DNA usando una catena corta di DNA, cioè un primer sintetico (una sorta di copia).
Tuttavia, lo scienziato non è riuscito a realizzare la sua idea. Studi simili sono stati fatti dal chimico americano K.Mullis, che nel 1993 ha ricevuto il premio Nobel per la sua invenzione. Da allora, la PCR è stata utilizzata per stabilire la paternità, diagnosticare malattie genetiche e rilevare i virus.
L'essenza della reazione è che con l'aiuto degli enzimi viene copiato un certo pezzo di DNA. È possibile copiare solo l'area che corrisponde ai parametri specificati e se si trova nel campione presentato. I seguenti componenti sono utilizzati per iniziare la reazione:
- DNA matrice con un sito da copiare.
- Primer simili nella struttura del DNA.
- Polimerasi, cioè l'enzima che innesca la reazione. Dovrebbe essere termostabile, cioè per resistere a temperature estreme.
- Soluzione con determinati parametri, garantendo il passaggio della reazione.
La reazione viene eseguita in più fasi:
Per la rilevazione dell'epatite B vengono utilizzati due tipi di reazioni: quantitativa e qualitativa.
PCR quantitativa
Il metodo quantitativo determina la quantità del genoma dell'HBV
La PCR quantitativa comporta la creazione simultanea di copie di frammenti di DNA e la determinazione del numero di molecole. La misurazione viene eseguita dopo ogni fase, cioè in tempo reale. Questo risultato è ottenuto utilizzando sonde fluorescenti, che sono incluse in una catena di molecole e si illuminano in un certo periodo dello studio.
Questo metodo viene utilizzato per rilevare i frammenti di DNA che sono marcatori del virus dell'epatite. Utilizzando il metodo quantitativo, è possibile isolare con precisione il genotipo del virus. In altre parole, viene calcolato il numero di copie del genoma dell'HBV per numero di cellule del paziente.
L'analisi quantitativa fornisce risposte alle seguenti domande:
- Con quale intensità progredisce la malattia.
- Quanto è efficace il trattamento.
- Si è sviluppata la resistenza ai farmaci?
Inoltre, la misurazione quantitativa è necessaria per la diagnosi della fase cronica dell'infezione. Se la quantità di DNA è inferiore a 100 pz / ml al livello normale di transaminasi, la persona è portatrice del virus.
Nella fase acuta, la quantità di anticorpi è molto più alta.Nella terapia antivirale, un aumento del numero di anticorpi indica lo sviluppo della resistenza ai farmaci, che è un segnale per regolare il trattamento.
PCR di alta qualità
La PCR di alta qualità fornisce meno informazioni, ma può eliminare l'infezione.
La PCR di alta qualità può solo stabilire la presenza del patogeno nel sangue. Se sono assenti, il paziente non è infetto, se l'agente patogeno entra nel sangue, il risultato sarà positivo.
Tuttavia, con l'aiuto della reazione qualitativa è impossibile chiarire il genoma del virus, lo stadio della malattia. Pertanto, per la diagnosi dell'HBV sono state eseguite misure sia quantitative che qualitative.
Preparazione per il sondaggio
Il sangue venoso è richiesto per l'analisi PCR. Questo deve essere fatto al mattino a stomaco vuoto.
Il paziente deve prepararsi adeguatamente allo studio:
- Per 10 ore per rifiutare il cibo, puoi bere solo acqua pulita.
- Alla vigilia di smettere di prendere alcolici, per 4 ore non fumare.
- Prima dell'esame dovrebbe evitare lo stress fisico ed emotivo.
- Interrompere l'uso di farmaci per 2 giorni, se ciò non è possibile, è necessario informare il tecnico di laboratorio. Alcuni farmaci hanno un effetto sul risultato finale.
Interpretazione dei dati
In una reazione quantitativa, gli indicatori ottenuti vengono valutati in base al numero di copie del DNA.
È facile interpretare i dati di misurazione della qualità. Dà una risposta positiva o negativa.
In una reazione quantitativa, è possibile valutare gli indicatori ottenuti in base al numero di copie del DNA. L'unità di misura è copie / ml.
I dati sono decodificati come segue:
- Se la quantità di DNA dell'HBV è inferiore a 90, l'infezione è assente. Il paziente ha sviluppato l'immunità post-vaccinazione, oppure è stato curato dalla malattia.
- Quando il numero di copie 2x100 parla del vettore del virus.
- Il numero 2x106 indica uno stadio cronico della malattia.
- Con il DNA più di 2x109, il paziente ha uno stadio acuto di epatite.
Risultati errati
I vantaggi del metodo diagnostico usando le reazioni della polimerasi sono i seguenti:
- Rilevazione diretta di agenti patogeni. Al contrario, l'ELISA fornisce informazioni sulla presenza di anticorpi al virus.
- Specificità. Cioè, è la regione del DNA che è presente nel campione di biomateriale che viene copiato.
- Ipersensibilità. Il metodo può anche rilevare frammenti di singole cellule.
- Diagnosi di malattie negli stadi acuti e latenti. Cioè, è possibile diagnosticare la malattia allo stadio delle manifestazioni precliniche.
Il metodo ha difetti che portano a risultati falsi. Lo svantaggio più significativo è la probabilità di contaminazione del materiale. La principale fonte di contaminazione è rappresentata da provette, mani di laboratorio, reagenti scarsamente trasformati.
Parte del DNA di una precedente reazione può entrare nel sangue. Pertanto, i laboratori hanno bisogno di maggiori requisiti sanitari: stanze separate, tubi di plastica, trattamento ultravioletto dei laboratori, ecc.
Risultati falsi negativi possono essere dovuti alla ridotta sensibilità della reazione. Questo succede nelle seguenti situazioni:
- il paziente sta assumendo farmaci, ad esempio, anticoagulanti;
- la persona ha sofferto di stress fisico prima dell'analisi (fare sport, lavorare sodo);
- l'infezione si è verificata di recente.
Se il paziente ha un'alta probabilità di infezione e il risultato dello studio è negativo, deve essere riesaminato.
Vedi anche:
conclusione
Il metodo di reazione a catena della polimerasi è il principale e più informativo per la diagnosi dell'HBV. Permette non solo di stabilire lo stato portatore dell'infezione, ma anche di chiarire lo stadio della malattia, per valutare i risultati del trattamento.
Per una diagnosi più accurata, viene utilizzata una misurazione qualitativa e quantitativa. Gli svantaggi del metodo includono la probabilità di contaminazione, la sensibilità ridotta e un prezzo piuttosto elevato.
Affinché i risultati siano più affidabili, è necessario prepararsi adeguatamente allo studio e condurlo in clinica con la licenza appropriata e la buona reputazione.
Il costo degli esami del sangue e della PCR per l'epatite C.
L'epatite C è una patologia infiammatoria in cui sono colpite le cellule del fegato. La malattia si sviluppa a seguito della penetrazione del virus dell'epatite C (HVC) nel corpo umano.
La forma della malattia può essere acuta o cronica.
Molto spesso i sintomi della forma acuta di patologia nella maggior parte dei pazienti sono assenti, a volte la malattia è accompagnata da sensazioni dolorose nell'addome, diminuzione delle prestazioni, aumento della fatica, perdita di appetito, una sfumatura scura di urina, scolorimento delle feci, gonfiore della pelle e delle mucose, dolore alle articolazioni. Tali sintomi di solito si verificano 6-8 settimane dopo l'infezione, ma possono comparire dopo sei mesi.
Con lo sviluppo di tali fenomeni, è necessario contattare un'istituzione medica e sottoporsi a un esame completo dell'intero organismo. Come parte di una visita medica, viene eseguito un esame del sangue per l'epatite C.
Oggi, con l'aiuto delle moderne tecniche diagnostiche, questa patologia può essere identificata nella fase iniziale di sviluppo, che aumenta significativamente le possibilità di una cura completa della malattia.
I seguenti gruppi di persone sono tenuti a testare l'epatite C:
- le donne nel periodo del trasporto di un bambino;
- persone con segni di epatite;
- personale medico;
- potenziali donatori di organi e sangue;
- tossicodipendenti, persone infette da HIV, vita intima promiscua.
Elenco degli studi richiesti
Quali test dovrei prendere per l'epatite C? Per diagnosticare accuratamente la malattia, identificarne le cause e determinare lo stato del parenchima epatico, sono necessari i seguenti studi:
- esami generali delle urine e del sangue;
- analisi biochimica del sangue;
- Analisi PCR;
- esame del sangue per il rilevamento di anticorpi contro l'HVC;
- analisi del sangue per gli anticorpi disponibili alle proprie cellule epatiche;
- biopsia epatica.
La decifrazione di un esame del sangue per l'epatite C viene eseguita da uno specialista. Considerare ogni metodo di ricerca in modo più dettagliato, così come comprenderemo quale analisi dell'epatite C è la più accurata.
Analisi generale
Quando si esegue un emocromo completo per l'epatite C, è possibile valutare le condizioni del paziente. I cambiamenti nei parametri del sangue non sono percepiti come sintomi specifici di epatite, tuttavia, con questa malattia, ci sono tali disturbi come:
- concentrazione di emoglobina, piastrine e diminuzione dei leucociti;
- aumenta il contenuto di linfociti;
- la coagulazione del sangue è violata;
- aumenti della velocità di eritrosedimentazione (ESR).
L'analisi generale delle urine rende possibile rilevare nella sua composizione l'urobelina, un pigmento biliare che si verifica nelle urine a causa del funzionamento alterato del fegato.
Analisi biochimiche
L'analisi biochimica del sangue nell'epatite C consente di identificare tali disturbi come:
- livelli elevati di enzimi epatici (alanina transaminasi - ALT e aspartato aminotransferasi - AST), che entrano nel sangue quando gli epatociti sono danneggiati. In uno stato normale, questi indicatori per gli uomini non dovrebbero essere più di 37 IU / l, per le donne - non superiore a 31 IU // l. Un'aumentata concentrazione di ALT e AST nell'epatite C asintomatica è spesso l'unico sintomo di questa malattia. Inoltre, aumentano gli aumenti di fosfatasi alcalina glutamil transpeptidasi ematica (normalmente non superiore a 150 IU / l).
- il contenuto di bilirubina (sia generale che diretta) nel sangue viene superato. Se il livello di pigmento giallo nel siero supera 27-34 μmol / l, si verifica ittero (fino a 80 μmol / l in forma lieve, 86-169 μmol / l in moderatamente grave, sopra 170 μmol / l in forma grave).
- Il livello di albumina è abbassato, la concentrazione di gamma globuline, al contrario, è aumentata. Le gammaglobuline sono costituite da immunoglobuline - anticorpi che proteggono il corpo dalle sostanze che causano malattie.
- aumento della concentrazione di trigliceridi nel sangue.
Test PCR
Utilizzando la tecnica PCR, è possibile diagnosticare l'agente eziologico della malattia. L'esecuzione di questa analisi consente di rilevare un virus nel sangue, anche se la sua quantità è minima. L'analisi PCR per l'epatite C consente di determinare un'infezione esistente nel sangue già dopo 5 giorni dal momento dell'infezione, cioè molto tempo prima che compaiano gli anticorpi.
Se il risultato di un esame del sangue per epatite C mediante PCR è positivo, questo indica la presenza di un'infezione attiva nel corpo. Utilizzando questo metodo, è possibile condurre uno studio qualitativo e quantitativo di HVC RNA.
Durante l'analisi qualitativa della PCR per l'epatite C, è possibile rilevare un virus esistente nel corpo umano.
Questa procedura diagnostica viene eseguita se l'anti-HVC viene rilevato nel sangue.
La decifrazione dell'analisi per l'epatite C contiene informazioni che l'infezione è stata rilevata o non rilevata nel corpo. Normalmente, nel sangue non si trovano sostanze patologiche.
Se il test dell'epatite C è positivo, significa che il patogeno si divide continuamente e infetta le cellule del fegato.
I risultati di questa analisi possono essere inaffidabili, è possibile nei seguenti casi:
- biomateriale contaminato usato;
- in presenza di eparina nel sangue;
- in presenza di sostanze chimiche o proteiche (inibitori) nel biomateriale studiato, che influenzano gli elementi della PCR.
L'analisi quantitativa dell'epatite C fornisce informazioni sulla quantità di virus contenuto nel sangue, cioè determina la carica virale. Con questo concetto si intende il volume di HVC RNA presente nel sangue (ad esempio, in 1 ml). Nell'interpretazione dell'analisi quantitativa dell'epatite C, questo valore è espresso in equivalente digitale, misurato in UI / ml.
Il sangue per PCR per l'epatite C viene assunto prima delle misure terapeutiche. Dopo l'analisi viene eseguita a 1, 4, 12 e 24 settimane. Lo studio alla settimana 12 è indicativo e viene condotto per valutare l'efficacia delle procedure terapeutiche.
Se il test per l'epatite C durante la gravidanza è positivo e vengono superati i valori di carica virale, il rischio di trasmissione di agenti patogeni dalla madre malata al bambino aumenta più volte. Inoltre, con una elevata carica virale, l'implementazione di misure terapeutiche è difficile.
Secondo la trascrizione dei test per l'epatite C, se i valori di carica virale superano 800.000 IU / ml, allora è alto. Se le cifre sono inferiori a 400.000 IU / ml, il livello di carica virale è considerato basso.
L'analisi dell'epatite C mediante PCR è considerata la più accurata e presenta numerosi vantaggi rispetto ad altre opzioni di ricerca, in particolare:
- diagnosi diretta dell'agente eziologico della malattia. Quando si eseguono studi tradizionali sono determinati dalla presenza di marcatori proteici che sono prodotti di scarto di agenti patogeni. Questo indica solo che l'infezione è presente nel sangue. Durante il test per l'epatite C mediante PCR, è possibile determinare il tipo di patogeno della patologia pericolosa.
- specificità della tecnica. Durante questa procedura, nel biomateriale viene determinata una regione di DNA unica che corrisponde a un solo tipo di agente patogeno. Ciò minimizza la probabilità di risultati falsi.
- alta sensibilità. Quando si esegue l'analisi PCR, è possibile rilevare la quantità minima di virus. Questo è importante se vengono identificate sostanze patogene condizionatamente che rappresentano una minaccia solo se il loro livello aumenta.
- Quando si utilizza questa tecnica in un campione di biomateriale, è possibile rilevare diversi agenti patogeni contemporaneamente.
- può rilevare infezioni nascoste. Inoltre, l'analisi consente di diagnosticare microrganismi patogeni che vivono all'interno delle cellule e hanno un'elevata variabilità antigenica.
Se i risultati del test sono positivi, le tracce del virus si trovano nel biomateriale, quindi la rete ha un'infezione nel corpo.
Un'analisi PCR negativa per l'epatite C indica che non vi sono tracce di infezione nel biomateriale.
Studio immunologico
Questo metodo consente di identificare gli anticorpi contro tutti i tipi di virus dell'epatite, così come gli anticorpi contro le cellule del fegato del proprio corpo, la cui comparsa contribuisce allo sviluppo dell'epatite autoimmune.
I risultati ottenuti durante lo studio sono rilevanti per 3 mesi, quindi è necessario ri-donare il sangue per l'epatite C.
È anche possibile eseguire uno studio rapido utilizzando strisce reattive speciali. Questa analisi consente di determinare gli anticorpi del virus C nella composizione del sangue e della saliva, procedura che può essere eseguita indipendentemente, a casa.
Biopsia epatica
Per eseguire questa analisi, viene prelevato un elemento del parenchima epatico e viene eseguito un esame istologico del biomateriale ottenuto. Ciò consente di valutare le condizioni del corpo: identificare focolai infiammatori, necrotici, stadio di fibrosi e così via.
Oggi vengono utilizzati test che sostituiscono l'analisi istologica del parenchima epatico.
Per valutare lo stadio del danno epatico e l'intensità del processo di infiammazione, vengono utilizzati biomarcatori del sangue venoso specifici. Utilizzando Fibrotest, è possibile stimare il grado di crescita del tessuto fibroso.
Quando si esegue Actitest è possibile ottenere informazioni sull'intensità dei processi patologici nel parenchima epatico. Utilizzando Steatototesta è possibile diagnosticare il tessuto adiposo del fegato e valutare l'entità di questo processo. Fibromax comprende tutti i test sopra elencati e può includere altri studi.
Preparazione per lo studio
Quali sono i test per l'epatite C e come abbiamo scoperto questo o quel tipo di ricerca. È altrettanto importante sapere come prepararsi per l'analisi.
Per ottenere risultati affidabili, si raccomanda di rispettare i seguenti requisiti:
- Le prove dell'epatite C devono essere prese al mattino, a stomaco vuoto. L'ultima volta il cibo dovrebbe essere consumato almeno 8 ore prima dello studio.
- Il biomateriale può essere raccolto durante il giorno o la sera. In questo caso, è importante che trascorrano almeno 5-6 ore tra l'ultimo pasto e l'analisi.
- prima di donare il sangue per l'epatite C, scartare il tè, il caffè, il succo o altre bevande, è ammessa solo acqua.
- 48 ore prima dello studio, è necessario escludere l'uso di cibi grassi, fritti e bevande contenenti alcol.
- per almeno un'ora prima dell'analisi, devi astenersi dal fumare.
- l'analisi non deve essere eseguita immediatamente dopo un esame ecografico, strumentale, a raggi X, seduta di massaggio o fisioterapia.
- un giorno prima dell'esecuzione dello studio, è necessario escludere l'uso di droghe e attività fisica intensiva. Lo stress emotivo è anche controindicato.
- Si consiglia di trascorrere 15 minuti prima di eseguire lo studio in uno stato calmo.
Effettuare la procedura di raccolta del sangue
Dove fare il test per l'epatite C? Il biomateriale viene utilizzato per ulteriori indagini nel laboratorio di un istituto medico o a casa del paziente.
Il sangue da una vena è preso come segue:
- utilizzando un laccio emostatico speciale avvolto attorno all'avambraccio del paziente, il flusso venoso viene interrotto. Grazie a tali manipolazioni, le vene saranno riempite di sangue e saranno più visibili, il che faciliterà notevolmente il processo di inserimento dell'ago.
- l'area della pelle in cui verrà inserito l'ago viene accuratamente trattata con alcool o liquido contenente alcol.
- Un ago viene inserito delicatamente in una vena, quindi viene attaccata una provetta, appositamente progettata per la raccolta del sangue.
- Immediatamente dopo l'inserimento dell'ago nella vena, l'imbragatura viene rimossa dal braccio del paziente.
- dopo aver raccolto il volume di sangue necessario per l'analisi, l'ago viene delicatamente rimosso dalla vena.
- Sul sito di iniezione deve essere applicato un tampone di cotone sterile o una garza inumidita con alcool.
- per prevenire il verificarsi di un ematoma, il tampone deve essere premuto con un certo sforzo contro l'area di inserimento dell'ago, piegare il braccio all'altezza dell'articolazione del gomito e tenerlo in questa posizione per diversi minuti. Tali azioni aiuteranno anche a fermare il sangue più velocemente.
A condizione che la tecnica di amministrazione interna sia buona, questa procedura è assolutamente sicura e non causa sensazioni dolorose.
In rari casi, dopo la raccolta del sangue, le vene possono gonfiarsi. Questo fenomeno è chiamato "phlebitis". Un impacco (non caldo) aiuterà a risolvere il problema, dovrebbe essere applicato a zone gonfie della pelle più volte al giorno.
Alcuni problemi possono verificarsi anche in presenza di una patologia emorragica. L'assunzione di aspirina, warfarin e altri fluidificanti del sangue può causare sanguinamento. Ecco perché prima di eseguire l'analisi è necessario rifiutarsi di prendere qualsiasi farmaco. Se il trattamento non può essere annullato, è necessario informare lo specialista.
Date e prezzi
Quanto viene testato per l'epatite C? I risultati di un esame del sangue per l'epatite possono essere pronti in poche ore e in pochi giorni (di solito non più di 8 giorni). La durata della preparazione dei risultati dipende dal tipo di virus e dal metodo di analisi scelto. Più veloce è lo studio condotto con il metodo PCR. I risultati in questo caso saranno pronti in poche ore.
Quanto costa un test per l'epatite C? A seconda della clinica e della complessità dello studio, il prezzo della procedura può variare da 400 a 11.000 rubli.
Dovresti essere consapevole che potrebbero essere necessarie diverse settimane per formare una quantità sufficiente di anticorpi contro HVC. Pertanto, in una fase iniziale dello sviluppo della patologia, il risultato di uno studio potrebbe essere falso-negativo.
Inoltre, ottenere dati inaffidabili è possibile con analisi di scarsa qualità e violazione delle condizioni di trasporto del biomateriale ottenuto (i campioni devono essere consegnati al laboratorio per un massimo di 2 ore dopo il prelievo di sangue).
Se il risultato dello studio è positivo, è necessario contattare immediatamente un medico per le malattie infettive. Lo specialista effettuerà un ulteriore esame e prescriverà il trattamento appropriato.