Con l'introduzione delle moderne tecnologie in medicina, le possibilità dei metodi diagnostici immunochimici, che sono in grado di riconoscere rapidamente e accuratamente la malattia, quando altri metodi sono impotenti, stanno crescendo. Capire che il virus dell'epatite B è capace di essere nel corpo in una concentrazione molto bassa, alla quale non può essere rilevato nemmeno con un metodo così affidabile come la PCR, rende necessario dare una nuova occhiata al problema di diagnosticare questa malattia e apprezzare le possibilità di un immunodosaggio.
In questo materiale analizzeremo in dettaglio tutto ciò che riguarda questo tipo di ricerca di laboratorio. Imparerai cos'è un saggio immunoenzimatico e come viene eseguito, quale sia l'antigene australiano e come viene determinato, quali sono le incomprensibili abbreviazioni Hbs, Hbcor e il loro ruolo nel decifrare l'analisi, e anche ottenere molte informazioni utili e interessanti.
Contenuto dell'articolo:
Informazioni generali su ELISA
ELISA (ELISA abbreviato) è un metodo diagnostico di laboratorio in grado di rilevare sia gli antigeni che gli anticorpi da un'ampia varietà di infezioni, compresa l'epatite B. La conoscenza attuale delle proprietà del virus e le caratteristiche della risposta immunitaria dell'organismo, consente non solo di individuare l'infezione, ma anche di identificarla stadio, l'efficacia della vaccinazione e valutare l'efficacia del trattamento.
L'essenza del saggio immunoenzimatico
L'ELISA si basa sulla reazione "antigene-anticorpo", o meglio sulle sue proprietà.
In risposta all'invasione di una sostanza estranea (antigene), che in particolare sono le proteine del virus, l'organismo produce proteine protettive - anticorpi. Gli anticorpi entrano in una reazione complessa con l'antigene, bloccando la sua attività.
Parleremo ancora di antigeni e anticorpi di seguito, ma ora noteremo che per ogni antigene ci sono strettamente singoli, o come dicono i medici, anticorpi omologhi. Quindi, se vogliamo rilevare un antigene specifico nel sangue, useremo una compressa diagnostica con anticorpi ad esso. Se c'è un antigene nel sangue, reagirà con gli anticorpi, che possono essere rilevati in vari modi. E viceversa. Se vogliamo trovare anticorpi, allora abbiamo bisogno di una compressa con l'antigene appropriato.
Molto spesso, il valore diagnostico di portare solo gli anticorpi con cui è possibile diagnosticare quasi ogni infezione. Tuttavia, la particolarità del virus dell'epatite B è che il ruolo principale nella diagnosi è svolto da uno degli antigeni - l'antigene australiano.
Come è l'IFA
Considerare una procedura ELISA tipica per un esempio specifico quando si desidera identificare gli anticorpi contro il patogeno.
Per la diagnostica, viene utilizzata una compressa con 96 pozzetti, che sono pre-saturati con l'antigene corrispondente. Inoltre, la procedura è la seguente:
il siero è applicato a tutte le cellule;
gli anticorpi omologhi reagiscono con l'antigene e si attaccano alla piastra;
compressa lavata, rimozione di anticorpi non attaccati;
quindi un'etichetta enzimatica viene introdotta nelle cellule - una sostanza che reagisce con gli anticorpi e provoca la colorazione del contenuto della cellula.
Questa è la procedura standard ELISA con colorazione, che viene utilizzata, ad esempio, nelle strisce reattive immunocromatografiche.
ELISA non è limitato alla determinazione qualitativa di anticorpi o antigeni del patogeno. Più anticorpi sono contenuti nelle cellule della compressa, più intensa è la soluzione colorata. Confrontando la sua densità ottica con il controllo, le moderne attrezzature possono calcolare con precisione la concentrazione di anticorpi per unità di volume. Pertanto, viene eseguito un ELISA quantitativo, la misura della misurazione alla quale più spesso si trovano le unità di densità ottica (EOP).
Analisi immunochemiluminescente
Oggi ci sono diverse decine di tipi di ELISA, ognuno dei quali ha uno scopo preferito. Il più popolare nella diagnosi di epatite B è l'analisi immunochemiluminescent.
L'etichetta enzimatica per questa analisi non sono le cromatine, come nello standard ELISA, ma sostanze speciali - i fosfori che fanno sì che il complesso si illumini alla luce ultravioletta.
Con l'aiuto di un dispositivo speciale, il luminometro, è possibile determinare con precisione il livello di emissione e, di conseguenza, la concentrazione della sostanza desiderata.
L'uso dei metodi ELISA determina quasi tutti gli antigeni esistenti del virus dell'epatite B e gli anticorpi a essi.
Antigeni del virus dell'epatite B: Hbs, Hbe e Hbc
Il termine antigene (antigene) deriva da due parole inglesi: anticorpo - anticorpo e generatore - produttore. Quindi, sotto l'antigene capisci qualsiasi sostanza che causa la formazione di anticorpi nel corpo ad esso. Gli antigeni più comuni sono composti proteici.
Oggi sono noti tre antigeni del virus dell'epatite B: hbsag, hbc e hbe.
Antigene australiano
La proteina che fa parte del guscio esterno dell'epatite B patogeno è stata rilevata molto prima della scoperta del virus stesso. Questo antigene ha preso il nome perché è stato identificato per la prima volta dagli abitanti nativi dell'Australia. Tuttavia, all'inizio, la proteina non era considerata un antigene, ma un elemento del sangue completamente normale tra i nativi, e la consapevolezza della sua connessione con le malattie del fegato arrivò poco dopo.
La conservazione a lungo termine dell'antigene nel sangue e l'assenza di anticorpi indica la possibilità di formazione dell'epatite B cronica HBeAg-positiva
Oggi nella letteratura professionale il nome "antigene australiano" non viene praticamente trovato ed è stato soppiantato dall'abbreviazione internazionale - HbsAg (antigene di superficie dell'epatite B dell'antigene di superficie dell'epatite B). Inoltre, puoi trovare abbreviazioni hbs antigen o solo hbs. Ognuna di queste abbreviazioni è accettabile e può essere integrata registrando HBV o HBV - il virus dell'epatite B (virus dell'epatite B).
L'antigene di superficie del virus dell'epatite B ha una caratteristica notevole che lo rende un marker diagnostico indispensabile: la sua concentrazione nel sangue può raggiungere livelli molto elevati, fino a mezzo milligrammo per millilitro di sangue. Questo perché solo una piccola parte del nuovo HBsAg, che si forma durante la riproduzione del virus dell'epatite B, va alla costruzione delle membrane di nuove particelle virali, e il resto - circola liberamente nel sangue. Di conseguenza, il numero di particelle di hbs nel sangue può superare il numero di virioni centinaia di migliaia di volte.
Questa caratteristica rende l'antigene australiano il principale marker nella diagnosi di screening dell'epatite B, che si trova nel sangue già 4-6 settimane dopo l'infezione. Quando gli anticorpi si formano, l'antigene di superficie viene gradualmente sostituito da loro. Se dopo 6 mesi l'HBsAg persiste, questo indica la transizione dell'infezione alla forma cronica.
Recentemente, quando è stato possibile determinare la concentrazione di hbs hbv, il suo ruolo nella diagnosi è cresciuto ancora di più, poiché basarsi sul livello di antigene può distinguere l'epatite B cronica (HBV) da uno stato portatore sano, oltre a monitorare l'efficacia del trattamento.
Antigeni core
Nel nucleo del virus - nucleocapside - sono le proteine che controllano la riproduzione del virus HBcoreAg e HBeAg.
L'HBcoreAg, che può anche essere chiamato antigene HBCore, hbc o antigene nucleo, può essere trovato solo nei tessuti del fegato, direttamente nei nuclei degli epatociti. Questo antigene non è rilevato nel sangue e non ha valore diagnostico.
La struttura del virus dell'epatite
HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - al contrario, svolge un ruolo importante nella diagnosi. HBeAg e HBcoreAg sono parenti stretti. Hanno una grande somiglianza della struttura e si differenziano principalmente nella posizione spaziale delle molecole. A differenza dell'HBcore, l'HBe non fa parte della parete del nucleocapside e circola liberamente nel sangue.
Il ruolo di HBe nel processo infettivo non è sufficientemente chiaro, tuttavia, le peculiarità del suo comportamento e la loro relazione con il corso del processo infettivo sono già state sufficientemente studiate. HBeAg indica la riproduzione attiva del virus e consente di determinare in modo affidabile la fase di CHB cronico - HBeAg-positivo o HBeAg-negativo.
L'HBe può essere rilevata nel sangue già nel periodo di incubazione del virus acuto dell'epatite B (HBV), mentre un'alta concentrazione di HBeAg per 3 settimane molto probabilmente indica una minaccia di processo cronico. La concentrazione di HBe è direttamente correlata al contenuto di particelle di Dane (le cosiddette particelle di virus dell'epatite B) - maggiore è la quantità di HBe, maggiore è la concentrazione di DNA di HBV nel sangue.
L'HBeAg è un importante marker di infettività della malattia. Il sangue dei pazienti HBeAg-positivi è molto più contagioso di HBeAg-negativo. Ad esempio, nelle donne in gravidanza positive per HBe e Hbs, la probabilità di trasmettere infezioni al bambino raggiunge il 50%, mentre la probabilità di un tale evento in HBe-negativo, ma Hbs di madri positive è del 10-30%.
Hbe determina il decorso dell'epatite cronica. L'epatite B cronica HBeAg-positiva ha una prognosi molto più sfavorevole in termini di sviluppo della cirrosi.
Probabilmente è tutto ciò che devi sapere sugli antigeni dell'HBV e passiamo al secondo gruppo di marcatori dell'epatite B: gli anticorpi.
Essenza e diagnosi di epatite B
Non appena la fase si trasforma in ittero, i tegumenti e le mucose iniziano a ingiallire, lo stato di salute si deteriora bruscamente. È importante sottolineare che il fegato cresce di dimensioni e sporge da sotto l'arco costale. La colorazione della pelle in una sfumatura gialla avviene gradualmente. La quantità di enzimi epatici sta crescendo nel sangue e il campione di timolo non cambia.
Diagnosi della malattia: metodi e concetti di base
La diagnosi di epatite B viene eseguita in diversi modi:
1. Per cominciare, il dottore deve prendere l'anamnesi e condurre un'indagine approfondita della persona. Durante il sondaggio, grande enfasi viene posta su momenti come:
- se l'introduzione di droghe o altri mezzi per via endovenosa;
- se ci fossero trasfusioni di sangue;
- se sono stati eseguiti interventi chirurgici;
- se fosse presente un danno all'integrità della pelle;
- quali sono le relazioni sessuali;
- se il paziente ha avuto un contatto con il paziente con epatite B o il suo vettore.
Se si verifica uno di questi elementi, viene specificato per quanto tempo. In genere, l'infezione si verifica quando si contatta da 6 settimane a sei mesi prima che si verifichino i primi sintomi di epatite.
2. Diagnosi di laboratorio dell'epatite B, analisi ELISA del sangue per antigeni e anticorpi contro l'epatite B. Questo tipo di esame ha lo scopo di identificare 3 antigeni:
- HBsAg (antigene, localizzato superficialmente),
- HBcAg (situato all'interno)
- HBeAg (interconnesso con l'antigene precedente). La malattia è caratterizzata dalla diagnosi precoce di questi antigeni nel sangue.
Le persone che soffrono di epatite B e contengono questi antigeni nel sangue sono molto contagiose. Sono in grado di contagiare altre persone. Se l'HBsAg è assente nel sangue umano, ciò indica che è sano. Se una persona è malata, il corpo inizia a secernere anticorpi contro antigeni esistenti.
3. Diagnosi dell'epatite B utilizzando una tecnica di PCR progettata per rilevare l'HBV DNA nel sistema circolatorio. Se il risultato è positivo, allora la persona ha l'epatite. L'analisi per il DNA dell'HBV si chiama qualitativa. Esiste anche una PCR quantitativa. La PCR quantitativa offre l'opportunità di identificare il carico con la presenza del virus dell'epatite. Cos'è la carica virale? Questo è il numero di copie del DNA dell'HBV in 1 ml di sangue. L'analisi quantitativa dell'epatite mostra l'attività del virus.
4. Analisi del sangue per biochimica. Questa analisi comporta la determinazione del numero di enzimi prodotti dal fegato. Tali enzimi includono ALT, AST. Si trovano all'interno delle cellule del fegato - epatociti. Se le cellule del fegato sono danneggiate, gli enzimi vengono rilasciati e entrano nel sangue. Un'analisi positiva è considerata solo quando il numero di enzimi epatici supera la norma. Il sondaggio indica se ci sono processi infiammatori nel fegato e la loro attività.
5. Esame ecografico, elastometria, ecc. La diagnosi di epatite può essere effettuata e metodi non di laboratorio. L'uso dell'ecografia esamina gli organi addominali. Gli ultrasuoni danno un quadro chiaro in ogni processo infiammatorio del fegato e dei suoi vasi. Conduzione efficace dell'elastomero del fegato. Il metodo elastometrico dà un'idea del grado di fibrosi nel tessuto epatico.
6. L'analisi più importante è la presenza di antigeni dell'epatite B nella massa dei globuli rossi.Se esistono, questo indica la presenza di infezione nel corpo umano.
7. Il tipo di laboratorio di diagnosi di epatite comprende la determinazione di antigeni e anticorpi nella massa di eritrociti. L'HBsAg più comune si manifesta nel sistema circolatorio anche nel periodo di incubazione dell'epatite. Una persona non sa dello sviluppo della sua malattia e nel sangue i cambiamenti sono già in corso. Quando l'epatite è acuta, l'HBsAg scompare dal sangue. Di solito l'HBsAg non è presente durante il primo mese del periodo itterico e gli anticorpi verso questo antigene cominciano a figurare nel sistema circolatorio 90 giorni dopo l'infezione.
Un test anticorpale positivo non significa che una persona abbia l'epatite. È possibile che abbia precedentemente sofferto di epatite senza un D-agente. Se non vi è HBsAg nel sangue del paziente dopo il trattamento, ma ci sono anticorpi, ciò indica una buona prognosi che indica che il paziente si sta riprendendo. Se un paziente ha un'epatite cronica o grave, allora gli anticorpi possono comparire già dai primi giorni del periodo itterico.
L'equivalente affidabile è l'IgM anti-HBc nel sangue. Sono rivelati alla fine del periodo preicterico. Sono presenti l'intero periodo di manifestazioni ovvie. Se l'analisi contiene IgM anti-HBc, significa che il virus continua a moltiplicarsi. All'inizio del recupero, l'IgM anti-HBc scompare. La fase acuta della malattia può produrre un dosaggio IgG anti-HBc. Saranno rilevati durante la vita di una persona.
Quando il periodo di incubazione dell'epatite (specialmente autoimmune) è completato, l'HBeAg inizia a comparire nel sangue. Informano sulla divisione attiva e sull'aumento delle particelle infettive. Non appena inizia il periodo itterico, NVAAg scompare. È sostituito da anti-HBe. Anti-HBe indica che l'attività dell'infezione si riduce e presto verrà il recupero. Ma la riproduzione del virus non si ferma!
L'epatite acuta può trasformarsi in cronica. Su questo parlerà identificato nel sangue HВеАg. Se è presente, significa che la probabilità di trasformare il processo in una forma cronica è alta. La presenza di HeVag indica un paziente altamente contagioso.
Va ricordato che la diagnosi di laboratorio dell'epatite B, che fornisce un risultato negativo per HBsAg, non esclude la diagnosi stessa. Un importante elemento cruciale è la presenza di IgM anti-HBc nel sangue. Questi anticorpi confermeranno la malattia con accuratezza. Se l'esame del sangue non contiene IgM anti-HBc, questo può indicare la presenza di HBV e la presenza di questi anticorpi indica un'intensificazione dell'infezione.
Rilevazione del DNA dell'epatite B
Lo studio più importante per determinare la presenza del DNA del virus è la PCR. L'analisi indica l'attività del processo infettivo. Con questo metodo puoi conoscere la prognosi della malattia.
Se l'epatite è più favorevole, il DNA dell'HBV scompare dal sangue durante i periodi iniziali del processo di infezione. La diagnosi di laboratorio sotto forma di PCR fornisce dati sulla qualità del trattamento (fa l'effetto di un particolare farmaco).
Per capire quali tattiche dovrebbero essere prese per la nomina di misure terapeutiche, è necessario eseguire un metodo quantitativo di PCR. La PCR quantitativa fornisce la prova di una reazione positiva dalla terapia.
Base per la diagnosi
Per effettuare una diagnosi appropriata, saranno richiesti i seguenti esami:
- Ispezione giornaliera, palpazione
- Ultrasuoni del fegato.
- Analisi biochimiche del sangue (eseguite ripetutamente).
- Esame per HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc totale, HBV DNA.
- I marker di HBV e HCV (epatite virale è escluso).
- Puntura del fegato
- Biopsia epatica. Con l'aiuto di un ago speciale, la parete addominale viene perforata e un piccolo pezzo di fegato viene rimosso per l'esame istologico (il pezzo ha una dimensione non superiore a mezzo grammo). La biopsia è l'ultimo metodo di test per l'epatite. Grazie a lei, puoi parlare più accuratamente del grado di attività del processo infettivo, della fibrosi epatica. Una biopsia è una procedura chirurgica. Può portare a complicazioni, quindi spesso non viene utilizzato per la diagnosi.
- Fibroelastografiya. Può essere usato per stimare la densità del tessuto epatico. La tecnica è simile agli ultrasuoni. Lo studio utilizza un sensore speciale che viene installato sulla pelle nel sito di proiezione del fegato.
- FibroTest. Si basa sul conteggio di alcuni conteggi ematici.
Epatite cronica B
Fase di procreazione dell'epatite B cronica:
Fase 1 - Replica del virus. Il virus si moltiplica con l'aumento dell'attività.
Fase 2 - integrazione. Il virus smette di moltiplicarsi. Il genoma virale inizia ad integrarsi nel DNA delle cellule epatiche normali, gli epatociti.
Per determinare il tasso di progressione del virus, è importante comprendere la gravità del processo, l'esito, il grado di interruzione delle cellule epatiche. La diagnosi di laboratorio di epatite cronica si basa sul rilevamento di:
Se l'epatite HBeAg-positiva (analisi positiva), quindi nella massa eritrocitaria sarà:
- nella fase di allevamento - HBsAg, HBeAg, anti-HBc IgM, anti-HBc (totale), HBV DNA;
- nella fase di inserimento degli epatociti in DNA - HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (totale), HBV DNA.
Se l'epatite è sieronegativa, nella massa sanguigna sarà presente HBsAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBV DNA. Inoltre, la loro presenza non dipende in alcun modo dallo stadio del processo infettivo.
Diagnostica differenziale
Quando si effettua una diagnosi, il medico è obbligato a differenziare l'epatite B con altre malattie - epatite A, C, E, D. La diagnosi finale può essere fatta solo dopo che determinati marcatori specifici per ciascuna delle cellule dell'epatite sono stati identificati nella massa sanguigna.
L'epatite dovrebbe essere differenziata con altre importanti malattie: infezioni virali respiratorie acute, calcoli biliari, intossicazione alimentare, infezione intestinale, patologia chirurgica degli organi addominali e molte altre malattie.
Epatite autoimmune
Per l'epatite autoimmune, la diagnosi comprende i seguenti esami più importanti:
- Analisi della massa dei globuli rossi (OAK). Spiegazione: l'anemia (normocitica) nel sangue è osservata nell'epatite autoimmune, un contenuto ridotto di leucociti, piastrine e un aumento del ROE. Ma ci si può aspettare un più alto grado di anemia.
- Urina. Decifrazione dell'analisi delle urine: contiene proteine, globuli rossi, bilirubina.
- Esame del sangue per biochimica. Analisi molto pertinente. Interpretazione: aumento della bilirubina, aumento dell'arginasi, diminuzione dell'albumina, aumento delle γ-globuline e test del timolo. Il test sublimato è ridotto. Alcuni indicatori possono essere aumentati di 2 o più volte. Questo è un test positivo per l'epatite autoimmune.
- Analisi immunologiche Decodifica: diminuzione dei soppressori dei linfociti T, le cellule lupus compaiono nella massa degli eritrociti, aumenta il numero di immunoglobuline, gli anticorpi per gli eritrociti.
Un test positivo per l'epatite può essere rilevato attraverso un metodo sierologico di ricerca. L'epatite autoimmune è una malattia eterogenea.
ELISA per epatite virale
9 marzo 2017, 16:25 Articoli esperti: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3.608
Per rilevare l'epatite virale nel corpo, la medicina utilizza ampiamente un saggio immunoenzimatico basato sul rilevamento della concentrazione e del tipo di antigeni che utilizzano anticorpi ed enzimi. Viene effettuato per fasi, mediante ricerche di laboratorio, con elevata accuratezza delle indicazioni. A seconda della quantità e classe di anticorpi, il colore e la concentrazione dell'enzima che utilizza ELISA e, di conseguenza, il medico diagnosticano la malattia, i cambiamenti.
Cos'è ELISA?
La presenza di epatite virale nel corpo del paziente viene determinata utilizzando un metodo sierologico di analisi del sangue per la presenza di virus HCV e di marcatori (corpi e anticorpi) che lo indicano. Il test immunoassorbente legato all'enzima (ELISA) esamina vari virus, composti a basso peso molecolare, macromolecole, i loro indicatori qualitativi e quantitativi, usando la manifestazione della reazione ai loro antigeni. Per fare ciò, utilizzare l'enzima come etichetta per la registrazione del segnale. Viene sempre più utilizzato in medicina, perché l'ELISA individua chiaramente antigeni ben definiti, senza confonderli con gli altri, ha un'alta sensibilità alla presenza di invasione nell'epatite virale.
Lo svantaggio di una tale diagnosi è l'incapacità di identificare la causa della malattia, poiché il metodo indica solo la reazione del sistema immunitario del corpo. I risultati dell'analisi sono influenzati dalla vaccinazione effettuata in precedenza. Per 8 ore prima dell'analisi si raccomanda di astenersi dal mangiare, la nicotina e l'alcol. La base del test ELISA è la risposta enzimatica e immunitaria del corpo al virus. Le molecole biologiche si legano alla cellula e ai suoi elementi, i microrganismi, rilevano il virus, quindi lavorano gli enzimi che consentono di esprimere la risposta immunitaria in un parametro visibile e misurabile.
Indicazioni per l'analisi
L'epatite virale nel corpo può causare il cancro e la cirrosi epatica. L'importanza della diagnosi tempestiva è indiscutibile. Il metodo principale di diagnosi è il test ELISA, che con alta precisione determina la presenza del virus HCV (IgM e IgG) e l'attività dei suoi elementi in traccia. Test obbligatori per l'epatite virale:
- Persone con gruppi a rischio (tossicodipendenti, malati di AIDS, impiegati di istituzioni mediche e di polizia).
- Persone con epatite acuta o cronica
- Donne incinte e in gravidanza di pianificazione.
L'ELISA riconosce la malattia in qualsiasi momento. I risultati dell'analisi, in media, sono pronti in 2 giorni.
Criteri che determinano l'importanza dell'analisi
Il test ELISA determina la presenza di anticorpi della classe IgG, IgM, IgA. Durante la diagnosi dell'epatite virale, il medico non presta attenzione al loro tipo, poiché la presenza di una tale manifestazione del virus dell'HCV indica già uno stadio acuto o cronico della malattia. Nelle prime fasi della malattia, il livello di IgM aumenta (5 giorni dopo l'infezione); il 15 ° / 20 ° giorno, gli anticorpi IgG appaiono e possono rimanere nel sangue umano per molto tempo anche dopo la cura; IgA - compare dopo 10-14 giorni, diminuisce dopo il trattamento.
Se le IgG e le IgA vengono rilevate dopo l'uso di farmaci e il loro livello rimane allo stesso tasso, il vettore ha una forma cronica di epatite. Un criterio importante del test sarà una chiara definizione della classe di anticorpi disponibili e della loro quantità. Sulla base di questo, puoi conoscere non solo la presenza della malattia, ma anche la fase del suo sviluppo. L'individuazione di tali elementi nel sangue del paziente consente di prescrivere il trattamento corretto e tempestivo per prevenire conseguenze più gravi.
Come è fatto?
Assegnare il test ELISA diretto e non diretto. Stage diretti:
- Raccolta di materiale biologico e collocazione in fori speciali.
- Entro 15-30 minuti gli antigeni sono attaccati alla superficie dei pozzetti.
- Aggiunta di anticorpi ai pozzetti all'antigene trovato. Tutti lasciati per 1-5 ore.
- Rimuovere gli antigeni non attaccati (versando il contenuto dei pozzetti).
- Risciacquare i pozzetti con una soluzione speciale.
- Aggiungere la soluzione enzimatica ai pozzetti. Lasciare agire per 30 minuti - 1 ora.
- L'uso della colorimetria (rilevazione del colore e concentrazione del colore del contenuto del pozzo, confronto con indicatori direttamente proporzionali alla concentrazione del virus).
Il metodo ELISA indiretto avviene con l'uso di anticorpi senza etichetta per gli antigeni trovati e la successiva aggiunta di etichette ad essi. In primo luogo, il sangue viene prelevato dal paziente e diffuso attraverso i pozzetti per 15-30 minuti. (gli anticorpi sono fissati con i fori). Quindi gli anticorpi non marcati vengono introdotti in esse per 1-5 ore (la connessione di anticorpi con antigeni è formata - il complesso immunitario). Successivamente, i microelementi non attaccati vengono versati dai pozzetti e lavati con una soluzione speciale. Nella fase successiva, il tecnico di laboratorio aggiunge gli oligoelementi etichettati ai pozzetti per 15-30 minuti. (questo si lega senza etichetta con l'etichetta con la formazione del complesso "anticorpo-anticorpo-antigene"). Extra (sciolto) vengono rimossi di nuovo durante lo scarico e il lavaggio con la soluzione. Il prossimo è l'enzima che cambia colore in 5-30 minuti. rimane nei buchi e i dati relativi ai colori vengono confrontati con i dati degli indicatori della tabella. ELISA indiretto è più preciso.
Cosa mostra un ELISA per l'epatite virale?
Il saggio immunologico consente di rilevare la presenza di infezioni (virus dell'epatite di tutti i tipi, HIV, herpes, sifilide, citomegalovirus, morbillo, rosolia, virus della parotite, virus Epstein-Barr), è un marker di malattie autoimmuni, cellule tumorali. Indica violazioni delle funzioni riproduttive (alterazioni del testosterone, prolattina, estradiolo e progesterone), malfunzionamento della tiroide, infestazione da elminti, clamidia. Efficace per rilevare ureaplasmosis, pertosse, virus Dange, virus West Nile, Borrelia. L'elenco delle definizioni è alto, include molti elementi.
Conferma dei risultati
La determinazione dell'antigene del virus dell'HCV mediante ELISA fornisce un'accuratezza del 98%. Viene anche usato per testare il materiale biologico con indicatori sfocati precedenti. La presenza di antigeni IgM non è un indicatore per l'epatite acuta e richiede ulteriori ricerche. Quando il test ELISA viene ripetuto, i risultati coincidono con il 90-100%. In caso di discrepanza minima, il valore medio è considerato come un indicatore. Per la massima precisione in termini di medici consigliare in parallelo di condurre un'analisi biochimica del sangue. Per testare i risultati dopo il dosaggio immunoenzimatico, è possibile utilizzare altri metodi diagnostici.
Studi sul virus dell'epatite B (ELISA e PCR)
Antigene del virus dell'epatite B (HBsAg)
L'antigene di superficie dell'epatite B nel siero è normalmente assente.
La rilevazione dell'antigene di superficie dell'epatite B (HBsAg) nel siero conferma l'infezione acuta o cronica con il virus dell'epatite B.
In caso di malattia acuta, HBsAg viene rilevato nel siero nelle ultime 1-2 settimane del periodo di incubazione e nelle prime 2-3 settimane del periodo clinico. La circolazione di HBsAg nel sangue può essere limitata a pochi giorni, quindi è necessario sforzarsi per un primo esame iniziale dei pazienti. Il metodo ELISA consente di rilevare HBsAg in oltre il 90% dei pazienti. Quasi nel 5% dei pazienti, i metodi di ricerca più sensibili non rilevano HBsAg, in questi casi l'eziologia dell'epatite B virale è confermata dalla presenza di JgM anti-HBcAg o PCR.
La concentrazione sierica di HBsAg in tutte le forme di gravità dell'epatite B all'altezza della malattia ha una gamma significativa di fluttuazioni, tuttavia, vi è un certo pattern: nel periodo acuto c'è una relazione inversa tra la concentrazione sierica di HBsAg e la gravità della malattia.
Alte concentrazioni di HBsAg sono più comuni nelle forme lievi e moderate della malattia. Nelle forme gravi e maligne, la concentrazione di HBsAg nel sangue è spesso bassa e nel 20% dei pazienti con forma grave e nel 30% con un antigene maligno nel sangue potrebbe non essere rilevata affatto. L'aspetto di questo background in pazienti con anticorpi anti-HBsAg è considerato un segno diagnostico sfavorevole; è determinato in forme maligne di epatite B.
Nel decorso acuto dell'epatite B, la concentrazione di HBsAg nel sangue diminuisce gradualmente fino alla completa scomparsa di questo antigene. L'HBsAg scompare nella maggior parte dei pazienti entro 3 mesi dall'insorgenza di un'infezione acuta.
Una diminuzione della concentrazione di HBsAg di oltre il 50% entro la fine della 3a settimana del periodo acuto, di regola, indica un completamento vicino del processo di infezione. Di solito nei pazienti con un'alta concentrazione di HBsAg all'altezza della malattia, viene rilevato nel sangue per diversi mesi.
Nei pazienti con basse concentrazioni di HBsAg scompare molto prima (a volte diversi giorni dopo l'inizio della malattia). In generale, il tempo di rilevamento dell'HBsAg varia da diversi giorni a 4-5 mesi. Il periodo massimo di rilevazione dell'HBsAg con un ciclo regolare di epatite B acuta non supera i 6 mesi dall'insorgenza della malattia.
L'HBsAg può essere trovato in persone sane, di regola, in studi profilattici o accidentali. In tali casi, vengono esaminati altri marker di epatite virale B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg e viene studiata la funzione epatica.
In caso di risultati negativi, sono necessari studi ripetuti su HBsAg.
Se ripetuti esami del sangue per più di 3 mesi rivelano HBsAg, questo paziente è classificato come un paziente cronico con epatite B.
La presenza di HBsAg è abbastanza comune. Ci sono oltre 300 milioni di vettori nel mondo e nel nostro paese ci sono circa 10 milioni di vettori.
La cessazione della circolazione di HBsAg con successiva sieroconversione (formazione di anti-HBs) indica sempre il recupero - l'igiene del corpo.
Un esame del sangue per la presenza di HBsAg viene utilizzato per i seguenti scopi:
- periodo di incubazione;
- malattia acuta;
- recupero precoce;
- epatite cronica persistente;
- cirrosi epatica;
per lo screening e l'identificazione di pazienti in gruppi a rischio:
Valutazione dei risultati della ricerca
I risultati dello studio sono espressi qualitativamente - positivi o negativi. Un risultato negativo indica l'assenza di HBsAg sierico. Un risultato positivo: l'identificazione di HBsAg indica un'incubazione o un periodo acuto di epatite virale acuta B, nonché nell'epatite virale cronica B.
Anticorpi contro l'antigene nucleare del virus dell'epatite B JgG (anti-HBcAg JgG)
Normalmente, il siero anti-HBcAg è assente nel siero.
Nei pazienti con anti-HBcAg JgG compaiono nel periodo acuto dell'epatite B virale e persistono per tutta la vita. Anti-HBcAg JgG è il marker principale dell'HBV trasferito.
Gli esami del sangue per anti-HBcAg JgG sono usati per diagnosticare:
Valutazione dei risultati della ricerca
Il risultato dello studio è espresso qualitativamente - positivo o negativo. Un risultato negativo indica l'assenza di siero anti-HBcAg JgG. Un risultato positivo: l'identificazione di anti-HBcAg JgG indica un'infezione acuta, convalescenza o epatite virale precedentemente trasferita.
Antigene "e" del virus dell'epatite B (HBeAg)
Normalmente, l'HBeAg nel siero è assente.
L'HBeAg può essere trovato nel siero della maggior parte dei pazienti con epatite virale acuta B. Di solito scompare nel sangue prima dell'antigene HBs. Un alto livello di HBeAg nelle prime settimane della malattia o il suo rilevamento per più di 8 settimane dà motivo di sospettare un'infezione cronica.
Questo antigene è spesso rilevato nell'epatite cronica attiva di eziologia virale. Di particolare interesse per la definizione di HBeAg è il fatto che il suo rilevamento caratterizza la fase replicativa attiva del processo infettivo. È stato stabilito che alte concentrazioni di HBeAg corrispondono ad un'alta attività della DNA polimerasi e caratterizzano la replicazione attiva del virus.
La presenza di HBeAg nel sangue indica la sua alta infettività, vale a dire la presenza di infezione da epatite B attiva nel corpo in esame e viene rilevata solo in presenza dell'antigene HBs nel sangue. Nei pazienti con epatite cronica attiva, i farmaci antivirali vengono utilizzati solo quando l'HBeAg viene rilevato nel sangue. HBeAg - antigene - un marcatore della fase acuta e replicazione del virus dell'epatite B.
Un test del sangue per la presenza dell'antigene HBe viene utilizzato per diagnosticare:
Valutazione dei risultati della ricerca
Il risultato dello studio è espresso qualitativamente - positivo o negativo. Un risultato negativo indica l'assenza di siero HBeAg. Un risultato positivo: il rilevamento di HBeAg indica un'incubazione o un periodo acuto di epatite virale acuta B o la continua replicazione del virus e l'infettività del paziente.
Anticorpi anti-antigene "e" del virus dell'epatite B (anti-HBeAg)
L'anti-HBeAg nel siero è normalmente assente. La comparsa di anticorpi anti-HBeAg di solito indica una rimozione intensiva dal corpo del virus dell'epatite B e un'infezione minore del paziente.
Questi anticorpi compaiono nel periodo acuto e persistono fino a 5 anni dopo l'infezione. Nell'epatite cronica persistente, l'anti-HBeAg si trova nel sangue del paziente insieme all'HBsAg. Seroconversione, cioè la transizione da HBeAg a anti-HBeAg, con epatite cronica attiva, più spesso prognosticamente favorevole, ma la stessa sieroconversione non migliora la prognosi della grave trasformazione epatica cirrotica.
Gli esami del sangue per la presenza di anti-HBeAg sono utilizzati nei seguenti casi nella diagnosi di epatite B virale:
Valutazione dei risultati della ricerca
Il risultato dello studio è espresso qualitativamente - positivo o negativo. Un risultato negativo indica l'assenza di anticorpi contro l'HBeAg nel siero. Un risultato positivo è la rilevazione di anticorpi contro l'HBeAg, che può indicare lo stadio iniziale dell'epatite virale acuta B, il periodo acuto dell'infezione, lo stadio iniziale della convalescenza, la convalescenza, l'epatite virale B persistente recentemente trasferita o l'epatite virale B.
I criteri per la presenza di epatite B cronica sono:
Rilevazione del virus dell'epatite B mediante PCR (qualitativamente)
Il virus dell'epatite B nel sangue è normalmente assente.
La determinazione qualitativa del virus dell'epatite B mediante il metodo PCR nel sangue consente di confermare la presenza del virus nel corpo del paziente e stabilisce quindi l'eziologia della malattia.
Questo studio fornisce informazioni utili per la diagnosi dell'epatite virale acuta B nell'incubazione e nelle fasi iniziali di sviluppo della malattia, quando i principali marcatori sierologici del sangue nel paziente possono essere assenti. Il DNA virale sierico è rilevato nel 50% dei pazienti in assenza di HBeAg. La sensibilità analitica del metodo PCR non è inferiore a 80 particelle virali in 5 μl, l'ultimo campione di rilevazione del DNA, specificità - 98%.
Questo metodo è importante per la diagnosi e il monitoraggio del decorso dell'HBV cronica. Circa il 5-10% dei casi di cirrosi e altre malattie croniche del fegato sono causati da portatore cronico del virus dell'epatite B. I marker dell'attività di tali malattie sono la presenza di HBeAg e DNA del virus dell'epatite B nel sangue.
Il metodo PCR consente di determinare nel sangue il DNA del virus dell'epatite B sia qualitativamente che quantitativamente. Il frammento determinato in entrambi i casi è l'unica sequenza di DNA del gene della proteina strutturale del virus dell'epatite B.
Il rilevamento del DNA del virus dell'epatite B nel biomateriale mediante PCR è necessario per:
La scomparsa del DNA dell'epatite B dal sangue è un segno dell'efficacia della terapia
Rilevazione del virus dell'epatite B mediante PCR (quantitativa)
Questo metodo fornisce informazioni importanti sull'intensità dello sviluppo della malattia, l'efficacia del trattamento e lo sviluppo della resistenza ai farmaci attivi.
Per la diagnosi di epatite virale mediante PCR nel siero, vengono utilizzati sistemi di test, la cui sensibilità è di 50-100 copie in un campione, che consente di rilevare il virus a una concentrazione di 5 X 10 ^ 3 -10 ^ 4 copie / ml. La PCR nell'epatite virale B è certamente necessaria per giudicare la replicazione virale.
Il DNA virale sierico è rilevato nel 50% dei pazienti in assenza di HBeAg. Il siero di sangue, i linfociti e l'epatobiopsia possono servire come materiale per la rilevazione del DNA del virus dell'epatite B.
- La valutazione del livello di viremia è la seguente:
- meno di 2,10 ^ 5 copie / ml (meno di 2,10 ^ 5 UI / ml) - bassa viremia;
- da 2,10 ^ 5 copie / ml (2,10 ^ 5 UI / ml) a 2,10 ^ 6 copie / ml (8,10 ^ 5 UI / ml) - viremia media;
- più di 2,10 ^ 6 copie / ml - alta viremia.
Esiste una relazione tra l'esito dell'epatite virale acuta B e la concentrazione di DNA dell'HBV nel sangue di un paziente. Con un basso livello di viremia, il processo di cronizzazione dell'infezione è vicino allo zero, con una media, il processo è cronologico nel 25-30% dei pazienti, e con un alto livello di viremia, l'epatite virale acuta B più spesso diventa cronica.
Le indicazioni per il trattamento dell'interferone-alfa HBV cronico devono essere considerate la presenza di marcatori di replicazione virale attiva (rilevamento di HBV HBV, HBeAg e HBV DNA nel siero del sangue durante i precedenti 6 mesi).
I criteri per valutare l'efficacia del trattamento sono la scomparsa del DNA dell'HBEAg e dell'HBV nel sangue, che di solito si accompagna alla normalizzazione dei livelli delle transaminasi e alla remissione a lungo termine della malattia, l'HBV DNA scompare dal sangue entro il 5 ° mese di trattamento nell'80% dei pazienti. Ridurre il livello di viremia dell'85% o più entro il terzo giorno dall'inizio del trattamento rispetto al basale è un criterio rapido e abbastanza accurato per predire l'efficacia della terapia.
Ricerca sull'epatite virale con il metodo di ife
ELISA nella diagnosi di epatite virale. Capacità immunoenzimatiche enzimatiche
La diagnosi specifica di laboratorio dell'epatite virale si basa sull'uso di metodi di ricerca immunochimica e di ricerca molecolare biologica. I principali metodi immunochimici sono radioisotopi o radioimmuni (RIA) e immunodosaggio (ELISA). I metodi diagnostici immunochimici sono basati sull'interazione specifica di un antigene - un anticorpo con la successiva identificazione del complesso con l'aiuto di etichette speciali. Il dosaggio immunoenzimatico più comune.
Le prime relazioni sull'uso del saggio immunologico enzimatico. come metodo per determinare le sostanze sono stati pubblicati nel 1971 contemporaneamente da due gruppi di ricerca - B. Van Weemen, A. Schuurs e E. Engvall, P. Perlmann. Il saggio immunoenzimatico si basa sul seguente principio: sulla fase solida, che utilizza principalmente la superficie dei pozzetti di una compressa di polistirene, viene fissato l'antigene dell'agente infettivo o anticorpo (spesso una miscela di anticorpi) verso gli antigeni da rilevare. Questo antigene o anticorpi, che sono fissati sulla fase solida, sono chiamati immunosorbenti.
Come risultato dell'incubazione dell'immunosorbente e del siero del test in presenza di un agente rilevabile, questi sono legati al complesso antigene-anticorpo. Dopo la procedura di lavaggio, durante la quale vengono rimossi antigeni e anticorpi non legati, viene eseguita l'incubazione con il coniugato. Come coniugato per l'individuazione di HBsAg, vengono utilizzati anti-HBs nella rilevazione di anticorpi contro il virus dell'epatite C - anticorpi contro immunoglobuline umane (coniugato antivirus) marcate con perossidasi di rafano. Come risultato di questa incubazione, si verifica l'attaccamento ai complessi antigeni già esistenti - l'anticorpo del coniugato introdotto in aggiunta. Dopo la rimozione del coniugato non legato (lavaggio), il substrato viene introdotto nei pozzetti. Quando si utilizza un coniugato di perossidasi, il perossido di idrogeno viene utilizzato come substrato in combinazione con un indicatore, che viene spesso utilizzato come ortofenilendiammina (OPD) o tetrametilbenzidina (TMB). Il risultato è stimato fotometricamente.
La qualità e l'affidabilità delle capacità analitiche del metodo immunoenzimatico enzimatico sono caratterizzate da una serie di criteri, tra cui sensibilità, specificità, accuratezza e riproducibilità.
La sensibilità è la quantità minima di una sostanza che può essere rilevata mediante saggio immunoenzimatico. In questo caso, il limite inferiore della sensibilità di questo metodo è la concentrazione della sostanza in esame nel campione, che corrisponde al risultato positivo più piccolo della determinazione, che è statisticamente differente rispetto agli indicatori di campioni deliberatamente negativi. La sensibilità di un IFTS dipende da un numero di circostanze correlate sia al progetto del sistema di test (affinità dell'immunosorbente, alla qualità dell'estrazione e dei sistemi tampone), sia alla risoluzione e accuratezza del metodo di registrazione.
Specificità: la capacità di identificare esattamente i componenti per la determinazione di cui è stato progettato questo saggio immunoenzimatico. La specificità di ELISA è determinata in gran parte dalla reazione crociata di anticorpi o antigeni (cioè la composizione utilizzata come immunosorbente) con composti strettamente correlati, nonché dalla composizione del mezzo di incubazione (effetto matrice).
Correttezza - Corrispondenza del valore medio dei risultati di determinazioni ripetute dello stesso campione di controllo con il valore reale del parametro misurato. L'accuratezza della determinazione nell'ELISA dipende dalla qualità del sistema di test e del campione di controllo. Per i buoni sistemi di test immunologici, gli indicatori di correttezza sono nell'intervallo 90-110%. La particolarità della ricerca biomedica nell'ELISA è l'impossibilità di stabilire il valore esatto, e quindi la media di diversi laboratori esperti è considerata il vero valore. Il criterio statistico per la correttezza è la media aritmetica e il grado della sua deviazione dal valore vero, espresso in percentuale.
Riproducibilità - la capacità del sistema di prova di mostrare gli stessi valori con studi ripetuti dello stesso campione. La riproducibilità dipende sia da errori casuali (errori) durante la procedura della reazione, sia dalla qualità dei sistemi di test e dalla precisione del metodo di registrazione dei risultati. Si ritiene che la riproducibilità degli stessi campioni di controllo della stessa azienda in diversi laboratori non dovrebbe superare il valore del coefficiente di variazione del 15%.
Esistono diversi schemi ELISA specifici per la determinazione dei marcatori dell'epatite virale: a) dosaggio immunoenzimatico diretto; b) dosaggio immunoenzimatico indiretto; c) inibizione competitiva; c) metodo "trap" o "capture".
Dei metodi molecolari biologici per la diagnosi dell'epatite virale, la reazione a catena della polimerasi e l'ibridazione sono più comunemente usati. Questi metodi, in particolare la PCR, consentono di rilevare quantità molto piccole di DNA o RNA virali specifici e, quindi, giudicare la replicazione e, in alcuni casi, l'attività di replicazione.
Esame del sangue dell'epatite C
L'epatite C è una delle più comuni malattie del fegato che si verifica quando è infettata dal virus dell'epatite C (HCV), che entra nel corpo principalmente quando entra in contatto con il sangue di una persona infetta. L'epatite C cronica e acuta si verifica.Nel 70-80% dei pazienti con epatite C acuta, non ci sono sintomi della malattia, solo in alcuni casi, dopo qualche tempo dall'infezione, ci sono manifestazioni della malattia, che si manifestano in affaticamento, dolore addominale, perdita di appetito, oscuramento urina, vomito, nausea, feci alleggerenti, ittero, dolore alle articolazioni. Di norma, i sintomi si manifestano 6-7 settimane dopo l'infezione, ma la durata dell'insorgenza dei segni della malattia varia da 2 settimane a sei mesi. Se i sintomi sopra riportati si verificano, è necessario consultare un medico di malattie infettive e sottoporsi a un esame del sangue per l'epatite C. La diagnosi di epatite, eseguita in modo tempestivo, può rilevare la malattia nelle fasi iniziali e aumentare significativamente le possibilità di recupero.
Quando è in programma un test per l'epatite C
Situazioni in cui è richiesto un test dell'epatite C:
- durante la gravidanza e la pianificazione familiare;
- pazienti con sintomi di epatite cronica o acuta;
- la persona è a rischio. Si tratta di operatori sanitari, persone in carcere, agenti delle forze dell'ordine, persone che usano droghe, hanno un gran numero di partner sessuali, hanno l'AIDS, sono in emodialisi e altri.
Preparazione per l'analisi dell'epatite C
La preparazione speciale per l'analisi dell'epatite C non è richiesta. Per l'analisi, il sangue viene prelevato da una vena a stomaco vuoto e, allo stesso tempo, devono trascorrere almeno otto ore dopo l'ultimo pasto.
Test ELISA per l'epatite C
La prima analisi, solitamente prescritta per la diagnosi di test dell'epatite C - ELISA (saggio immunoassorbente legato all'enzima). I test ELISA per l'epatite C consentono di rilevare la presenza di anticorpi nel virus dell'epatite C (anti-HCVAb) nel sangue. Se il risultato del test ELISA è positivo, indica la presenza di contatto del corpo con il virus dell'epatite C. Ma il 40% delle persone che hanno un ELISA positivo non rileva il virus nel sangue. Questo fenomeno è chiamato un risultato falso positivo. Inoltre, con l'aiuto dell'ELISA, viene controllato il sangue del donatore.
RIBA per l'epatite C
L'analisi RIBA per l'epatite C viene utilizzata per confermare un risultato ELISA positivo. Il metodo di immunoblotting ricombinante (RIBA) è uno studio più accurato della presenza di anticorpi contro il virus dell'epatite C. Anche la presenza del virus dell'epatite C nel corpo non determina un risultato positivo, ma conferma solo la presenza di anticorpi.
Test PCR dell'epatite C
Al fine di rilevare la presenza di virus dell'epatite C nel sangue (HCV RNA) e di fare una diagnosi, utilizzano più spesso l'analisi con il metodo della reazione a catena della polimerasi (PCR). Questo studio consente di rilevare con elevata precisione la presenza nel sangue anche di una piccola parte del virus. L'analisi PCR per l'epatite C può rivelare la presenza di un virus già 5 giorni dopo l'infezione, molto prima della comparsa degli anticorpi. Quando il risultato dell'analisi PCR è positivo, significa la presenza di un'infezione attiva.
Ci sono tali variazioni dell'analisi PCR:
- PCR quantitativa, che consente di determinare non solo il fatto della presenza del virus, ma anche la carica virale (quantità del virus). Questo indicatore è di grande importanza per determinare l'efficacia del trattamento;
- genotipizzazione che stabilisce il genotipo del virus dell'epatite C, che è importante per determinare la durata e le tattiche del trattamento. Esistono più di 10 genotipi del virus dell'epatite C, ma per la pratica clinica è sufficiente definire cinque dei tipi più comuni: 1a, 1b, 2,3a / 3b.
L'analisi quantitativa della PCR viene eseguita:
- con un test qualitativo positivo per la presenza dell'RNA del virus dell'epatite C nel siero;
- per una valutazione accurata dell'efficacia del trattamento;
- determinare la tattica del trattamento del paziente.
Non esiste una relazione diretta tra la gravità dell'epatite C e la quantità di virus nel sangue. La concentrazione del virus influenza l'infettività della malattia, cioè maggiore è la quantità di virus nel sangue del paziente, maggiore è il rischio di trasmissione del virus, ad esempio, attraverso il contatto sessuale o da madre a figlio. Inoltre, l'efficacia del trattamento dipende dalla concentrazione del virus. Durante la terapia, un fattore favorevole è una bassa carica virale, e uno molto alto è sfavorevole.
L'analisi di genotipizzazione è fatta:
- con un test qualitativo positivo per la presenza dell'RNA del virus dell'epatite C nel siero;
- per una valutazione accurata dell'efficacia del trattamento;
- determinare la tattica del trattamento del paziente;
- per predire la cronologia del processo infettivo;
- per determinare la progressione della malattia.
Rilevazione del genotipo del virus è di grande importanza per determinare la durata del trattamento, che è importante, poiché l'interferone ha una vasta gamma di effetti collaterali e bassa tolleranza del paziente.
Analisi di decodifica per l'epatite C
Normalmente, l'RNA virale, gli anticorpi anti-antigeni e gli antigeni sono completamente assenti. La presenza di anticorpi nel sangue indica la presenza di epatite C cronica o acuta o il periodo di recupero. Se l'HCV RNA è presente nel sangue, che è determinato dall'analisi PCR, questo indica la presenza di un virus nel sangue.
Con una tecnica di prova errata, anomalie del trasporto e del sangue, l'analisi della PCR può a volte mostrare risultati falsi positivi. Le analisi di ELISA e RIBA nelle prime fasi della malattia, quando il corpo non ha ancora prodotto una quantità sufficiente di anticorpi, possono mostrare un risultato falso-negativo.
Se, al momento di decifrare il test per l'epatite C, si ottengono risultati positivi, è necessario contattare un medico infettivo e un gastroenterologo per ulteriori diagnosi e trattamenti.
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Diagnosi di epatite
Non è possibile determinare immediatamente la presenza di epatite nel corpo, poiché il periodo di incubazione della malattia può durare fino a quattro settimane. Quando compaiono i primi segni della malattia, si verificano cambiamenti radicali nella composizione del sangue nell'organismo colpito: un'analisi biochimica segnala un grave problema di salute e la presenza di un virus patogeno. Tuttavia, per fare una diagnosi definitiva, non è sufficiente donare il sangue per l'epatite, così come una diagnosi dettagliata dell'epatite.
Diagnosi di laboratorio dell'epatite
È auspicabile eseguirlo dopo la fine del periodo di incubazione, in modo che il medico con la massima precisione possa determinare la malattia epatica presente nel corpo. In caso contrario, il trattamento prescritto non darà l'effetto terapeutico desiderato e addirittura esacerba il quadro clinico prevalente.
Diagnosi di epatite A
Tipicamente, la diagnosi di epatite A inizia con un interrogatorio dettagliato del paziente e la nomina di un numero di test che devono essere eseguiti al più presto possibile. Questo è:
- analisi del sangue biochimica;
- emocromo completo;
- Metodo PCR;
- ELISA;
- coagulazione.
Se la malattia di Botkin progredisce, quindi un salto anormale di bilirubina, AlAT e AsAT, il campione di timolo viene osservato in base ai risultati dell'analisi del sangue biochimica. Inoltre, vengono prodotte IgM anti-HAV specifiche, che sono un fatto inconfutabile della presenza di epatite A.
In generale, l'analisi del sangue è determinata dal declino dei leucociti, dal salto nella VES e dalla linfocitosi. E, tuttavia, il più affidabile è il metodo PCR, che determina l'indicatore dell'RNA del virus patogeno.
Inoltre, il medico studia i sintomi della malattia, dopo di che può fare una diagnosi definitiva e passare alla terapia più efficace. La necessità di un esame strumentale è estremamente rara. Dopo il successo del trattamento conservativo nelle condizioni di ospedalizzazione e quarantena del paziente, si attende un recupero definitivo e l'epatite A non si ripresenta più.
Diagnosi di epatite B
Per determinare la presenza di virus dell'epatite B è anche possibile in base ai risultati degli esami di laboratorio, e per questo la prima cosa è richiesta per donare il sangue per l'epatite. Per natura, il virus patogeno ha tre antigeni principali: HBsAg, HBcAg e HBeAg, a cui vengono prodotti anticorpi nel corpo. La caratteristica principale di questo quadro clinico è ELISA - ELISA, che rivela solo marcatori specifici dell'epatite B.
Immediatamente dovrebbe essere chiarito che l'antigene HBsAg appare nel sangue anche prima dei primi sintomi di epatite ed è determinato in modo affidabile nel periodo itterico. Tuttavia, un test negativo non esclude la presenza di epatite B e pertanto richiede l'uso di un metodo di reazione a catena della polimerasi (PCR) ugualmente efficace.
Se si sospetta che l'epatite B sia obbligatoria è un esame del sangue biochimico, che si raccomanda di passare in primo luogo. L'esecuzione di una biopsia del fegato e degli ultrasuoni degli organi peritoneali viene discussa individualmente, ma quando la storia della malattia è molto chiara, non sono necessari metodi di esame clinico.
Ecogramma epatico nell'epatite autoimmune allo stadio dell'epatite cronica
Diagnosi di epatite C
Per fare questa diagnosi, non è sufficiente donare il sangue per l'epatite, poiché il virus può prevalere nel corpo in una forma latente. E, tuttavia, i test di laboratorio principali sono tutte le analisi presentate sopra, così come le prestazioni aggiuntive di una biopsia epatica. Questo esame al microscopio di materiale biologico (nel nostro caso, un pezzo di tessuto epatico) determina l'estensione del processo patologico e della fibrosi del tessuto. Il campionamento del materiale viene eseguito in anestesia locale, le complicazioni di tale procedura sono estremamente rare nella pratica medica.
Se si sospetta l'epatite C, il metodo principale di esame clinico è l'ecografia degli organi peritoneali. La ragione è semplice: la malattia è spesso manifestata da un cambiamento visivo nel fegato interessato, cambiamenti nella sua struttura e dimensione. In questo modo puoi determinare:
- la dimensione del fegato, della milza, del pancreas e della cistifellea;
- cambiamenti patologici in questi organi;
- flusso sanguigno generale negli organi peritoneali;
- area ottimale per eseguire una biopsia epatica.
Questo metodo di esame clinico determina tutte le patologie focali di un organo a livello microscopico. Se il fegato è rappresentato sullo schermo in scala di grigi, è necessaria una biopsia immediata, poiché il colore grigio visualizza i tessuti interessati del "filtro umano".
Prevenzione dell'epatite
Poiché la malattia non si manifesta immediatamente, è lontana da tutte le immagini cliniche che procedono al trattamento immediato. Il paziente potrebbe semplicemente non essere consapevole dell'esistenza di un virus patogeno nel corpo, che a sua volta si diffonde rapidamente nel sangue e infetta cellule epatiche sane.
Per evitare un destino così tragico, si raccomanda di rispettare tutte le misure preventive. Tale vigilanza ridurrà significativamente il rischio di morbilità e ti salverà da gravi problemi di salute in futuro. Le regole di base della prevenzione sono presentate di seguito:
- lavati le mani dopo la strada;
- sottoporre a lavorazione di alta qualità verdure e frutta fresche;
- effettuare tutte le vaccinazioni preventive specificate nel piano di calendario annuale;
- atteggiamento selettivo verso i partner sessuali;
- evitare il contatto con persone malate;
- utilizzare solo siringhe monouso ed essere particolarmente vigili nelle stazioni trasfusionali.
Si raccomanda inoltre di eseguire regolarmente (una volta ogni sei mesi) una donazione di sangue per l'epatite, per assicurarsi che il virus non penetri nel corpo e non infetti le cellule epatiche, una volta sane. Se la diagnosi è determinata, è necessario diventare immediatamente un account di dispensario e seguire tutte le raccomandazioni di uno specialista.
Autore della pubblicazione:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Istruzione: Rostov State Medical University (Rostov State Medical University), Dipartimento di Gastroenterologia ed Endoscopia.
gastroenterologo
Dottore in Scienze Mediche