Il fegato è il laboratorio centrale del corpo. Sintetizza le proteine (albumina, protrombina, fibrinogeno, altri fattori di coagulazione del sangue), lipidi (colesterolo), lipoproteine, acidi biliari, bilirubina, bile. Le sostanze tossiche presenti nel corpo e che entrano nel corpo (funzione antitossica) sono utilizzate nel fegato. Il fegato sintetizza il glicogeno ed è coinvolto con il pancreas nella regolazione delle riserve di carboidrati nel corpo. Il suo ruolo attivo nella digestione è che la bile emulsiona i grassi e migliora la loro degradazione da parte della lipasi pancreatica. I prodotti alimentari che si dividono (grassi, acidi grassi, glicerina, amminoacidi, carboidrati, minerali, acqua, vitamine) entrano attraverso i vasi della vena porta al fegato. In esso, sono parzialmente depositati, parzialmente lavorati, usati e parzialmente preparati per essere utilizzati da altri tessuti.
Le malattie del fegato causano disturbi di una o l'altra delle sue funzioni, che viene utilizzata a scopi diagnostici. Il più ampiamente effettuato in studi di laboratori clinici di disordini del pigmento, carboidrato, funzioni di formazione di proteine. Nel danno epatico infiammatorio e tossico acuto, una quantità significativa di enzimi intracellulari viene rilasciata dal suo fegato. Studi di aldolasi, alanina e transaminasi aspartiche (aminoferasi), lattato deidrogenasi e sue frazioni, colinesterasi, arginasi e altri hanno acquisito valore diagnostico.Gli indicatori di attività di aldolasi e transaminasi sono usati per diagnosticare malattie infiammatorie del fegato, intossicazione, accompagnate dalla distrofia acuta dei suoi schemi, e anche i suoi modelli. fosfatasi prodotta nel tessuto osseo. Gli indicatori della sua attività sono usati nella diagnosi di ittero ostruttivo. Lo studio dello spettro enzimatico del sangue viene utilizzato nella diagnosi differenziale di varie malattie del fegato, in particolare dell'ittero.
Di seguito sono riportate le informazioni di base sul valore diagnostico dei campioni più noti, che riflettono lo stato del fegato in condizioni normali e patologiche. I metodi di alcuni campioni o principi della loro implementazione sono forniti se i metodi richiedono una descrizione dettagliata. I metodi biochimici per lo studio della funzione epatica si possono trovare nelle seguenti pubblicazioni: Linee guida per l'uso di metodi di ricerca clinici e di laboratorio standardizzati.
Test funzionali che riflettono il ruolo del fegato nel metabolismo dei carboidrati. Nelle malattie del fegato, il livello di zucchero nel sangue a digiuno nella maggior parte dei pazienti è normale: 4,44-6,11 mmol / l (80-110 mg%). Occasionalmente, si verifica iperglicemia, spesso dovuta a disfunzione del sistema nervoso vegetativo simpato-surrenale. Quando la cirrosi epatica, quando la sintesi del glicogeno viene disturbata e le sue riserve si esauriscono in modo significativo, può verificarsi ipoglicemia.
I campioni per la tolleranza ai carboidrati con carico di glucosio vengono eseguiti allo stesso modo dello studio della funzione dell'apparato insulare. Il test viene utilizzato principalmente con un singolo carico di glucosio (zucchero, fruttosio, levulosio).
Il test galattosurico si basa sul fatto che il galattosio è più difficile del glucosio, si trasforma in glicogeno e in caso di malattia del fegato in misura maggiore viene escreto dai reni. 40 g di galattosio vengono somministrati alla prova all'interno di 200 ml di acqua. Quindi l'urina viene raccolta in tre parti separate ogni 2 ore, per 6 ore vengono rilasciati 2-2,5 g di galattosio. Secondo A. I. Khazanov (1968), in epatite cronica il test è positivo nel 4-12% dei pazienti e in caso di cirrosi epatica nel 47,1% dei pazienti.
Le curve galattosemiche sono più sensibili del campione galattosurico. Uno stomaco vuoto in una persona sana contiene 0,1-0,9 mmol / L di sangue o 2-17 mg% di galattosio. Dopo un carico di 40 g di galattosio in una persona sana, si osserva un brusco innalzamento del livello di galattosio a 6,6 mmol / l, o 120 mg%, per 30-60 minuti, quindi dopo 2-3 h, l'indicatore si riduce a 2,20 mmol / l, o 40 mg%. Nelle persone con malattie del fegato, il livello di galattosio è più alto, dura più a lungo e non ritorna alla normalità dopo 3 ore.
Test funzionali che riflettono il ruolo del fegato nel metabolismo dei lipidi. Il fegato è coinvolto in tutte le fasi del metabolismo dei grassi. Per il normale assorbimento dei grassi nell'intestino, è necessaria la bile. Agisce come detergente ed emulsionante per il grasso, facilita il lavoro della lipasi pancreatica, migliora l'assorbimento dei grassi nell'intestino. Nel fegato, i fosfolipidi sono sintetizzati in presenza di sostanze lipotropiche che agiscono come donatori di gruppi lipidici (metionina, colina) o un fattore che contribuisce alla sintesi di fosfolipidi (vitamina B12). Con la mancanza di sostanze lipotropiche nel fegato si accumulano grassi neutri e la quantità di glicogeno diminuisce. Quando la malattia del fegato in esso diminuisce il contenuto di adenosina trifosfato, che dà energia per i processi sintetici.
Il livello di colesterolo nel sangue è l'indicatore più importante della sintesi lipidica nel fegato. Il colesterolo è ingerito con il cibo. Il suo assorbimento nell'intestino avviene con la partecipazione di acidi biliari. Tuttavia, il colesterolo alimentare non è l'unica o addirittura la principale fonte di colesterolo nel corpo. È costantemente sintetizzato nel fegato dall'acetilcoenzima A. La sintesi del colesterolo supera la sua assunzione. L'eccesso di colesterolo sia sintetizzato che dietetico viene escreto dal corpo attraverso l'intestino. Una parte di essa viene convertita nel fegato in acidi biliari e viene anche utilizzata in altri organi (ghiandole surrenali, testicoli) come materiale di partenza per la sintesi degli ormoni steroidei. Una parte del colesterolo è combinata nel fegato con acidi grassi per formare esteri di colesterolo.
Il contenuto di colesterolo nel sangue è determinato dal metodo Ilka. Il colesterolo è pre-estratto con cloroformio. In presenza di anidride acetica e una miscela di acido acetico e solforico, dà un colore verde alla soluzione. La concentrazione di colesterolo è determinata dal metodo calorimetrico sulla FEC. Nelle persone sane il siero contiene 3,0-6,5 mmol / l (116-150 mg%) di colesterolo. Nell'epatite e nella cirrosi epatica, vi è una violazione del colesterolo nel sangue: ipercolesterolemia, apparentemente associata a una violazione della funzione escretoria del fegato, meno spesso - ipocolesterolemia, associata ad una diminuzione della sua sintesi nel fegato.
Gli esteri di colesterolo nell'epatite si formano in quantità minori del normale e il rapporto tra esteri e colesterolo si riduce a 0,3-0,4 invece di 0,5-0,7 in sano.
Nel fegato, la sintesi delle lipoproteine è anche molto bassa e ad alta densità. I chilomicroni e una piccola porzione di lipoproteine a bassissima densità si formano nelle cellule epiteliali dell'intestino tenue. La sintesi e la decomposizione delle lipoproteine procede con la partecipazione della lipoproteina lipasi, che è associata all'eparina. Si noti che in caso di cirrosi epatica, il contenuto di eparina nel sangue diminuisce. Pertanto, il fegato è coinvolto sia nella formazione delle lipoproteine, sia nella loro distruzione. Con la malattia del fegato c'è dislipoproteinemia, principalmente aumento della formazione di lipoproteine (epatite, forme iniziali di cirrosi epatica). Vi è un aumento dei livelli ematici di beta-lipoproteine.
Lo studio delle lipoproteine nel sangue viene effettuato principalmente con metodo elettroforetico.
Il metabolismo interstiziale delle lipoproteine è compromesso in gravi malattie del fegato - coma epatico, cirrosi epatica. In questo caso, il contenuto di lattico (la norma è 0,78-1,2 mmol / l (7-14 mg%) e l'acido piruvico (la norma è 57-136 μmol / l (0,5-1,2 mg%)) aumenti nel sangue.
Quando viene rilevato il coma epatico, aumentano i livelli ematici di acetone.
Test funzionali che riflettono il ruolo del fegato nel metabolismo delle proteine. Il fegato trasamina gli amminoacidi, li ossida in acido piruvico nel ciclo dell'acido tricarbossilico (Krebs) e nella sintesi proteica. Tutte le albumine, il 75-90% delle alfa globuline, il 50% delle beta globuline sono sintetizzate nel fegato. Un fegato sano può produrre giornalmente 13-18 g di albumina. Protrombina, proconvertina, proaccelerin è sintetizzata solo nel fegato. La sintesi proteica avviene con la partecipazione di energia. Uno dei motivi per la diminuzione della funzione sintetica del fegato è una diminuzione del contenuto di composti microergici in esso. Nella grave malattia del fegato, la quantità totale di proteine del siero di latte può scendere a. 40 g / l invece di 80 g / l. Il contenuto di albumina è significativamente ridotto (fino a 20 g / l invece di 40 g / l). In condizioni patologiche, il fegato sintetizza globuline con proprietà insolite (paraproteine). È noto che tale proteina è macchiata in modo peggiore con il reagente del biureto, meno stabile in soluzione salina (ad esempio cloruro di calcio), in presenza di timolo. Con queste proprietà costruirono campioni diagnostici sedimentari.
La proteina sierica totale è determinata dal metodo polarimetrico o in reazione con un reagente biureto. Norma: 60-80 g / l. Le frazioni proteiche vengono stabilite mediante elettroforesi su carta o in gel di acrilammide. Il contenuto di albumina nel siero del sangue è, secondo V. E. Predtechensky, 56,5-66,8%, alfarglobulina - 3,0-5,6, alfagglobulina - 6,9-10,5, beta-globulina - 7,3 -12,5 e gamma globuline - 12,8-19,0%. Nelle malattie del fegato c'è una diminuzione del contenuto di albumina nel sangue, un aumento del contenuto di gammaglobuline. Nei processi infiammatori acuti (epatite), il livello di alfa-globuline aumenta 1,5-2 volte. Le gammaglobuline sono prodotte dai linfociti e dalle cellule del sistema reticoloendoteliale. Nell'epatite cronica che si verifica con processi autoimmuni pronunciati, il contenuto delle gammaglobuline nel sangue aumenta in modo significativo (fino al 30%). A. I. Khazanov osserva che un aumento significativo della beta o della gamma globulina è osservato in pazienti con cirrosi dekensirovanny del fegato e spesso indica una prognosi sfavorevole della malattia. Riflette la riorganizzazione della sintesi proteica nel fegato e l'aumento della formazione di paraproteine.
I campioni sedimentari si basano sui cambiamenti nella stabilità colloidale del siero del sangue quando interagiscono con vari elettroliti. La stabilità del sistema ematico colloidale è disturbata a causa di disproteinemia e paraproteinemia.
Il test sublimatico (reazione del sedimento sublimato), la reazione di Takat-Ara, consiste nel fatto che durante l'interazione del carbonato di sodio e sublimato con le proteine del siero del sangue precipitano formando fiocchi. Attualmente, la reazione è utilizzata in una modifica di Grinstedt (1948). A 0,5 ml di siero non emolizzato diluito con 1 ml di soluzione salina fisiologica viene aggiunta una soluzione allo 0,1% di goccioline sublimate fino a quando appare torbidità persistente, quando la lettura del testo del giornale diventa impossibile attraverso uno strato verticale di liquido. Il tasso è 1,6-2,2 ml di una soluzione allo 0,1% di cloruro mercurico. Il test è positivo nel danno epatico parenchimale, in particolare nella cirrosi epatica, epatite acuta e cronica, silicosi e silicotubercolosi.
Il test di Veltmann (test di coagulazione, reazione di termocoagulazione) fu proposto nel 1930 per differenziare i processi fibro-produttivi e necrotici nel fegato. Siero fresco senza tracce di emolisi viene versato in 11 provette numerate da 0,1 ml. Quindi, 5 ml di soluzione di cloruro di calcio vengono aggiunti in concentrazioni decrescenti: 0,1, 0,09, 0,08, ecc, a 0,01%, il contenuto delle provette viene delicatamente agitato e messo in un bagno di acqua bollente per 15 minuti, dopo di che il risultato è segnato. Il campione è considerato positivo in caso di precipitazione proteica. Il numero di tubi con un risultato positivo è chiamato una banda di coagulazione. Normalmente, sono 6-7 tubi. La sua diminuzione (spostamento a sinistra) è osservata nei processi infiammatori nei polmoni, nei tumori, nell'infarto miocardico; allungamento (spostamento verso destra) - nei processi infiammatori nel fegato, nella distrofia epatica acuta, nella cirrosi, così come nella malattia emolitica, nella nefrosi, nella tubercolosi polmonare fibrosa. Allo stato attuale, il campione Veltmann è stato modificato come segue: 4,9 ml di acqua vengono aggiunti a 0,1 ml di siero di sangue, quindi vengono aggiunti 0,1 ml di una soluzione allo 0,5% di cloruro di calcio. La miscela viene portata ad ebollizione, in assenza di un precipitato viene versato un altro 0,1 mi di soluzione di cloruro di calcio. La procedura viene ripetuta fino a quando una proteina murina appare nella provetta. I risultati sono valutati sulla quantità totale di cloruro di calcio spesa per la reazione. Normalmente sono richiesti 0,4-0,5 ml di cloruro di calcio.
Il test timolo (test di tymol-torbidità) nella modifica di Huerg e Popper (test timolo-toner) si basa sulla formazione di torbidità del siero in esame in presenza di una soluzione satura di timolo in tampone veronal. Il precipitato si forma come risultato della comparsa del complesso globulin-timolofosfatidico con una diminuzione del contenuto di albumina nel sangue, un aumento di beta e gamma globuline. Il grado di torbidità dipende dalla temperatura ambiente e dal pH. La reazione viene valutata mediante metodo fotocalorimetrico a 660 nm contro la soluzione timolo-meronale. Il calcolo viene eseguito secondo una curva di calibrazione compilata da una sospensione di solfato di bario. Normalmente, la torbidità sierica è 0-5 unità. M (Maklagana). Un aumento della torbidità (test positivo) è osservato in condizioni di danno epatico in epatite epidemica (il test è positivo prima dello sviluppo di ittero), nella cirrosi epatica, dopo epatite acuta e così via.
Quando gravi violazioni del fegato, il processo di deaminazione degli aminoacidi è disturbato, il che porta ad un aumento del loro contenuto nel sangue e nelle urine. Se nelle persone sane il contenuto di azoto amminico nel siero è 50-80 mg / l, poi con gravi processi distrofici nel fegato può aumentare fino a 300 mg / l (300 mg / l corrisponde al 30 mg% del rapporto di trasferimento dell'ammino azoto, espresso in mg%, in mmol / l è 0,7139). A. I. Khazanov osserva che nell'epatite virale acuta aumentano i livelli sierici di glutatione, acido glutammico, metionina, fenilalanina, serina e treonina. Con l'epatite cronica ha rivelato gli stessi cambiamenti nel contenuto di aminoacidi nel sangue, ma espresso in misura minore.
Durante il giorno, 100-400 mg (200 mg in media) di aminoacidi sono escreti nelle urine di una persona sana. L'amminoazot è tra questi l'1-2% dell'azoto totale delle urine e nelle malattie del fegato raggiunge il 5-10%. Nella distrofia epatica acuta si osserva un aumento dell'escrezione di leucina e tirosina nelle urine. Normalmente, la tirosina viene rilasciata nella quantità di 10-20 mg / l, con epatite virale acuta - fino a 1000 mg / l (2 g al giorno). Nel sedimento delle urine si possono trovare cristalli di leucina e tirosina.
L'azoto residuo e l'urea nel siero del sangue nelle malattie del fegato aumentano se si sviluppa insufficienza epatorenale acuta o danno epatico acuto grave (distrofia acuta in epatite acuta, esacerbazione di epatite cronica, cirrosi epatica, cancro del fegato, dopo chirurgia delle vie biliari e et al.). Nelle persone sane, l'azoto residuo nel sangue è 14,3-28,6 mmol / l (0,20-0,40 g / l), urea - 2,5-3,3 mmol / l (0,15-0, 20 g / l). Con le malattie del fegato, il contenuto di azoto residuo nel sangue aumenta leggermente - fino a 35,4-64,3 mmol / l (0,50 -; 0,90 g / l). L'aumento del suo livello al di sopra di 71,4 mmol / l (1,0 g / l) viene osservato con danno renale e peggiora significativamente la prognosi della malattia.
L'azoto residuo nel sangue viene determinato con diversi metodi - dopo la mineralizzazione del sangue per reazione diretta con il reagente di Nessler o con il metodo di ipobromite Rappoport-Eichgorn. L'urea nel sangue è determinata anche da diversi metodi: il metodo espresso si basa sull'uso di carta reattiva "Ureatest", il metodo dell'ureasi con fenolo ipocloruro, il metodo dell'ureasi con il reagente di Nessler, ecc.
Il fegato e l'emostasi sono strettamente correlati. Nel fegato, vengono sintetizzate le proteine coinvolte nella coagulazione del sangue. I più importanti di questi sono la protrombina e il fibrinogeno e le violazioni della sintesi di queste proteine sono più comuni. Va notato che nelle malattie infiammatorie acute dei polmoni, delle articolazioni, del fegato, il contenuto di fibrinogeno nel sangue può aumentare in modo significativo. Una diminuzione del contenuto di protrombina nel sangue si nota nei pazienti con epatite acuta virale, tossica, cronica, cirrosi epatica. I segni clinici più importanti del deficit di protrombina sono le emorragie spontanee sotto la pelle, sotto le mucose, il sanguinamento della cavità orale, lo stomaco.
La sintesi di proteine che assicurano il processo di coagulazione del sangue avviene con la partecipazione della vitamina K. La vitamina K è liposolubile e penetra nel corpo insieme ai grassi. Nelle malattie del fegato dovute a disturbi della formazione della bile e dell'escrezione biliare nel corpo si verifica l'ipovitaminosi K.
La sintesi alterata dei fattori della coagulazione del sangue può essere associata con l'inibizione della funzione di formazione delle proteine del fegato. In questo caso, l'ipoprotrombinemia si verifica con una quantità sufficiente di corpo con vitamina K. Nella clinica per scopi diagnostici, la quantità di protrombina nel sangue viene esaminata prima e dopo il carico con Vikasol.
Una grande quantità di eparina è sintetizzata nel fegato e nei polmoni.
La questione della possibilità di una diatesi emorragica, associata ad un aumento della produzione di fattori anticoagulanti del sistema sanguigno nelle malattie del fegato, non è ben compresa.
L'attività dei fattori complessi della protrombina (indice di prothrombi nuovo) è studiata con il metodo di Quick (norma del 95-105%), la concentrazione di fibrinogeno nel sangue è studiata con il metodo Rutberg (la norma è 200-300 mg in 100 ml di plasma). Secondo il metodo gravimetrico unificato raccomandato da V. V. Menshikov (1987), il tasso di fibrinogeno nel sangue è 200-400 mg%, o 2-4 g / l. Il metodo per determinare i fattori della coagulazione del sangue è descritto in dettaglio nel Manuale di metodi di ricerca clinica e di laboratorio.
Test funzionali che riflettono il ruolo del fegato nel metabolismo dei pigmenti. Questa è principalmente la determinazione della bilirubina nel siero, lo studio dell'urobilina, della stercobilina, dei pigmenti biliari nelle urine. Abbiamo già menzionato lo studio del contenuto di bilirubina nella bile. Questi indicatori riflettono direttamente o indirettamente il processo di conversione della bilirubina nel fegato. Il fegato svolge un ruolo importante nel metabolismo dei pigmenti contenenti ferro: emoglobina, mioglobina, citocromo, ecc.
Lo stadio iniziale della rottura dell'emoglobina è la rottura del ponte metilico e la formazione della verdoemoglobina (verdoglobina), che contiene anche ferro e globina. In futuro, la verdoglobina perde ferro e globina, inizia il processo di dispiegamento dell'anello porfirinico e della formazione di biliverdina, con il restauro del quale si forma il principale pigmento biliare - bilirubina (bilirubina indiretta, non legata). Tale bilirubina è combinata con Ehrlich diazoreattivo dopo il trattamento con alcol o reagente caffeina, cioè dà una reazione di colore indiretta. Viene assorbito attivamente dagli epatociti e, con l'aiuto degli enzimi, le glucuroniltransferasi nell'apparato di Golgi sono collegate con una (monoglucuronide) o due molecole di acido glucuronico (diglucuronide). Il quindici per cento della bilirubina nel fegato attraverso la solfatasi transferasi con acido solforico e forma fosfosadosina fosfosolfato. Tale bilirubina reagisce rapidamente con un diazoreattivo e dà una reazione diretta.
Nelle malattie del fegato, un contenuto elevato di bilirubina nel sangue è determinato principalmente dal fatto che gli epatociti la secernono sia nella bile che nel sangue. La bilirubina si accumula nel sangue, dando una reazione diretta con una bilirubina diazoreattiva (diretta o legata). Una quantità minore contiene anche la bilirubina in caso di grave danno epatico, che dà una reazione indiretta, che è causata da una diminuzione dell'attività della cattura di bilirubina non coniugata dal sangue da parte delle cellule epatiche ed è apparentemente dovuta a una violazione del meccanismo di cattura e assorbimento della bilirubina nei gusci degli epatociti.
Quando l'ostruzione della bile o del dotto epatico comune da parte della pietra, tumore, muco viscoso, restringimento del suo lume da cicatrici (per esempio, dopo un intervento chirurgico sulle vie biliari) nei dotti biliari epatici aumenta la pressione della bile. Penetra nel sangue e nei vasi capillari linfatici. Il sangue si accumula principalmente bilirubina, che dà una reazione diretta con diazoreattivo (subepatico, o meccanica, ittero).
L'emolisi degli eritrociti è accompagnata dal rilascio di una grande quantità di emoglobina, una parte di essa viene escreta dai reni, alcuni vengono catturati dalle cellule del sistema reticoloendoteliale e convertiti in verdoglobina e bilirubina. Una parte di tale bilirubina viene coniugata con acido glucoronico nel fegato ed escreta in quantità maggiore con la bile nell'intestino. Tuttavia, una quantità significativa di bilirubina, che dà una reazione indiretta, viene trattenuta nel sangue. Tale ittero è chiamato emolitico o sovraepatico.
Con ittero ostruttivo, una piccola bile (bilirubina) entra nell'intestino o non entra affatto. Il colore delle feci dipende dai prodotti di conversione della bilirubina - stercobilina formata nell'intestino dello stercobilinogeno - un prodotto intermedio della conversione della bilirubina. Se i pigmenti della bile non entrano nell'intestino, le feci diventano chiare, bianche, acholichny. La reazione a stercobilin e urobilin in tali casi è negativa.
Nell'ittero parenchimale, i pigmenti biliari entrano nell'intestino in quantità minori del normale, poiché il contenuto di bilirubina nella bile diminuisce e la quantità di bile stessa è piccola. Tuttavia, la bilirubina che penetra nell'intestino è sufficiente per colorare le feci in un colore marrone chiaro. Una parte della stercobilina viene assorbita ed escreta dai reni, prima sotto forma di urobilinogeno e poi urobilina. Quando la bilirubina coniugata (diretta) è eccessiva nel sangue, parte di essa entra nelle urine, dove può essere rilevata dalla colofonia (con una soluzione alcolica di iodio) o da un campione con precipitazione di bilirubina da sali di bario.
Con ittero emolitico nella bile, il livello di bilirubina aumenta. Anche la sterobilina e l'urobilina si formano in eccesso: le feci e l'urina sono intensamente colorate. E nel sangue il contenuto di bilirubina non legata è aumentato, è scarsamente solubile in acqua, non penetra attraverso la barriera renale nel tessuto. Pertanto, non c'è la bilirubina nelle urine.
La bilirubina sierica è determinata dal metodo di Endrašík, Cleghorn e Grof. Questo metodo si basa su un acido solfonico diazofenil-composto (formato facendo reagire acido solfanilico con nitrito di sodio) con bilirubina sierica, formata colore viola rosato questa reazione. L'intensità della sua giudicata sulla concentrazione di bilirubina, entrando in una reazione diretta. Una volta aggiunto al siero reagente caffeina non coniugato (indiretto) della bilirubina diventa stato dissociato solubile e dà una soluzione colorante rosa-viola miscela diazoreaktiva. La tecnica è descritta nel libro di consultazione di V. G. Kolb, V. S. Kamyshnikov; Manuale ed. A. A. Pokrovsky; istruzioni metodiche ed. V. V. Menshikov e altri.
Il valore di alcuni enzimi nella diagnosi delle malattie del fegato. Gli enzimi del fegato, come altri organi, sono suddivisi in specifici organo e non specifici. Per gli enzimi epatici sono ornitinkarbamiltransferaza organospecific, glutammato, fosfofruktoaldolaza, gistidaza, sorbitolo deidrogenasi. Inoltre, il quinto isoenzima lattato deidrogenasi è considerato specifico.
Le cellule epatiche sono ricche di enzimi. Il danno agli epatociti porta al rilascio di una quantità significativa di enzimi intracellulari e al loro accumulo nel sangue. A questo proposito, le transaminasi, le aldolasi e gli enzimi trovati nelle cellule di altri organi e tessuti hanno acquisito valore diagnostico. Valutare la loro attività nel sangue dovrebbe essere confrontato con i segni clinici della malattia.
Aldolase - nome del gruppo degli enzimi coinvolti nei meccanismi di scissione aerobica dei carboidrati. aldolasi siero catalizza la scissione del rovescio fruttosio 1,6-bisfosfato in due phosphotriose - phosphoglyceraldehyde e diidrossiacetone monofosfato. L'attività di aldolasi nel siero è aumentata nell'epatite epidemica acuta e, in misura minore, nell'epatite tossica acuta. Nell'epatite virale acuta, nel 90% dei pazienti si osserva un aumento di 5-20 volte dell'attività di fruttosio difosfato aldolasi. Il suo aumento si verifica 3-15 giorni prima della comparsa di altri segni clinici della malattia. Dopo 5 giorni dall'inizio del periodo ittero, l'attività dell'aldolasi diminuisce. Un aumento dell'attività di aldolasi è anche notato nel caso di forme anterteri di epatite acuta. Nei pazienti con processi infiammatori cronici nel fegato, l'attività dell'aldolasi aumenta leggermente, e in un piccolo numero di essi.
Lo studio dell'attività di aldolase nel siero viene effettuato secondo il metodo di V.I. Tovarnitsky, E.N. Voluyskaya. Nelle persone sane, l'attività di questo enzima non supera 3-8 unità.
Le aminotransferasi (transaminasi) sono spesso utilizzate per diagnosticare malattie infiammatorie del fegato. Le aminotransferasi nel corpo umano eseguono processi di transaminazione (trasferimento inverso di gruppi amminici di aminoacidi a chetoacidi). Lo studio dell'attività dell'aspartato aminotransferasi (AST) e dell'alanina aminotransferasi (ALT) è della massima importanza. Questi enzimi sono ampiamente distribuiti in vari organi e tessuti -. Fegato, miocardio, muscolo scheletrico, reni e altri indicatori di maggiore attività delle aminotransferasi acquista valore diagnostico rispetto ai segni clinici della malattia.
Lo studio è condotto secondo il metodo di Reitman e Fraenkel. La norma per AST è 0,1-0,45 mmol / (h • l) (8-40 unità), per AlT è 0,1-0,68 mmol / (h • l) (5-30 unità). Attualmente, la quantità di substrato in moli catalizzata da 1 l del liquido di prova per 1 ora di incubazione a 37 ° C (mmol / (h • l)) viene presa come unità di attività enzimatica.Le unità di attività enzimatica prelevate in precedenza vengono convertite in quelle indicate utilizzando le seguenti formule: per AsT - D / 88, per AlT - D2 / 88, dove D è un indicatore di attività enzimatica, espresso nella vecchia dimensione (unità), 88 è un fattore di conversione, numericamente uguale al peso molecolare dell'acido piruvico.
Nell'epatite epidemica, l'attività delle aminotransferasi aumenta con grande coerenza e nelle prime fasi, ancor prima della comparsa di ittero. Con epatite tossica e un'esacerbazione dell'attività cronica di aminotransferases aumenta di 3-5 volte. I cambiamenti nella cirrosi epatica non sono così regolari.
La lattato deidrogenasi (LDH) è un enzima glicolitico che catalizza in modo reversibile l'ossidazione di 1-lattato in acido piruvico. Per LDH, la nicotinammide dinucleotide è richiesta come accettore intermedio di idrogeno. Cinque isoenzimi LDH sono stati rilevati nel siero. LDH, trovato nel miocardio, LDH5 - nel fegato. La quinta frazione dell'enzima è inibita dall'urea e questa proprietà dell'enzima facilita la sua determinazione.
Il siero LDH è determinato dal metodo Sevel e Tovarek. I valori normali di attività LDH sierica totale sono 0,8-4,0 mmol di acido piruvico per litro di siero per 1 ora di incubazione a 37 ° C. Urea-LDH rappresenta il 54-75% del totale LDH.
Viene anche utilizzato nei laboratori clinici per la determinazione di LDH mediante il metodo di elettroforesi del siero di sangue in gel di poliacrilammide. Il metodo per determinare LDH può essere trovato nel libro di consultazione di V. G. Kolb, V. S. Kamyshnikov. Nell'epatite virale, l'attività di LDH4 e LDH5 è aumentata nei primi 10 giorni in tutti i pazienti, il grado del suo aumento dipende dalla gravità della malattia.
Le colinesterasi sono contenute negli eritrociti (acetilcolinesterasi) e nel siero (acilidrolasi acilcolina). Entrambi gli enzimi scindono gli esteri della colina in colina e gli acidi corrispondenti e si distinguono per la loro specificità. L'acetilcolinesterasi idrolizza solo l'acetilcolina (precedentemente chiamata colinesterasi vera). La colinesterasi sierica è in grado di degradarsi insieme all'acetilcolina e alla butirrilcolina (e 2 volte più velocemente dell'acetilcolina). Pertanto, è anche noto come butirrilcolinesterasi, o falsa colinesterasi sierica. È sintetizzato nel fegato, la sua attività è usata come segno dell'abilità funzionale del fegato.
L'attività della colinesterasi sierica è determinata dal grado di idrolisi del cloruro di acetilcolina in acido acetico e colina. La quantità di acido acetico rilasciata è determinata dal cambiamento di colore della soluzione tampone in presenza di un indicatore di acidità sulla FEC. Lo standard è 160-340 mmol / (h • l). In caso di malattie del fegato (epatite, cirrosi), la sintesi della colinesterasi sierica diminuisce. Nei pazienti con ittero ostruttivo, una diminuzione dell'attività della colinesterasi si verifica solo quando compaiono segni di grave danno epatico. Una diminuzione della sua attività si osserva in ipoproteinemia, cachessia, avvelenamento da veleni organofosfati, rilassanti muscolari. In alcuni casi (ipertensione, fibromi uterini, ulcera peptica, ecc.) Si osserva un aumento dell'attività della colinesterasi.
Gammaglutammiltransferasi (G-GTR) scinde il substrato cromogenico gamma-glutamil-4-nitronilida e facilita il trasferimento del gamma glyutamilovogo residuo dipeptide sul glicilglicina accettore. La 4-nitroanilina liberata è determinata mediante il metodo calorimetrico fotografico a 410 nm dopo l'interruzione della reazione enzimatica con acido acetico.
GGTG si trova in tutti gli organi e tessuti umani. L'attività di questo enzima nei reni, fegato, pancreas, milza, cervello è la più alta (circa 220 mmol / h • l), in altri organi (cuore, muscoli scheletrici, polmoni, intestino) - molto più bassa (0,1 -18 mmol / (h • l).La più alta attività G-GTP è osservata nella bile e nelle urine.La sua attività sierica è 4-6 volte inferiore a quella nelle urine.Nel globulo rosso questo enzima è assente Attività G-GTP nel siero di uomini sani è 0.9-6.3 mmol / (h • l), per le donne - 0.6-3.96 mmol / (h • l). L'attività G-GTP è aumentata nella cirrosi epatica nel 90% dei pazienti con Governative, epatite cronica - 75% in colangioepatite cronica -. Quasi tutti i pazienti enzima attivato etanolo Determinazione T-GTP è un test sensibile nella diagnosi delle malattie epatiche alcool tossico..
La fosfatasi alcalina è una delle idrolasi che fermentano composti organici, esteri fosforici con l'eliminazione dei suoi residui. È attivo in un terreno con un pH di 8.6-10.1 ed è fortemente attivato sotto l'influenza degli ioni di magnesio. La fosfatasi alcalina si trova in tutti i tessuti e gli organi umani. Soprattutto un sacco di tessuto osseo, parenchima epatico, reni, ghiandole prostatiche, altre ghiandole, mucosa intestinale. Il contenuto di fosfatasi alcalina nei bambini è 1,5-3 volte superiore rispetto agli adulti.
In un gel di agar è stata utilizzata l'elettroforesi per isolare cinque isoenzimi di fosfatasi alcalina. Il primo di questi è considerato specifico per il fegato, il secondo per il tessuto osseo, il quinto per il tratto biliare. L'enzima è secreto dal fegato con la bile.
L'attività della fosfatasi alcalina viene rilevata usando il beta-glicerofosfato di sodio, che subisce l'idrolisi con il rilascio di fosforo inorganico. Quest'ultimo è un criterio di attività enzimatica. L'enzima è determinato nel siero secondo il metodo Bodansky. Normalmente, l'attività della fosfatasi alcalina è 0,5-1,3 mmol di fosforo inorganico per 1 litro di siero per 1 ora di incubazione a 37 ° C.
Un aumento dell'attività della fosfatasi alcalina si verifica principalmente in due stati: malattie ossee con proliferazione degli osteoblasti e malattie che coinvolgono la colestasi. Un'aumentata attività della fosfatasi alcalina è stata osservata nelle seguenti patologie ossee: iperparatiroidismo (malattia di Recklinghausen), sarcoma osseo, osteosi deformativa o osteodistrofia fibrosa (morbo di Paget) e altre forme di osteoporosi. pietra, tumore, linfonodi nel cancro delle vie biliari, dello stomaco, nelle persone con malattie infiammatorie del fegato e delle vie biliari, pancreas, linfogranulomatosi, ecc. Morì costante aumento dell'attività della fosfatasi alcalina osservata nei tumori del fegato, epatite cronica e cirrosi, epatite acuta, ittero sia senza e con ittero. L'attività enzimatica aumenta se la componente meccanica dell'ittero si unisce (colangite, compressione del dotto epatico comune da linfonodi regionali, nodi del fegato rigenerante nell'area delle sue porte). Pertanto, un aumento dell'attività della fosfatasi alcalina nel sangue di pazienti con ittero indica la sua natura meccanica.
Test di funzionalità epatica
Con la sconfitta del fegato non tutte le sue funzioni sono disturbate, non allo stesso tempo e non allo stesso modo. Inoltre, il fegato ha notevoli capacità di riserva: abbastanza da risparmiare il 20% del funzionamento del parenchima epatico per mantenere l'attività fisica. La capacità rigenerativa del fegato è altrettanto grande. Pertanto, una certa diminuzione della funzionalità del fegato potrebbe non influire sulle condizioni del paziente, poiché il fegato, anche in queste condizioni, fornisce il livello necessario di processi vitali.
L'essenza della maggior parte dei test funzionali (non solo il fegato, ma anche altri organi) è che l'organo di prova è fatto in modo così esigente che l'organo malato non può affrontarli (il metodo di carico). Tra i campioni con cui vengono esaminate le funzioni epatiche, alcuni riflettono l'attività specifica di questo organo, ad esempio le funzioni di pigmentazione, neutralizzazione e formazione delle proteine; altri campioni rivelano solo parzialmente la funzione del fegato, poiché la sua partecipazione a questo tipo di metabolismo non è isolata, ma è connessa al ruolo di altri organi. Questi includono, ad esempio, campioni che esaminano il metabolismo di carboidrati, acqua, grassi.
Fig. 117. Schema di isolamento della bilirubina nella norma (/) e in vari tipi di ittero: emolitico (2), parenchimale (J) e meccanico <4).
Lo studio del metabolismo dei pigmenti Il riflesso del metabolismo dei pigmenti nel fegato è il contenuto nel sangue (nonché nelle feci e nelle urine) della bilirubina e dei prodotti del suo recupero. L'identificazione dei disturbi del metabolismo dei pigmenti dà un'idea dello stato funzionale degli epatociti e aiuta anche a distinguere tra diversi tipi di ittero.
La formazione di bilirubina si verifica nelle cellule reticoloendoteliali del midollo osseo, nei linfonodi, ma principalmente nella milza, nonché nelle cellule reticoloendoteliali stellate del fegato (Figura 117). La bilirubina è formata dall'emoglobina, che viene rilasciata durante la disgregazione fisiologica dei globuli rossi; allo stesso tempo, l'emoglobina si scompone nel corpo proteico di globina ed eme contenente ferro. Nelle cellule del sistema reticoloendoteliale, la bilirubina libera è formata dall'eme emesso, che circola nel sangue in una relazione instabile con la proteina albumina. Il contenuto di bilirubina libera nel sangue è 8,55-20,52 μmol / l (0,5-1,2 mg%). La maggior parte di esso entra nel fegato, dove viene rilasciata dalla sua associazione all'albumina e, con la partecipazione di enzimi epatici, si combina con l'acido glucuronico per formare un composto idrosolubile, bily-rubinglucuronide (mono- e diglucuronide, o bilirubina legata), che viene escreto nel tratto biliare.
Di conseguenza, il fegato è coinvolto nello scambio di bilirubina, svolgendo le seguenti funzioni: 1) la formazione di bilirubina nelle cellule reticoloendoteliali stellate; 2) intrappolare la bilirubina libera dal sangue; 3) formazione di un composto di bilirubina con acido glucuronico; 4) la secrezione di glucuronide bilirubina nella bile (bilirubina legata).
All'inizio del XX secolo. Van den Berg notato una diversa interazione di siero di pazienti con ittero con sulfodiazoreaktivom con ittero di varie eziologie. Mentre il siero di un paziente con ittero ostruttivo è diventato immediatamente rosso dopo l'aggiunta dell'agente diazoreattivo, questo cambiamento nel colore del siero del paziente con ittero emolitico si è verificato solo dopo l'aggiunta di alcol ad esso. La reazione nel primo caso è stata chiamata diretta, nella seconda - indiretta. Si è scoperto che una reazione indiretta è data dalla bilirubina libera e una reazione diretta da bilirubing glucuronid (coniugato, cioè bilirubina legata). A seconda dell'aggiunta di una o due molecole di acido glucuronico alla molecola di bilirubina, si forma la bilirubina mono- o diglucuronide.
Nel sangue delle persone sane è solo il pigmento libero. Nelle malattie che sono accompagnate da una violazione o distorsione della normale scarica della bilirubina associata alla bile, essa entra nel flusso sanguigno e quindi entrambi i pigmenti circolano in esso (possono essere determinati separatamente).
Un campione qualitativo di Van den Berg fornisce informazioni indicative: se risulta essere indiretto, possiamo supporre che nel sangue sia presente solo bilirubina libera; se risulta essere diretto, non è noto in quale rapporto siano entrambi i pigmenti - una reazione diretta positiva maschera la presenza di qualsiasi quantità di bilirubina libera. Al momento, utilizzano principalmente la determinazione quantitativa separata delle frazioni di bilirubina. Nella maggior parte degli studi effettuati a questo scopo, vengono utilizzati gli stessi reagenti diazoici del campione qualitativo (diazo reattivo I: 5 g di acido sulfanilico e 15 ml di acido cloridrico forte vengono sciolti in acqua distillata e il volume viene regolato a 1 l con acqua distillata; Soluzione allo 0,5% di nitrito di sodio, miscela diazoica: 10 ml di diazoreattivo I + 0,25 ml di diazoreattivo II).
Test qualitativo: a 0,5 ml di siero versato 0,25 ml di miscela diazoica. In caso di arrossamento sierico in meno di 1 minuto, la reazione è considerata rapida diretta e indica la presenza di bilirubina legata al siero. Se il rossore si verifica lentamente (entro 1-10 minuti), che si verifica quando una quantità relativamente piccola di bilirubina legata viene fissata al libero, la reazione viene considerata come ritardata diretta. Se non c'è rossore per più di 10 minuti, la reazione diretta è considerata negativa. Se si vuole assicurarsi che il colore giallo di tale siero dipenda dalla bilirubina, si aggiunge il doppio della quantità di alcol, si filtra e si aggiunge la miscela diazoica al filtrato, in conseguenza del quale il liquido diventa rosa (reazione indiretta). Esistono molti metodi per la determinazione quantitativa delle frazioni di bilirubina. Alcuni di questi si basano sul fatto che la bilirubina libera è influenzata da sostanze come la caffeina, che è usata nel metodo più comune di Endrashik, alcool metilico, ecc., Agendo come un catalizzatore, un acceleratore, acquisisce la capacità di reagire con il diazoreattante. Nella prima parte del siero trattato con l'acceleratore, è possibile determinare il contenuto totale di entrambe le frazioni. In un'altra parte, senza aggiungere un acceleratore, viene determinato solo il pigmento legato. Sottraendo la sua frazione legata dalla quantità totale di bilirubina, riconosceranno la frazione libera. Altri metodi per la determinazione separata delle frazioni di bilirubina (chimica, cromatografica) sono più complessi.
La bilirubina libera, insolubile in acqua, non viene escreta dai reni; dopo il legame con l'acido glucuronico, diventa idrosolubile quando si accumula nel sangue - con ittero subepatico ed epatico, viene rilevato nelle urine. Nelle vie biliari viene rilasciata solo bilirubina legata (bilirubinglucuronide). Nei grandi dotti biliari e cistifellea (soprattutto durante i processi infiammatori in essi) e ulteriormente nell'intestino, una piccola parte della bilirubina viene ripristinata all'urobilinogeno, che viene riassorbito nell'intestino tenue superiore ed entra nel fegato con il sangue della vena porta. Un fegato sano lo cattura completamente e si ossida, ma l'organo malato non è in grado di svolgere questa funzione, l'urobilinogeno passa nel sangue ed è escreto nelle urine come urobilina. Urobilinuria è un segno molto sottile e precoce di insufficienza epatica funzionale. Il resto, la maggior parte della bilirubina nell'intestino viene ripristinata fino allo stercobilinogeno. La parte principale di esso viene escreta nelle feci, trasformandosi nel retto e fuori da esso (nella luce e nell'aria) in stercobilina, dando alle feci il suo colore normale. Una piccola parte di sterkobilinogen, assorbito nelle parti inferiori del colon, attraverso le vene emorroidali, bypassando il fegato, entra nella circolazione generale ed è espulso dai reni. L'urina normale contiene sempre tracce di stercobilinogeno, che sotto l'azione della luce e dell'aria si trasforma in sterkobilin.
La maggior parte delle reazioni che rilevano i prodotti di riduzione della bilirubina nelle urine danno risultati simili sia con l'urobilina che con la stercobilina, sebbene queste due sostanze differiscano sia nella struttura chimica che nelle proprietà fisiche. I metodi per la loro separazione sono relativamente complessi. Pertanto, nella pratica di laboratorio, vengono aperti insieme e designati come urobilinoidi (corpi dell'urobilina).
Il contenuto dei corpi urobilinici nelle urine aumenta non solo quando la funzionalità epatica è insufficiente, ma anche quando aumenta l'emolisi. In questi casi, a causa del rilascio di una quantità significativa di emoglobina, viene formata più bilirubina e secreta nell'intestino. L'aumento della produzione di sterko-bilina porta ad un aumento dell'escrezione nelle urine. Nel caso di ittero ostruttivo, quando la bile non entra affatto nell'intestino, non c'è sterkobilina nelle feci, non c'è urobilin nelle urine. Quando l'ittero epatocellulare diminuisce l'escrezione di bilirubina nella bile e la quantità di stercobilina nelle feci diminuisce e aumenta il numero di corpi urobilinici nelle urine. Il loro rapporto, pari a 10: 1-20: 1, è significativamente ridotto, raggiungendo 1: 1 per gravi lesioni epatiche.In ittero emolitico, l'aumento di stercobilina nelle feci supera significativamente l'aumento dell'escrezione urinaria dei corpi urobilinici. Il loro rapporto aumenta a 300: 1-500: 1. Il rapporto tra i prodotti di recupero della bilirubina nelle feci e nelle urine è molto più significativo nel differenziare gli itteri rispetto al valore assoluto di ciascuno di essi.
Lo studio del metabolismo dei carboidrati. Nelle cellule del fegato con la partecipazione di sistemi enzimatici avviene la sintesi del glicogeno, la sua deposizione e la glicogenolisi, oltre alla glicogenesi. Mantenere il livello di glucosio nel sangue è previsto, oltre al fegato, l'attività di altri organi e sistemi -. Pancreas, ipofisi-surrene, ecc In questo contesto il contenuto del digiuno modifiche glicemia solo sotto danno epatico estremamente grave, e identificare la mancanza della sua partecipazione carboidrati lo scambio è possibile solo con l'aiuto di campioni funzionali.
Il test del carico di glucosio è inefficace, poiché il contenuto di quest'ultimo nel sangue, oltre agli organi già menzionati, è anche influenzato dallo stato del sistema nervoso vegetativo, dalle riserve di glicogeno nel fegato e dai muscoli, ecc.
Il test con carico di galattosio ha un valore noto (il galattosio non viene assorbito da alcun tessuto e organo, eccetto il fegato, e gli ormoni non ne influenzano il contenuto nel sangue). Il paziente può bere una soluzione di 40 g di galattosio in 200 ml di acqua e determinare la sua escrezione nelle urine. Normalmente, si svolge per non più di 4 ore e non più di 3 anni sulla selezione di galattosio nelle urine possono influenzare la funzione renale e la capacità di assorbimento intestinale, quindi è più significativo è la determinazione del contenuto di galattosio nel sangue. Con una buona funzionalità epatica, l'aumento massimo del contenuto di galattosio nel sangue si osserva dopo 30-60 minuti e non supera il 15% del livello iniziale; quest'ultimo è raggiunto di nuovo da 2 ore Con scarsa funzionalità epatica, l'innalzamento del livello di galattosio è più alto, la diminuzione del livello di galattosio nel sangue avviene più lentamente.
Lo studio del metabolismo delle proteine Il ruolo del fegato nel metabolismo delle proteine è molto alto: le proteine sono sintetizzate e depositate in esso, gli amminoacidi, i polipeptidi alimentari ei prodotti di decomposizione delle proteine del tessuto entrano nel flusso sanguigno.
Qui vengono catabolizzati, neutralizzando e rimuovendo i prodotti di decomposizione inutilizzati. Alcuni amminoacidi subiscono deaminazione e transaminazione. L'ammoniaca liberata viene trasformata dal fegato in un'urea meno tossica: degli amminoacidi portati dall'esterno e sintetizzati dal fegato, costruisce di nuovo le proprie proteine tissutali, così come le proteine del sangue; albumina, globuline (a e p, in una certa misura, y), fibrinogeno, protrombina, eparina, alcuni enzimi. Nel fegato si formano composti di proteine con lipidi (lipoproteine) e carboidrati (glicoproteine).
La violazione della funzione di formazione delle proteine del fegato viene rilevata esaminando le proteine del plasma sanguigno o del siero. Questa violazione colpisce non tanto la quantità totale di proteine, quanto il rapporto delle loro frazioni, il cui cambiamento - disproteinemia - è osservato nella maggior parte delle lesioni epatiche.
su carta metodo elettroforesi più diffuso attualmente in pratica clinica, basata sul fatto che in un campo elettrico proteine diverse, a seconda delle dimensioni, forma della molecola, la sua carica, e altri fattori stanno muovendo a velocità diverse verso l'elettrodo positivo. Durante l'elettroforesi su carta, diverse frazioni proteiche sono concentrate in diverse parti della striscia di carta, dove possono essere identificate mediante colorazione appropriata. La dimensione delle frazioni è determinata dall'intensità del colore di ciascuna di esse. Le proteine del plasma sono divise in cinque frazioni principali: l'albumina; a, -, e2-, (5-, così come le y-globuline (Tabella 4) L'elettroforesi su altri terreni (agar, gel di amido, ecc.) Consente di dividere le proteine in un numero maggiore di frazioni.
Nelle malattie del fegato, la diminuzione del rapporto albumina-globulina (A / G) è più comune, principalmente a causa di una diminuzione
Tabella 4. Proteicolo normale
Salute, medicina, stile di vita sano
Test di funzionalità epatica quantitativa
Le malattie croniche del fegato sono caratterizzate dalla presenza di un lungo periodo di latenza con sintomi clinici minimi non specifici (stadio di compensazione). Nella fase terminale della malattia si sviluppano ascite, ittero, encefalopatia e precoma (stadio di decompensazione). Il livello di albumina e protrombina nel siero consente di valutare la funzione sintetica del fegato, che nella maggior parte dei casi rimane normale per un lungo periodo. Uno studio quantitativo della funzionalità epatica nelle prime fasi della dinamica consente di monitorare l'efficacia del trattamento e giudicare la prognosi, ma non ha valore diagnostico.
Carica galattosio test
Il galattosio è una sostanza innocua. Può essere somministrato per via endovenosa a una dose sufficiente a saturare il sistema enzimatico responsabile della sua eliminazione. Il tasso di eliminazione del galattosio dipende dalla sua fosforilazione da galacto chinasi. In questo caso, è necessario prendere in considerazione la parte della dose somministrata che viene eliminata dalla via extraepatica. Questo test riflette abbastanza accuratamente la funzione delle cellule epatiche, ma richiede una determinazione ripetuta del livello di galattosio per 2 ore.
Tablitsa2-2. Test di funzionalità epatica quantitativa
Microsomi (sistema citocromo P450)
Glicoproteina con un residuo terminale di galattosio
* A basse dosi, consente di valutare il flusso ematico epatico.
Test respiratori
L'aminopirina viene trasformata mediante N-demetilazione dal citocromo P450 (situato nella frazione microsomiale degli epatociti) in anidride carbonica. Questa sostanza nelle sue proprietà soddisfa i requisiti per i test respiratori nello studio della funzione epatica. L'aminopirina è etichettata con un isotopo radioattivo 14 C e somministrata per via orale. I campioni di aria espirata vengono raccolti a intervalli di due ore. Concentrazione 14 C in CO esalato2 correlato con il tasso di diminuzione della radioattività plasmatica. Il campione riflette la massa rimanente di microsomi funzionanti e tessuto epatico vitale. I risultati ottenuti in esperimenti su ratti con un modello di cirrosi epatica, suggeriscono che una diminuzione della N-demetilazione si verifica a causa della perdita di una massa funzionante di epatociti; allo stesso tempo, l'attività funzionale per epatocita rimane invariata. Lo studio ha un valore prognostico e consente di monitorare l'efficacia del trattamento (il suo ruolo nella diagnosi è piccolo). Il test di aminopirina può essere utilizzato per studiare l'effetto dei farmaci sulla funzione degli enzimi microsomiali epatici.
Etichettato con 14 Con caffeina e fenacetina si può anche usare quando si eseguono i test respiratori. Un campione con un carico di 14 C-galattosio consente la valutazione degli enzimi localizzati nel citosol. Tutti i test respiratori sono complessi e costosi, quindi è improbabile che saranno ampiamente utilizzati in futuro.
Rimozione della caffeina dalle ghiandole salivari
La caffeina (1,3,7-trimetilxantina) è quasi completamente metabolizzata dalla N-demetilazione nel sistema microsomiale del fegato (citocromo P448). Le metilxantine sono escrete nelle urine. Il livello di caffeina nelle ghiandole sierica e nelle ghiandole salivari può essere studiato mediante saggio immunoenzimatico. Il tasso di escrezione della caffeina con la saliva durante la notte si correla bene con la sua clearance, così come con i risultati del test respiratorio con aminopirina. Lo studio dell'escrezione della caffeina da parte delle ghiandole salivari è un modo semplice per valutare la disfunzione epatica. Vari fattori possono influire sulla clearance della caffeina: il fumo accelera il metabolismo della caffeina inducendo enzimi, alcuni farmaci, come la cimetidina, inibiscono il collasso della caffeina; la clearance della caffeina diminuisce con l'età. Con la determinazione ripetuta della clearance della caffeina nello stesso paziente, la dose di caffeina deve essere la stessa, poiché la sua clearance dipende dalla dose.
Prova con lidocaina
La lidocaina è metabolizzata dalla N-deetilazione ossidativa dal citocromo P450; allo stesso tempo, si forma il monoetilglicene-cenexiliduro (MEGE), il cui livello è correlato con il tasso di clearance della lidocaina. La determinazione della concentrazione sierica di MEGE dopo somministrazione endovenosa di lidocaina consente di quantificare la funzionalità epatica. La concentrazione di MEGE è soggetta a fluttuazioni significative nelle persone con un fegato sano e in pazienti con una lieve violazione della sua funzione. Una diminuzione significativa di questo indicatore si osserva nella cirrosi epatica e il grado di declino è correlato alla prognosi della malattia. Quando si effettua una diagnosi differenziale tra cirrosi e danno epatico minore, lo studio sull'eliminazione del galattosio e sul test respiratorio con aminopirina è più informativo.
Metti alla prova con l'antipirina
L'antipirina ha una lunga emivita, che nei pazienti con grave danno epatico può superare le 30 ore, quindi i campioni di sangue e di saliva per la ricerca devono essere presi per un lungo periodo, il che limita l'uso di questo campione a fini diagnostici.
Determinazione dei recettori asialoglicoproteici
Gli epatociti deducono le asialoglicoproteine (con residuo galattosio terminale) dal letto vascolare a causa della presenza di specifici recettori sulla membrana sinusoidale degli epatociti. Quando le lesioni del parenchima epatico, il numero di questi recettori diminuisce. Su di essa viene giudicata dal grado di cattura fegato 99m Tc marcato galaktozilneoglikalbumina (asialoglicoproteine analogico), come determinato utilizzando una camera a scintillazione serie con un solo campioni di sangue studio. I risultati dello studio sono in correlazione con la gravità della malattia (determinata dal sistema dei criteri del bambino), i risultati di un test respiratorio con aminopirina e clearance indocianina. La concentrazione media dei recettori nella fase terminale della cirrosi è di 0,35 ± 0,07 μmol / L rispetto a 0,83 ± 0,06 μmol / L nel gruppo di controllo [9]. Risultati simili si ottengono usando albumina umana marcata con 99m di Tc-dietilentriam e npenta-acetato galattosile [5]. Il numero di recettori diminuisce con l'epatite acuta e aumenta nuovamente durante il periodo di recupero [12]. Nonostante i risultati promettenti, questa ricerca viene effettuata solo in casi speciali.
Capacità escretoria del fegato (test di bromsulfaleina)
Il vecchio metodo di studiare il tasso di eliminazione di BS per via endovenosa dal letto vascolare consente di valutare l'assorbimento e la capacità escretoria degli epatociti. Questo metodo non è stato applicato in clinica a causa della sua complessità, costi elevati e possibili complicazioni [4].