La disponibilità di moderni farmaci antiepatite B (HBV) con chiare indicazioni per la loro somministrazione richiede una verifica accurata e rapida della diagnosi. Tuttavia, a causa di scarsi dati clinici nelle prime settimane della malattia e di metodi di analisi immunologici limitati, il tasso di diagnosi diminuisce.
La presenza di marker anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe consente di confermare l'HBV o stabilire il fatto di una precedente malattia. Ma è possibile determinare la presenza di particelle virali attive nel sangue e contare il loro numero al momento dello studio mediante PCR - un test quantitativo in tempo reale per la rilevazione dell'epatite B. Il metodo, rispetto ai metodi diagnostici ELISA, risolve i problemi diagnostici e consente di predire il decorso della malattia durante la ricezione farmaci antivirali.
Nozioni di base sulla diagnosi della malattia
La diagnosi di epatite B si basa sulla valutazione delle manifestazioni cliniche, del saggio immunoenzimatico e dei metodi strumentali di ricerca. La malattia si verifica nella fase acuta dopo il periodo di incubazione e, a seconda della dose di infezione e dell'efficacia del trattamento, entra in uno stadio cronico. L'obiettivo principale del trattamento è quello di prevenire la cronizzazione, cioè l'eliminazione di tutte le particelle virali dal sangue. Il decorso clinico della malattia è una cura senza successiva viremia.
Il fatto di eliminare l'infezione deve essere dimostrato da un metodo quantitativo di ricerca.
Poiché qualsiasi test immunoenzimatico qualitativo rende possibile la diagnosi indiretta dell'HBV, cioè non mostra la presenza dell'agente patogeno nell'ambiente interno del corpo, ma caratterizza la risposta immunitaria all'infezione, monitorando l'efficacia della terapia e il fatto di curare diventa difficile da dimostrare. Pertanto, il paziente con epatite B o con la presenza di criteri diagnostici a suo favore deve essere effettuato la reazione a catena della polimerasi al fine di quantificare il numero di particelle virali nel sangue. Il tasso diagnostico è la mancanza di copie del DNA dell'infezione.
Descrizione del metodo diagnostico
Il metodo altamente sensibile della diagnosi di PCR dell'epatite B appartiene alla categoria degli studi biologici molecolari ingegnerizzati geneticamente. Attraverso esso è determinato dalla quantità di DNA virale nel materiale biologico del paziente e il tasso ammissibile. In base ai risultati ottenuti, viene stabilito il numero di particelle virali per unità di volume. Il materiale per il test diagnostico è il sangue venoso del paziente. Un'assunzione è desiderabile a stomaco vuoto a causa del possibile effetto del siero chilo sul risultato dello studio.
I risultati ottenuti devono essere forniti al medico per l'interpretazione e la determinazione di ulteriori tattiche. La decodifica indipendente non rappresenta un valore diagnostico.
Il significato del risultato del numero di particelle virali ottenuto con il metodo PCR supera il valore dei saggi immunologici enzimatici. Poiché l'analisi in modalità in tempo reale mostra la presenza dell'agente causativo della malattia nel sangue, il suo contenuto informativo è superiore ad altri. Se il test ELISA indica solo la presenza di anticorpi, osservati da 4 settimane del periodo di incubazione e che durano più di 8 settimane dopo l'eliminazione del virus dal sangue, la reazione a catena della polimerasi conferma chiaramente il decorso attivo della malattia o la sua cura, caratterizza la dinamica della terapia prescritta.
La reazione a catena della polimerasi con determinazione quantitativa delle particelle patogene risolve le domande diagnostiche a favore dell'arresto del trattamento a causa del recupero o della terapia continua a causa della sua mancanza di efficacia. Il metodo è il più specifico possibile per il virus HBV e si distingue per un errore accettabile.
Indicazioni e obiettivi di prestazione
L'analisi quantitativa dell'epatite B è la più affidabile e consente di confermare i dati ottenuti con i metodi ELISA. Viene nominato quando:
- ottenere un risultato diagnostico positivo di ELISA;
- trattare un paziente con una diagnosi accertata di danno epatico virale;
- nella diagnosi di epatite mista eziologia;
- se necessario, determinare la carica virale in un paziente.
Poiché il metodo del saggio immunologico enzimatico è usato più ampiamente nella pratica di uno specialista di malattie infettive, alcuni pazienti con malattia lieve possono essere trattati senza dover contare la carica virale. Ma la PCR è generalmente considerata il "gold standard" della diagnostica in epatologia, poiché, a causa dell'unicità del suo risultato, rimuove una serie di problemi organizzativi. Pertanto, la direzione del paziente per l'analisi quantitativa ha i seguenti obiettivi:
- ottenere dati sul numero di particelle virali nel sangue del paziente;
- conferma del decorso acuto dell'epatite e verifica tempestiva della malattia cronica;
- rilevamento costante di portatori di virus latenti con test ELISA positivi, monitoraggio della loro viremia;
- decidere la nomina di un trattamento antivirale, la sua combinazione e la risoluzione.
L'obiettivo più significativo di applicare un test quantitativo di PCR per rilevare l'HBV è identificare possibili combinazioni di trattamento. In caso di elevata carica virale, il risultato dell'analisi offre allo specialista l'opportunità di procedere con la combinazione di farmaci. Durante la terapia, è facile determinare l'efficacia del trattamento farmacologico prescritto in base al risultato della PCR. Guidato solo dai dati dei metodi di immunodosaggio, è impossibile determinare tempestivamente il fatto del trattamento e la sua efficacia attuale. Pertanto, un test quantitativo in tempo reale è un'analisi necessaria prima di iniziare il trattamento per l'epatite acuta, l'infezione da virus latente con alta viremia e HBV cronica.
Interpretazione dei risultati quantitativi della prova PCR
L'interpretazione dei risultati del test quantitativo della PCR deve essere eseguita dal medico curante del paziente. È necessario valutare l'indicatore diagnostico e determinare le tattiche terapeutiche.
Un analizzatore standard è in grado di produrre un indicatore quantitativo che rifletta il numero di copie del DNA virale presente nel sangue venoso studiato. Unità di misura: copie / ml, UI / ml (copie per millilitro, unità internazionali per millilitro). L'interpretazione dei risultati è riportata nella tabella con l'indicazione delle diverse unità di misura.
Tipi di PCR per l'epatite B e interpretazione dei risultati
La reazione a catena della polimerasi è un tipo di analisi del sangue che può rilevare con precisione il virus dell'epatite B. Una caratteristica del metodo è che è in grado di mostrare l'HBV nelle sue fasi iniziali - un mese dopo l'infezione, mentre un antigene specifico viene rilevato in un paziente solo dopo 2 mesi. La PCR può rilevare non solo un normale virus del DNA, ma anche ceppi mutanti che nessun'altra analisi può vedere.
Quando si decodifica la PCR per l'epatite B, i risultati vengono confrontati con i valori standard. Sulla base di ciò, vengono tratte conclusioni sulla presenza della malattia (risultato positivo), sulla concentrazione del virus (attività) o sull'assenza della malattia (risultato negativo). L'elaborazione dei dati è di 2 settimane.
Tipi di PCR per l'epatite virale B
Esistono 2 tipi di diagnostica prescritti per l'epatite B. La PCR di alta qualità consente, con un'accuratezza del 100%, di stabilire se l'HBV è nel sangue o meno. La PCR quantitativa mostra l'attività del virus, cioè la quantità di DNA dell'HBV contenuta in 1 ml di sangue.
PCR di alta qualità e sua interpretazione
Un esame del sangue per l'epatite B mediante PCR può rilevare solo la presenza di frammenti di DNA. Nominato nel caso in cui il paziente sospetti un'infezione da HBV (HBV) o quando altri metodi di diagnosi, ad esempio, i test sierologici non danno una risposta chiara. Decodificare i risultati quando si esegue un'analisi qualitativa è molto semplice:
- risultato negativo - nessun virus;
- risultato positivo - virus rilevato.
Lo scopo della PCR di alta qualità è di confermare o negare la presenza del virus dell'epatite B, nonché di condurre una diagnosi precoce. Se l'HBV viene rilevata entro 1-2 settimane dall'infezione, il trattamento sarà il più efficace possibile. Con lo sviluppo attivo dell'HBV per 2 mesi e oltre, la malattia diventa cronica e non può essere completamente curata.
Nel caso in cui la PCR di alta qualità per l'epatite sia indicata dalla presenza di un virus, il passo successivo è condurre una diagnosi quantitativa.
PCR quantitativa
Ai fini dell'efficacia del trattamento o della valutazione dei risultati della terapia, semplicemente sapere che il paziente ha l'HBV non è sufficiente. È necessario quantificare il valore del DNA del virus dell'epatite B in 1 ml di sangue, cioè la carica virale sul corpo. Questo tipo di PCR per l'epatite B viene eseguito nei seguenti casi:
- Prima di prescrivere il trattamento.
- Valutare l'efficacia della terapia.
- Determinare lo sviluppo della resistenza virale ai farmaci assunti.
- Determinare la fase in cui si trova la malattia.
L'unità di misura per un virus è unità internazionali (UI / ml) o il numero di copie del DNA / ml, cioè il numero di frammenti di DNA per 1 ml di sangue. Il rapporto tra le due unità dipende dal sistema di test selezionato e varia da 2 a 7 copie / ml in 1 IU / ml. Se il sistema è sconosciuto, il valore medio viene utilizzato per la conversione:
1 IU / ml = 5 copie / ml
Se l'analisi quantitativa viene effettuata immediatamente, il tasso marginale per diagnosticare la malattia è di 75 UI / ml. Quando il risultato è sopra questo indicatore, viene fatta la diagnosi di HBV, sotto - HBV non viene rilevato.
Trattamento della PCR quantitativa
Nell'epatite B, i seguenti valori virali (viremia), copie / ml, sono gli standard PCR:
- 10 ^ 5 copie / ml. Quando, con una grande attività virale, si verifica un aumento del livello di ALT più spesso 2 volte in sei mesi, viene immediatamente prescritta una terapia antivirale.
Per scoprire come si comporterà l'epatite del DNA in termini di cronicità, cioè la transizione verso la forma cronica da acuta, vengono utilizzati anche i risultati della diagnostica PCR:
- DNA di HBV di 2 x 10 ^ 6 copie / ml significa che l'acquisizione della forma cronica della malattia è inevitabile.
Preparazione per il sondaggio
Per determinare la presenza di HBV mediante PCR, il sangue viene prelevato da una vena. La procedura viene sempre eseguita rigorosamente a stomaco vuoto ed è meglio arrivare al laboratorio al mattino quando il tempo naturale di riposo dal cibo è di 8 ore. Affinché i risultati dell'esame siano corretti, è necessario sapere in anticipo come prepararsi per andare in clinica correttamente. Ulteriori passaggi sono i seguenti:
- Rifiuto da cibi grassi, fumo, alcol e sport per 12 ore prima della procedura.
- Riposa per 20 minuti immediatamente prima di donare il sangue.
- Prima di iniziare la procedura, l'infermiera deve essere avvertita dei farmaci presi.
Attenzione! Se la diagnosi viene effettuata a un bambino di età inferiore ai 5 anni, mezz'ora prima della procedura, deve bere 1 bicchiere di acqua bollita ogni 10 minuti.
Riassumendo
Ad oggi, la diagnostica della PCR per il rilevamento dell'epatite B è il metodo più accurato. Il metodo consente di vedere le forme nascoste e mutate della malattia, identificare la malattia nelle prime settimane dopo l'infezione e, di conseguenza, condurre un trattamento efficace. A seconda della situazione, viene eseguita la PCR qualitativa o quantitativa, che ha lo scopo di rilevare HBV e stabilirne l'attività. Per essere testato, è necessario contattare un virologo, uno specialista in malattie infettive o un epatologo.
DNA dell'epatite B e PCR
I test del DNA e la PCR del virus dell'epatite B sono i test più sensibili che rilevano tracce di DNA molecolare nel fegato che identificano la presenza di un virus. L'essenza del metodo consiste nella copia multipla di un frammento di DNA appartenente all'agente causale della malattia.
La PCR dell'epatite B è una reazione a catena della polimerasi di un reagente chimico esterno con il materiale biologico in esame, volto ad identificare le molecole di DNA virale nel sangue e i loro indicatori quantitativi per unità di volume. L'analisi è assegnata nei seguenti casi:
- se manifesta segni di epatite B in un paziente;
- durante attività diagnostiche per epatite mista;
- per chiarire l'efficacia della terapia.
Per l'analisi PCR, viene raccolto sangue venoso. Prima dello studio, dovresti astenermi dal mangiare circa 8 ore.
Un risultato normale quando si rileva il DNA in un virus è considerato "non rilevato". Significa che il virus è assente nel sangue o il suo contenuto è insignificante. La diagnosi finale può essere fatta solo da uno specialista sulla base di un'analisi completa biochimica e immunologica del plasma sanguigno per l'epatite di tipo B. Il medico prescrive un corso di terapia. L'automedicazione comporta troppo rischio.
Il prelievo di sangue venoso viene effettuato per l'analisi PCR.
Il metodo PCR consente di rilevare il DNA del patogeno anche con la sua presenza minima nel campione di sangue selezionato. Inoltre, l'analisi consente di rilevare antigeni già sviluppati per il virus. Ciascuno degli antigeni indica uno stadio specifico della malattia:
- HBsAg: il virus è presente al momento.
- Anti-HBcor - il patogeno è attualmente assente, ma c'era in passato.
- Anti-HBs - nel sangue ci sono anticorpi contro l'epatite B (come opzione - herpes, HIV, clamidia, micoplasmosi, candidosi, tubercolosi, encefalite trasmessa dalle zecche e molte altre malattie).
Patologia e suoi segni
L'epatite B o HBV è un'infezione virale che colpisce le cellule del fegato. È pericoloso non solo per l'azione diretta sul parenchima dell'organo, che indebolisce la funzione barriera e l'immunità generale. Sono possibili conseguenze più gravi, come la cirrosi epatica e la comparsa di neoplasie maligne.
L'HBV viene trasmessa attraverso il sangue di una persona infetta da epatite, i suoi escrementi, attraverso il contatto con le membrane mucose, specialmente durante i rapporti sessuali, le lesioni cutanee, attraverso siringhe non sterili durante la trasfusione di sangue o durante operazioni addominali. Un neonato può essere infetto dalla madre malata quando tocca le crepe nei capezzoli.
I seguenti sintomi sono caratteristici dell'epatite B:
Affaticamento insolito
- aumento della fatica a bassi carichi;
- stanchezza insolita;
- pesantezza nell'ipocondrio destro;
- appetito ridotto, nausea;
- giallo della pelle, sclera degli occhi;
- feci luminose;
- urina scura;
- dolore alle articolazioni.
Il periodo di incubazione, dopo il quale questi sintomi iniziano ad apparire, varia da uno a sei mesi. Questo è il periodo di accumulo delle cellule virali nel sangue epatico. Quando la loro concentrazione raggiunge una massa critica, il virus si rompe attraverso le membrane degli epatociti e continua a moltiplicarsi all'interno delle cellule. Come risultato, le cellule del fegato muoiono, si sviluppa la cirrosi, che, in assenza di appropriate misure terapeutiche, provoca la morte del paziente. Un esame del sangue tempestivo per PCR e DNA dell'epatite B aiuta a evitare quelli negativi.
Le indicazioni per la PCR sono:
- test positivo del DNA che conferma la diagnosi di epatite B;
- epatite acuta e cronica;
- epatite mista;
- determinazione quantitativa del virus nel siero del sangue;
- sviluppo di tattiche di terapia efficace.
Preparazione per l'analisi
La preparazione per la diagnosi mediante PCR è determinata dal tipo di biomateriale. Quindi sangue e urina donano solo al mattino, a stomaco vuoto. Preso anche strisci e graffi dalla zona urogenitale. L'unica restrizione per le donne è il ciclo mestruale. Il sesso è limitato per entrambi i sessi alla vigilia della ricerca.
I risultati della PCR possono essere considerati affidabili solo se il paziente è adeguatamente preparato per la procedura. Questo studio implica le seguenti condizioni:
- pieno di conforto spirituale, assenza di eccitazione. Per garantire che questa analisi possa essere superata anche a casa. È solo necessario chiamare un medico con l'attrezzatura appropriata;
- astenersi dal cibo, dall'alcol, dal fumo, dall'attività fisica almeno 8-12 ore prima dell'analisi, altrimenti i dati della ricerca saranno distorti;
- 15-20 minuti di completo rilassamento prima della raccolta del sangue;
- interruzione dei farmaci (se ciò non è possibile, il laboratorio deve essere avvisato);
- bambini sotto i cinque anni per mezz'ora prima che l'analisi dovrebbe essere data acqua bollita da bere in piccole porzioni.
Come è lo studio
L'analisi PCR si basa sui principi utilizzati dalla biologia molecolare. Consistono nell'uso di speciali enzimi che scindono e replicano parti del DNA e RNA dell'agente infettivo che si trova nel sangue. Dopo questa operazione, i campioni ottenuti vengono identificati dal database disponibile in laboratorio. Allo stesso tempo, vengono rilevati il tipo di infezione e la concentrazione nel sangue del patogeno.
Per lo studio viene utilizzato un amplificatore, un termostato in grado di riscaldare e raffreddare i tubi con biomateriale. Questo è necessario per l'attivazione dei processi di replica. La precisione dell'analisi dipende dalla precisione dei parametri di temperatura.
Decodifica risultati
Un risultato positivo per il paziente è la conclusione di laboratorio "non rilevata". Significa l'assenza di DNA di epatite B nel sangue: in termini numerici, si tratta di circa 120 UI / ml o 200 copie per la stessa unità di volume di sangue. Questo valore è la norma. Il requisito per il materiale biologico è che non dovrebbe essere contaminato.
La decodifica degli altri risultati dell'analisi consente di effettuare le seguenti diagnosi:
- La concentrazione di DNA dell'epatite B nel sangue è superiore a 200 copie, ma al di sotto del livello critico. La patologia grave è assente.
- Viremia in forma lieve, fino a 500 copie per ml. La scelta del trattamento dipende dagli indicatori della biopsia epatica e dal grado di deterioramento delle sue funzioni.
- Aumento della concentrazione del virus (più di 500 copie / ml). Il processo infiammatorio nella fase attiva e richiede una terapia antivirale intensiva.
- Carico virale massimo (oltre 800 copie per ml.). Le misure terapeutiche sono sviluppate sulla base delle condizioni del paziente e sono interamente finalizzate al massimo miglioramento possibile.
Determinare gli indicatori quantitativi del contenuto di DNA dell'epatite B durante la PCR è la base per la scelta del decorso terapeutico. Dopo tre o sei mesi, i test vengono nuovamente eseguiti per testare l'efficacia della terapia antivirale.
Funzione di reazione a catena della polimerasi
Nel metodo della PCR si utilizzano due approcci per la determinazione del DNA appartenente al virus: qualitativo e quantitativo.
Un approccio qualitativo conferma o nega la presenza di epatite B. La PCR è prescritta su richiesta di un paziente che sospetta di essere infetto da infezione da HBV o nel caso in cui la diagnosi precoce non dia risultati inequivocabili in nessun altro modo.
Se il virus dell'epatite B può essere rilevato entro due settimane dall'ingresso nel corpo, è molto probabile una prognosi positiva per il trattamento. In futuro, la malattia inizierà a progredire. Dopo circa due mesi, entrerà in una fase cronica. Una cura completa in questo caso diventerà impossibile.
Un approccio quantitativo alla PCR viene utilizzato solo quando viene rilevato un virus. Valuta:
- carica virale specifica sul fegato;
- l'intensità della progressione della malattia;
- resistenza ai farmaci antivirali;
- efficacia del trattamento.
Questi indicatori hanno un'importanza pratica diretta. Indicatore quantitativo del DNA. La prognosi nella fase acuta dell'epatite B dipende dalla concentrazione del virus nella circolazione sanguigna del fegato, pertanto la bassa concentrazione di cellule virali esclude quasi completamente la transizione dell'epatite acuta a quella cronica. Tali pazienti non rappresentano un pericolo per gli altri. Un'elevata carica virale contribuisce alla cronologia del processo patologico e alla possibilità di infezione da epatite nelle persone che sono in contatto con il paziente.
Esiste anche un legame tra la concentrazione dei geni virali nel sangue e la degenerazione cirrotica del fegato e l'insorgenza del cancro del suo parenchima.
I test PCR aiutano il medico a rilevare i portatori di virus.
L'efficacia della terapia antivirale è determinata dal grado di diminuzione della concentrazione del DNA dell'epatite B nella circolazione epatica. Un risultato sufficiente è la riduzione della carica virale di 1-2 volte con un trattamento intensivo da tre mesi a sei mesi. Tassi più bassi richiedono un cambiamento nel trattamento.
La prognosi dello sviluppo della patologia e la nomina della terapia appropriata provengono da:
- volume quantitativo di DNA di virus epatico in siero di sangue;
- parametri biochimici correlati (ad esempio, il livello di leucociti nel sangue e il contenuto di bilirubina lì);
- marcatori di infezione virale;
- risultati della biopsia epatica.
PCR per uso generale
Le analisi con l'aiuto della reazione a catena della polimerasi aiutano il medico:
- rilevare i portatori del virus;
- prevedere lo sviluppo dell'epatite di tipo B;
- assicurarsi che la malattia diventi cronica;
- monitorare l'attività del virus in tutte le fasi di sviluppo;
- identificare i ceppi mutanti e nascosti dell'epatite B;
- valutare l'efficacia del trattamento del virus quando si sceglie una determinata tattica e modificarla in caso di successo insufficiente.
Vantaggi del metodo
A differenza di altri test utilizzati per diagnosticare l'epatite B, la PCR ha:
L'analisi PCR è estremamente sensibile.
- Sensibilità eccezionale La tecnica consente al ricercatore di rilevare l'agente causale della malattia, anche se la concentrazione delle sue molecole di DNA nel sangue è minima. Ciò consente di adottare misure preventive e curative in una fase precoce della malattia, quando apparentemente non è ancora espressa da alcun sintomo.
- Ampia copertura di opportunità. La PCR può rilevare non solo l'agente eziologico dell'epatite virale B, ma anche una serie di altre patologie.
- Universalità degli approcci. Il biomateriale per la ricerca può essere sangue, saliva, cellule mucose e pelle.
- Efficienza. La conclusione sarà pronta esattamente un giorno dopo il prelievo di sangue (il risultato dell'analisi stessa è ottenuto entro e non oltre 7 ore).
- Affidabilità. In tutte le condizioni del metodo PCR, non mostra mai dati falsi.
- Studio sull'accessibilità dei prezzi. Al costo, la PCR è solo leggermente superiore ai soliti test che usano il sangue come biomateriale.
L'unico costo della ricerca è la sua complessità tecnologica. Per un'implementazione di alta qualità della PCR è necessario disporre di un biomateriale estremamente pulito, di attrezzature moderne e di personale ben addestrato. È preferibile richiedere la diagnostica con questo metodo a laboratori specializzati.
L'epatite virale B si riferisce a malattie, una cura completa di cui è possibile solo nelle prime fasi dello sviluppo. Identificare la malattia in questa fase aiuta la diagnosi ipersensibile mediante PCR. I primi sintomi che causano il sospetto di danno epatico da parte di un virus dovrebbero essere un motivo per consultare uno specialista. Se la diagnosi è confermata, il trattamento dovrebbe iniziare immediatamente. Ciò migliorerà la prognosi e aumenterà la probabilità di sostenere il fegato in uno stato sano per molti anni.
Decifrazione dell'analisi del sangue per l'epatite B
L'epatite B è una delle malattie più pericolose del nostro tempo.
È causato da un virus che entra nel corpo quando il sangue entra in contatto con materiale biologico infetto, compresi quelli che rimangono su accessori per manicure, strumenti medici, macchine per tatuaggi che non sono state disinfettate nel modo corretto. Il virus può anche essere trasmesso attraverso il contatto sessuale.
L'epatite B viene analizzata per diagnosticare la malattia prelevando il sangue del paziente.
L'infezione avviene attraverso percorsi sessuali e domestici, il tipo di diffusione è ematogena (attraverso il sangue). Una volta infettato, il virus entra negli epatociti (cellule epatiche), che viene prodotto in futuro. Attraverso il flusso sanguigno, la malattia si sta rapidamente diffondendo in tutto il corpo. Il virus B (HBV) è caratterizzato da un'elevata resistenza agli effetti della temperatura e dell'acido ed è in grado di mantenere le sue proprietà dannose per sei mesi.
Quali esami del sangue hai per l'epatite B?
Se l'epatite B ha mostrato i primi sintomi, è necessario superare i test prima di iniziare la terapia e il trattamento. Un esame del sangue è un metodo affidabile per l'installazione dell'infezione da epatite. Condotto in laboratorio. Il materiale di test dell'epatite B viene somministrato a stomaco vuoto: un minimo di 8 ore deve passare dall'ultimo pasto.
Per rilevare il virus dell'epatite B nel sangue, vengono utilizzati test di tre tipi che caratterizzano la presenza del virus nel sangue:
- analisi per la presenza di DNA di HBV nel materiale studiando la reazione a catena della polimerasi;
- studio qualitativo della presenza della proteina IgG anti-HBc e dell'antigene HBsAg (presente in soggetti sani, infetti e malati);
- analisi per il rilevamento di proteine HBeAg e anti-HBc IgM (caratterizzano il peggioramento della malattia).
Per completezza, si consiglia di condurre simultaneamente ricerche su diversi marker.
Test immunologici per l'epatite B
I test più comuni per l'epatite B sono immunologici. La loro essenza è di rilevare gli anticorpi nel sangue prodotto dal corpo o dal fegato. I campioni sono qualitativi e quantitativi. I test e le trascrizioni dell'epatite B di solito contengono informazioni su diverse proteine caratteristiche. Durante il test, vengono testati i seguenti anticorpi:
Si manifesta nelle prime fasi dell'infezione prima dell'insorgenza dei segni clinici.
Un marker positivo indica la presenza di un virus, ma si trova anche in persone completamente sane. Se nel sangue è presente meno di 0,05 UI / ml, il risultato è considerato negativo. Se la concentrazione dell'anticorpo è più alta, l'analisi è considerata positiva.
Si trova praticamente in ogni paziente infetto. Mantenere gli indicatori ad alto livello può indicare una transizione della malattia in una forma cronica del corso. Un marker positivo indica la presenza della malattia nel periodo di esacerbazione, recupero prolungato. L'HBeAg è un segno estremamente negativo. Il paziente è molto contagioso. Normalmente, la proteina non viene rilevata nel sangue.
Esistono due tipi di anticorpi anti-HBc: IgG e IgM. La presenza di IgM nel sangue è un segno del decorso della forma acuta, l'alta infettività del paziente e la possibilità della malattia pererohoda nella forma cronica. Normalmente, la presenza di IgM non è consentita. IgG è un indicatore favorevole. Il marcatore indica l'immunità corporea contro l'epatite B.
Se viene rilevato un marcatore nel sangue, si può trarre una conclusione sul decorso favorevole della malattia e sulla formazione dell'immunità protettiva nel paziente.
- Anti-HBs.
Il segnale segnala il recupero e la formazione di immunità.
Rilevazione del DNA dell'HBV mediante PCR
Per l'analisi di laboratorio e il rilevamento della presenza di una diagnosi di epatite B nel sangue, viene utilizzato il metodo PCR. Il modo in cui viene considerata la reazione a catena della polimerasi è il più aggiornato nel campo del rilevamento della malattia.
La decodifica finale mostra se ci sono tracce della presenza genica del patogeno nelle cellule del fegato.
Se tutti i principi vengono seguiti durante la ricerca, il risultato è assolutamente accurato. Il metodo viene utilizzato per la diagnosi, utilizzato nel processo di trattamento e nella terapia antivirale.
- Una PCR di alta qualità sul totale ha solo due significati: "rilevato" e "non rilevato". La procedura viene eseguita per ogni paziente con sospetta epatite. Con una sensibilità media del test PCR nell'intervallo da 10 a 500 UI / ml, con bassi livelli di DNA di virus nel sangue, non verrà rilevato alcun materiale genico.
- PCR quantitativa. In contrasto con la qualità, indica non solo l'epatite B. L'analisi quantitativa indica fino a che punto la norma di una persona sana è lontana dagli indicatori del paziente in termini numerici. Il metodo consente di valutare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento. La sensibilità del test PCR in seguito quantitativo è superiore rispetto al metodo qualitativo. La base è il conteggio del DNA rilevato, che è espresso in copie per millilitro o IU / ml.
Inoltre, la PCR quantitativa fornisce informazioni sugli effetti del trattamento e sulla correttezza della terapia scelta. A seconda della quantità di materiale genico virale, può essere presa una decisione per abbreviare il periodo di trattamento o, al contrario, per prolungarlo e rafforzarlo.
Esame del sangue biochimico per l'epatite B
Il metodo di analisi biochimica è necessario per ottenere un quadro clinico completo del decorso della malattia. Questo metodo diagnostico fornisce una comprensione del lavoro degli organi interni (fegato, reni, cistifellea, tiroide e altri). La decodifica dà una comprensione del tasso metabolico nel corpo, le possibili patologie del metabolismo. Indicatori dettagliati indicheranno una mancanza di vitamine, macronutrienti e minerali necessari per la salute e la vita umana.
Puoi fare un test per l'epatite in qualsiasi altro centro diagnostico (Invitro, Gemotest, ecc.). L'analisi del sangue biochimica per l'individuazione dell'epatite B include i seguenti componenti.
Analisi quantitativa dell'enzima ALT (AlAt)
Questo enzima si trova più spesso in concentrazioni elevate nell'epatite acuta e cronica. La sostanza è contenuta nelle cellule del fegato e con le lesioni degli organi attraverso il flusso sanguigno entra nei vasi sanguigni.
La quantità e la concentrazione nel sangue durante una malattia virale sono in continua evoluzione, quindi la ricerca viene condotta almeno una volta al trimestre. ALT riflette non solo l'attività del virus dell'epatite, ma anche il grado di compromissione da esso provocato nel fegato. Il livello di ALT aumenta con l'aumentare delle quantità di sostanze tossiche di origine epatica e in presenza del virus.
Analisi quantitativa dell'enzima AST
La proteina è un componente degli organi più importanti dell'uomo: fegato, tessuto nervoso, tessuto renale, scheletro e muscoli. L'enzima è coinvolto nella costruzione del muscolo più importante: il cuore. Un alto AST in un paziente con epatite B può segnalare la fibrosi epatica. Una situazione simile si verifica quando alcol, droghe o altri danni tossici alle cellule del fegato.
Gli indicatori di surriscaldamento sono un segno di danno epatico a livello cellulare. Quando si effettua una diagnosi, è necessario prendere in considerazione il rapporto tra AST e ALT (coefficiente di de Rytis). Un aumento simultaneo della concentrazione di entrambi gli enzimi è un segno di necrosi epatica.
bilirubina
La sostanza è formata nella milza e nel fegato a causa della scomposizione dell'emoglobina nei loro tessuti. Questo componente fa parte della bile. Esistono due frazioni proteiche: bilirubina diretta (legata) e bilirubina indiretta (libera). Con un aumento della bilirubina legata al sangue, ha senso sospettare epatite o altri danni al fegato. Questo è direttamente correlato alla citolisi delle cellule epatiche.
Se la quantità di bilirubina indiretta aumenta, allora molto probabilmente c'è una lesione del tessuto parenchimale o della sindrome di Gilbert. L'alto livello di bilirubina in base ai risultati dell'analisi può essere una conseguenza dell'ostruzione dei dotti biliari. Quando il livello di bilirubina è superiore a 30 micromoli per litro, il paziente mostra una tonalità itterica della pelle, l'urina diventa scura e il bianco degli occhi cambia colore.
albumina
La sintesi di questa proteina avviene nel fegato. Se la sua quantità è ridotta, ciò indica una diminuzione della sintesi degli enzimi nel corpo a causa della presenza di gravi lesioni delle cellule epatiche.
Proteine totali
Se la quantità di proteine totali diventa significativamente inferiore alla norma accettata, allora questo indica un rallentamento del funzionamento del fegato.
GGT (GGTP)
Un enzima utilizzato nel rilevamento di ittero ostruttivo e colecistite. Un aumento del livello di GGT è un segnale di danno epatico tossico. Può essere provocato dall'alcolismo cronico e dall'uso incontrollato di droghe. Le proteine sono particolarmente sensibili alle tossine e all'alcol, sotto la loro influenza la sua attività cresce rapidamente. Mantenere un'alta concentrazione di GGT nel sangue per un lungo periodo parla di gravi danni al fegato.
creatinina
È un prodotto del metabolismo delle proteine che si verifica nel fegato. Un forte calo nel livello è un segnale che l'organo sta rallentando
Frazioni proteiche
Una diminuzione del livello delle frazioni proteiche è un segno di patologia epatica.
L'analisi di decodifica per l'epatite B e i valori sono normali
La diagnosi dell'epatite B è uno studio cumulativo di indicatori. Solo la loro analisi completa consente di trarre conclusioni sull'infezione del paziente. Considerare l'analisi di decodificazione per l'epatite B. Per confronto, il tasso di sostanze nel sangue.
Analisi PCR per l'epatite B
Il virus del DNA della famiglia Hepadnaviridae è l'agente causale diretto dell'epatite B. L'analisi PCR dell'epatite B consente di rilevare la presenza di un virus del DNA infetto nel sangue di un paziente. Il risultato di un tipo positivo sul DNA dell'HBV dimostra la presenza di infezione nel sangue del paziente. Va notato che la diagnosi attraverso l'uso dell'analisi PCR consente non solo di determinare la presenza di infezione, ma anche il suo carico quantitativo e l'attività. Questo metodo è affidabile, accurato e riproducibile. Quantificazione del DNA dell'HBV con qPCR può essere utilizzato per monitorare l'efficacia della terapia HBV ed essere utile per comprendere la storia naturale dell'HBV in un'area endemica.
Il processo di infezione da epatite B avviene attraverso il contatto domestico o sessuale - attraverso il contatto diretto con sangue infetto. Dopo l'infezione, il virus entra nelle cellule del fegato, in cui continua la sua riproduzione attiva. Attraverso il flusso sanguigno, le cellule patogene si diffondono in tutto il corpo. Vale la pena notare che le cellule dell'epatite B sono altamente resistenti agli acidi e alle alte temperature. È in grado di mantenere le sue proprietà dannose per sei mesi.
Tipi di PCR per l'epatite B
Ad oggi esistono due tipi di diagnostica prescritti se si sospetta la presenza di virus dell'epatite B: PCR qualitativa (consente di determinare con accuratezza del 100% la presenza del virus nel sangue) e PCR quantitativa (consente di determinare il grado di attività del virus).
La PCR di alta qualità è prescritta se vi è il sospetto di infezione da HBV o se altri metodi diagnostici non hanno prodotto risultati chiari. Questo tipo di analisi PCR è estremamente facile da decifrare: negativo (nessun virus rilevato nel sangue), positivo (virus rilevato nel sangue). Il compito principale dell'analisi qualitativa è determinare la presenza di cellule infette nelle prime fasi della malattia. Se il virus è stato diagnosticato due settimane dopo la presunta infezione, l'efficacia del trattamento sarà molto più elevata. Se il virus nel sangue è di circa due mesi, la malattia diventa cronica, quindi, non può essere completamente guarita.
Se una diagnosi qualitativa conferma la presenza di HBV nel sangue, il medico prescrive un'analisi quantitativa.
L'analisi quantitativa consente di determinare l'attività dello sviluppo del virus nel corpo del paziente. Questo tipo di analisi PCR è assegnato a:
- determinare lo stadio della malattia;
- monitorare l'efficacia della terapia applicata;
- determinare il livello di resistenza del virus a un particolare farmaco;
- per la selezione di farmaci.
Gli indicatori quantitativi del virus nel sangue sono misurati in UI per millilitro o DNA per millilitro.
Se il medico prescrive immediatamente una diagnosi quantitativa, senza verificare il valore qualitativo, 75 UI per millilitro sono considerati la norma. Se vengono rilevate meno unità internazionali, il risultato è che l'HBV non viene rilevata quando le cifre sono sopra la norma, viene diagnosticata la presenza di epatite B virale.
Interpretazione della diagnosi quantitativa
I seguenti indicatori (in copie / millilitro) sono considerati la norma della CRP nell'epatite B: meno di 10 3 - virus inattivo; da 10 4 a 10 5 - il virus è solitamente inattivo; 10 6 - virus attivo; 10 7 - un virus in uno stadio di attività elevato.
Sulla base di indicatori quantitativi è possibile determinare con accuratezza del 100% la forma della malattia (portatrice, acuta o cronica), la reazione del virus al trattamento, la necessità di ulteriori strumenti diagnostici.
La forma cronica dell'epatite B viene stabilita se l'attività del virus è di 10 5 copie per millilitro. Viene diagnosticato un portatore se i punteggi sono inferiori a 10 5 copie per millilitro.
Durante il periodo di trattamento, è necessario ripetere periodicamente (una volta ogni tre mesi) la diagnostica quantitativa per considerare nel tempo il periodo in cui il virus sviluppa l'immunità ai farmaci utilizzati e cambiare il metodo. Se tutti gli studi sono stati eseguiti correttamente ed è stato selezionato un trattamento efficace, un'analisi ripetuta (dopo tre giorni di trattamento) mostrerà una diminuzione dell'attività delle cellule patogene di almeno l'85%.
Una biopsia epatica viene eseguita solo nel caso in cui sei mesi di trattamento hanno dimostrato che i livelli di ALT sono due volte più alti del normale e la diagnostica della PCR mostra percentuali inferiori a 10 5 copie per millilitro di sangue.
Preparazione per il sondaggio
Il sangue venoso è richiesto per l'analisi. Per ottenere i risultati più precisi, è necessario preparare la procedura: rifiutare di assumere cibo almeno otto ore prima della raccolta del sangue; per due giorni per rifiutare il trattamento farmacologico (è imperativo avvertire il medico di assumere i farmaci); devi passare venti minuti in modalità riposo prima di donare il sangue; Dodici ore prima della procedura, abbandonare gli esercizi sportivi, bere alcolici, fumare e mangiare cibi grassi.
È importante: se la diagnosi è necessaria per un bambino di età inferiore ai cinque mesi, allora deve dare un bicchiere di acqua bollita ogni dieci minuti sessanta minuti prima della procedura di prelievo del sangue.
Riassumendo
L'analisi PCR per l'epatite B oggi è il metodo più accurato per diagnosticare un virus. Il metodo consente di determinare le forme mutate e nascoste della malattia, di diagnosticare la malattia nei primi giorni di infezione, quindi, di scegliere il trattamento più efficace. L'assistente di laboratorio compara i risultati dell'analisi con la norma, per poi portarli alla conclusione. I dati vengono elaborati entro due settimane. Per ottenere un referral per l'analisi della PCR, è necessario contattare un epatologo, uno specialista in malattie infettive o un virologo. È importante ricordare che prima si arriva dal medico, più velocemente i risultati saranno ottenuti, quindi, più efficace sarà il trattamento.
L'essenza dell'analisi della PCR per l'epatite B e i suoi risultati
L'epatite B virale viene trattata con successo se viene rilevata nel tempo e il numero di anticorpi e antigeni nel sangue del paziente è correttamente determinato. Con l'aiuto di un saggio immunoenzimatico per l'epatite, è possibile rilevare la presenza di marcatori virali, ma non è possibile determinare lo stadio esatto del processo.
Per la valutazione quantitativa è stata utilizzata la diagnostica PCR. Utilizzando il test, è possibile contare il numero di marker, prevedere il decorso della malattia e la probabilità di cura con l'aiuto di farmaci antivirali.
Il vantaggio principale dello studio è la capacità di rilevare anche concentrazioni minime del virus, per identificare l'agente patogeno nella fase di specie.
Diagnosi di epatite B
Il virus dell'epatite B è altamente contagioso e resistente alle influenze esterne. Rimane attivo nel sangue di un paziente per diverse settimane. Pertanto, ogni persona è a rischio di infezione, anche se si osserva la profilassi.
Per diagnosticare la malattia si prescrivono i seguenti studi:
L'essenza del metodo PCR
Il chimico americano K. Mullis ha ricevuto il premio Nobel e il suo metodo diagnostico è ancora usato.
L'antenato del metodo PCR (reazione a catena della polimerasi) è considerato uno scienziato norvegese H. Kleppe. Inizialmente ha iniziato a eseguire l'amplificazione (recupero) del DNA usando una catena corta di DNA, cioè un primer sintetico (una sorta di copia).
Tuttavia, lo scienziato non è riuscito a realizzare la sua idea. Studi simili sono stati fatti dal chimico americano K.Mullis, che nel 1993 ha ricevuto il premio Nobel per la sua invenzione. Da allora, la PCR è stata utilizzata per stabilire la paternità, diagnosticare malattie genetiche e rilevare i virus.
L'essenza della reazione è che con l'aiuto degli enzimi viene copiato un certo pezzo di DNA. È possibile copiare solo l'area che corrisponde ai parametri specificati e se si trova nel campione presentato. I seguenti componenti sono utilizzati per iniziare la reazione:
- DNA matrice con un sito da copiare.
- Primer simili nella struttura del DNA.
- Polimerasi, cioè l'enzima che innesca la reazione. Dovrebbe essere termostabile, cioè per resistere a temperature estreme.
- Soluzione con determinati parametri, garantendo il passaggio della reazione.
La reazione viene eseguita in più fasi:
Per la rilevazione dell'epatite B vengono utilizzati due tipi di reazioni: quantitativa e qualitativa.
PCR quantitativa
Il metodo quantitativo determina la quantità del genoma dell'HBV
La PCR quantitativa comporta la creazione simultanea di copie di frammenti di DNA e la determinazione del numero di molecole. La misurazione viene eseguita dopo ogni fase, cioè in tempo reale. Questo risultato è ottenuto utilizzando sonde fluorescenti, che sono incluse in una catena di molecole e si illuminano in un certo periodo dello studio.
Questo metodo viene utilizzato per rilevare i frammenti di DNA che sono marcatori del virus dell'epatite. Utilizzando il metodo quantitativo, è possibile isolare con precisione il genotipo del virus. In altre parole, viene calcolato il numero di copie del genoma dell'HBV per numero di cellule del paziente.
L'analisi quantitativa fornisce risposte alle seguenti domande:
- Con quale intensità progredisce la malattia.
- Quanto è efficace il trattamento.
- Si è sviluppata la resistenza ai farmaci?
Inoltre, la misurazione quantitativa è necessaria per la diagnosi della fase cronica dell'infezione. Se la quantità di DNA è inferiore a 100 pz / ml al livello normale di transaminasi, la persona è portatrice del virus.
Nella fase acuta, la quantità di anticorpi è molto più alta.Nella terapia antivirale, un aumento del numero di anticorpi indica lo sviluppo della resistenza ai farmaci, che è un segnale per regolare il trattamento.
PCR di alta qualità
La PCR di alta qualità fornisce meno informazioni, ma può eliminare l'infezione.
La PCR di alta qualità può solo stabilire la presenza del patogeno nel sangue. Se sono assenti, il paziente non è infetto, se l'agente patogeno entra nel sangue, il risultato sarà positivo.
Tuttavia, con l'aiuto della reazione qualitativa è impossibile chiarire il genoma del virus, lo stadio della malattia. Pertanto, per la diagnosi dell'HBV sono state eseguite misure sia quantitative che qualitative.
Preparazione per il sondaggio
Il sangue venoso è richiesto per l'analisi PCR. Questo deve essere fatto al mattino a stomaco vuoto.
Il paziente deve prepararsi adeguatamente allo studio:
- Per 10 ore per rifiutare il cibo, puoi bere solo acqua pulita.
- Alla vigilia di smettere di prendere alcolici, per 4 ore non fumare.
- Prima dell'esame dovrebbe evitare lo stress fisico ed emotivo.
- Interrompere l'uso di farmaci per 2 giorni, se ciò non è possibile, è necessario informare il tecnico di laboratorio. Alcuni farmaci hanno un effetto sul risultato finale.
Interpretazione dei dati
In una reazione quantitativa, gli indicatori ottenuti vengono valutati in base al numero di copie del DNA.
È facile interpretare i dati di misurazione della qualità. Dà una risposta positiva o negativa.
In una reazione quantitativa, è possibile valutare gli indicatori ottenuti in base al numero di copie del DNA. L'unità di misura è copie / ml.
I dati sono decodificati come segue:
- Se la quantità di DNA dell'HBV è inferiore a 90, l'infezione è assente. Il paziente ha sviluppato l'immunità post-vaccinazione, oppure è stato curato dalla malattia.
- Quando il numero di copie 2x100 parla del vettore del virus.
- Il numero 2x106 indica uno stadio cronico della malattia.
- Con il DNA più di 2x109, il paziente ha uno stadio acuto di epatite.
Risultati errati
I vantaggi del metodo diagnostico usando le reazioni della polimerasi sono i seguenti:
- Rilevazione diretta di agenti patogeni. Al contrario, l'ELISA fornisce informazioni sulla presenza di anticorpi al virus.
- Specificità. Cioè, è la regione del DNA che è presente nel campione di biomateriale che viene copiato.
- Ipersensibilità. Il metodo può anche rilevare frammenti di singole cellule.
- Diagnosi di malattie negli stadi acuti e latenti. Cioè, è possibile diagnosticare la malattia allo stadio delle manifestazioni precliniche.
Il metodo ha difetti che portano a risultati falsi. Lo svantaggio più significativo è la probabilità di contaminazione del materiale. La principale fonte di contaminazione è rappresentata da provette, mani di laboratorio, reagenti scarsamente trasformati.
Parte del DNA di una precedente reazione può entrare nel sangue. Pertanto, i laboratori hanno bisogno di maggiori requisiti sanitari: stanze separate, tubi di plastica, trattamento ultravioletto dei laboratori, ecc.
Risultati falsi negativi possono essere dovuti alla ridotta sensibilità della reazione. Questo succede nelle seguenti situazioni:
- il paziente sta assumendo farmaci, ad esempio, anticoagulanti;
- la persona ha sofferto di stress fisico prima dell'analisi (fare sport, lavorare sodo);
- l'infezione si è verificata di recente.
Se il paziente ha un'alta probabilità di infezione e il risultato dello studio è negativo, deve essere riesaminato.
Vedi anche:
conclusione
Il metodo di reazione a catena della polimerasi è il principale e più informativo per la diagnosi dell'HBV. Permette non solo di stabilire lo stato portatore dell'infezione, ma anche di chiarire lo stadio della malattia, per valutare i risultati del trattamento.
Per una diagnosi più accurata, viene utilizzata una misurazione qualitativa e quantitativa. Gli svantaggi del metodo includono la probabilità di contaminazione, la sensibilità ridotta e un prezzo piuttosto elevato.
Affinché i risultati siano più affidabili, è necessario prepararsi adeguatamente allo studio e condurlo in clinica con la licenza appropriata e la buona reputazione.
Studi sul virus dell'epatite B (ELISA e PCR)
Antigene del virus dell'epatite B (HBsAg)
L'antigene di superficie dell'epatite B nel siero è normalmente assente.
La rilevazione dell'antigene di superficie dell'epatite B (HBsAg) nel siero conferma l'infezione acuta o cronica con il virus dell'epatite B.
In caso di malattia acuta, HBsAg viene rilevato nel siero nelle ultime 1-2 settimane del periodo di incubazione e nelle prime 2-3 settimane del periodo clinico. La circolazione di HBsAg nel sangue può essere limitata a pochi giorni, quindi è necessario sforzarsi per un primo esame iniziale dei pazienti. Il metodo ELISA consente di rilevare HBsAg in oltre il 90% dei pazienti. Quasi nel 5% dei pazienti, i metodi di ricerca più sensibili non rilevano HBsAg, in questi casi l'eziologia dell'epatite B virale è confermata dalla presenza di JgM anti-HBcAg o PCR.
La concentrazione sierica di HBsAg in tutte le forme di gravità dell'epatite B all'altezza della malattia ha una gamma significativa di fluttuazioni, tuttavia, vi è un certo pattern: nel periodo acuto c'è una relazione inversa tra la concentrazione sierica di HBsAg e la gravità della malattia.
Alte concentrazioni di HBsAg sono più comuni nelle forme lievi e moderate della malattia. Nelle forme gravi e maligne, la concentrazione di HBsAg nel sangue è spesso bassa e nel 20% dei pazienti con forma grave e nel 30% con un antigene maligno nel sangue potrebbe non essere rilevata affatto. L'aspetto di questo background in pazienti con anticorpi anti-HBsAg è considerato un segno diagnostico sfavorevole; è determinato in forme maligne di epatite B.
Nel decorso acuto dell'epatite B, la concentrazione di HBsAg nel sangue diminuisce gradualmente fino alla completa scomparsa di questo antigene. L'HBsAg scompare nella maggior parte dei pazienti entro 3 mesi dall'insorgenza di un'infezione acuta.
Una diminuzione della concentrazione di HBsAg di oltre il 50% entro la fine della 3a settimana del periodo acuto, di regola, indica un completamento vicino del processo di infezione. Di solito nei pazienti con un'alta concentrazione di HBsAg all'altezza della malattia, viene rilevato nel sangue per diversi mesi.
Nei pazienti con basse concentrazioni di HBsAg scompare molto prima (a volte diversi giorni dopo l'inizio della malattia). In generale, il tempo di rilevamento dell'HBsAg varia da diversi giorni a 4-5 mesi. Il periodo massimo di rilevazione dell'HBsAg con un ciclo regolare di epatite B acuta non supera i 6 mesi dall'insorgenza della malattia.
L'HBsAg può essere trovato in persone sane, di regola, in studi profilattici o accidentali. In tali casi, vengono esaminati altri marker di epatite virale B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg e viene studiata la funzione epatica.
In caso di risultati negativi, sono necessari studi ripetuti su HBsAg.
Se ripetuti esami del sangue per più di 3 mesi rivelano HBsAg, questo paziente è classificato come un paziente cronico con epatite B.
La presenza di HBsAg è abbastanza comune. Ci sono oltre 300 milioni di vettori nel mondo e nel nostro paese ci sono circa 10 milioni di vettori.
La cessazione della circolazione di HBsAg con successiva sieroconversione (formazione di anti-HBs) indica sempre il recupero - l'igiene del corpo.
Un esame del sangue per la presenza di HBsAg viene utilizzato per i seguenti scopi:
- periodo di incubazione;
- malattia acuta;
- recupero precoce;
- epatite cronica persistente;
- cirrosi epatica;
per lo screening e l'identificazione di pazienti in gruppi a rischio:
Valutazione dei risultati della ricerca
I risultati dello studio sono espressi qualitativamente - positivi o negativi. Un risultato negativo indica l'assenza di HBsAg sierico. Un risultato positivo: l'identificazione di HBsAg indica un'incubazione o un periodo acuto di epatite virale acuta B, nonché nell'epatite virale cronica B.
Anticorpi contro l'antigene nucleare del virus dell'epatite B JgG (anti-HBcAg JgG)
Normalmente, il siero anti-HBcAg è assente nel siero.
Nei pazienti con anti-HBcAg JgG compaiono nel periodo acuto dell'epatite B virale e persistono per tutta la vita. Anti-HBcAg JgG è il marker principale dell'HBV trasferito.
Gli esami del sangue per anti-HBcAg JgG sono usati per diagnosticare:
Valutazione dei risultati della ricerca
Il risultato dello studio è espresso qualitativamente - positivo o negativo. Un risultato negativo indica l'assenza di siero anti-HBcAg JgG. Un risultato positivo: l'identificazione di anti-HBcAg JgG indica un'infezione acuta, convalescenza o epatite virale precedentemente trasferita.
Antigene "e" del virus dell'epatite B (HBeAg)
Normalmente, l'HBeAg nel siero è assente.
L'HBeAg può essere trovato nel siero della maggior parte dei pazienti con epatite virale acuta B. Di solito scompare nel sangue prima dell'antigene HBs. Un alto livello di HBeAg nelle prime settimane della malattia o il suo rilevamento per più di 8 settimane dà motivo di sospettare un'infezione cronica.
Questo antigene è spesso rilevato nell'epatite cronica attiva di eziologia virale. Di particolare interesse per la definizione di HBeAg è il fatto che il suo rilevamento caratterizza la fase replicativa attiva del processo infettivo. È stato stabilito che alte concentrazioni di HBeAg corrispondono ad un'alta attività della DNA polimerasi e caratterizzano la replicazione attiva del virus.
La presenza di HBeAg nel sangue indica la sua alta infettività, vale a dire la presenza di infezione da epatite B attiva nel corpo in esame e viene rilevata solo in presenza dell'antigene HBs nel sangue. Nei pazienti con epatite cronica attiva, i farmaci antivirali vengono utilizzati solo quando l'HBeAg viene rilevato nel sangue. HBeAg - antigene - un marcatore della fase acuta e replicazione del virus dell'epatite B.
Un test del sangue per la presenza dell'antigene HBe viene utilizzato per diagnosticare:
Valutazione dei risultati della ricerca
Il risultato dello studio è espresso qualitativamente - positivo o negativo. Un risultato negativo indica l'assenza di siero HBeAg. Un risultato positivo: il rilevamento di HBeAg indica un'incubazione o un periodo acuto di epatite virale acuta B o la continua replicazione del virus e l'infettività del paziente.
Anticorpi anti-antigene "e" del virus dell'epatite B (anti-HBeAg)
L'anti-HBeAg nel siero è normalmente assente. La comparsa di anticorpi anti-HBeAg di solito indica una rimozione intensiva dal corpo del virus dell'epatite B e un'infezione minore del paziente.
Questi anticorpi compaiono nel periodo acuto e persistono fino a 5 anni dopo l'infezione. Nell'epatite cronica persistente, l'anti-HBeAg si trova nel sangue del paziente insieme all'HBsAg. Seroconversione, cioè la transizione da HBeAg a anti-HBeAg, con epatite cronica attiva, più spesso prognosticamente favorevole, ma la stessa sieroconversione non migliora la prognosi della grave trasformazione epatica cirrotica.
Gli esami del sangue per la presenza di anti-HBeAg sono utilizzati nei seguenti casi nella diagnosi di epatite B virale:
Valutazione dei risultati della ricerca
Il risultato dello studio è espresso qualitativamente - positivo o negativo. Un risultato negativo indica l'assenza di anticorpi contro l'HBeAg nel siero. Un risultato positivo è la rilevazione di anticorpi contro l'HBeAg, che può indicare lo stadio iniziale dell'epatite virale acuta B, il periodo acuto dell'infezione, lo stadio iniziale della convalescenza, la convalescenza, l'epatite virale B persistente recentemente trasferita o l'epatite virale B.
I criteri per la presenza di epatite B cronica sono:
Rilevazione del virus dell'epatite B mediante PCR (qualitativamente)
Il virus dell'epatite B nel sangue è normalmente assente.
La determinazione qualitativa del virus dell'epatite B mediante il metodo PCR nel sangue consente di confermare la presenza del virus nel corpo del paziente e stabilisce quindi l'eziologia della malattia.
Questo studio fornisce informazioni utili per la diagnosi dell'epatite virale acuta B nell'incubazione e nelle fasi iniziali di sviluppo della malattia, quando i principali marcatori sierologici del sangue nel paziente possono essere assenti. Il DNA virale sierico è rilevato nel 50% dei pazienti in assenza di HBeAg. La sensibilità analitica del metodo PCR non è inferiore a 80 particelle virali in 5 μl, l'ultimo campione di rilevazione del DNA, specificità - 98%.
Questo metodo è importante per la diagnosi e il monitoraggio del decorso dell'HBV cronica. Circa il 5-10% dei casi di cirrosi e altre malattie croniche del fegato sono causati da portatore cronico del virus dell'epatite B. I marker dell'attività di tali malattie sono la presenza di HBeAg e DNA del virus dell'epatite B nel sangue.
Il metodo PCR consente di determinare nel sangue il DNA del virus dell'epatite B sia qualitativamente che quantitativamente. Il frammento determinato in entrambi i casi è l'unica sequenza di DNA del gene della proteina strutturale del virus dell'epatite B.
Il rilevamento del DNA del virus dell'epatite B nel biomateriale mediante PCR è necessario per:
La scomparsa del DNA dell'epatite B dal sangue è un segno dell'efficacia della terapia
Rilevazione del virus dell'epatite B mediante PCR (quantitativa)
Questo metodo fornisce informazioni importanti sull'intensità dello sviluppo della malattia, l'efficacia del trattamento e lo sviluppo della resistenza ai farmaci attivi.
Per la diagnosi di epatite virale mediante PCR nel siero, vengono utilizzati sistemi di test, la cui sensibilità è di 50-100 copie in un campione, che consente di rilevare il virus a una concentrazione di 5 X 10 ^ 3 -10 ^ 4 copie / ml. La PCR nell'epatite virale B è certamente necessaria per giudicare la replicazione virale.
Il DNA virale sierico è rilevato nel 50% dei pazienti in assenza di HBeAg. Il siero di sangue, i linfociti e l'epatobiopsia possono servire come materiale per la rilevazione del DNA del virus dell'epatite B.
- La valutazione del livello di viremia è la seguente:
- meno di 2,10 ^ 5 copie / ml (meno di 2,10 ^ 5 UI / ml) - bassa viremia;
- da 2,10 ^ 5 copie / ml (2,10 ^ 5 UI / ml) a 2,10 ^ 6 copie / ml (8,10 ^ 5 UI / ml) - viremia media;
- più di 2,10 ^ 6 copie / ml - alta viremia.
Esiste una relazione tra l'esito dell'epatite virale acuta B e la concentrazione di DNA dell'HBV nel sangue di un paziente. Con un basso livello di viremia, il processo di cronizzazione dell'infezione è vicino allo zero, con una media, il processo è cronologico nel 25-30% dei pazienti, e con un alto livello di viremia, l'epatite virale acuta B più spesso diventa cronica.
Le indicazioni per il trattamento dell'interferone-alfa HBV cronico devono essere considerate la presenza di marcatori di replicazione virale attiva (rilevamento di HBV HBV, HBeAg e HBV DNA nel siero del sangue durante i precedenti 6 mesi).
I criteri per valutare l'efficacia del trattamento sono la scomparsa del DNA dell'HBEAg e dell'HBV nel sangue, che di solito si accompagna alla normalizzazione dei livelli delle transaminasi e alla remissione a lungo termine della malattia, l'HBV DNA scompare dal sangue entro il 5 ° mese di trattamento nell'80% dei pazienti. Ridurre il livello di viremia dell'85% o più entro il terzo giorno dall'inizio del trattamento rispetto al basale è un criterio rapido e abbastanza accurato per predire l'efficacia della terapia.