Epatite B PCR

La disponibilità di moderni farmaci antiepatite B (HBV) con chiare indicazioni per la loro somministrazione richiede una verifica accurata e rapida della diagnosi. Tuttavia, a causa di scarsi dati clinici nelle prime settimane della malattia e di metodi di analisi immunologici limitati, il tasso di diagnosi diminuisce.

La presenza di marker anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe consente di confermare l'HBV o stabilire il fatto di una precedente malattia. Ma è possibile determinare la presenza di particelle virali attive nel sangue e contare il loro numero al momento dello studio mediante PCR - un test quantitativo in tempo reale per la rilevazione dell'epatite B. Il metodo, rispetto ai metodi diagnostici ELISA, risolve i problemi diagnostici e consente di predire il decorso della malattia durante la ricezione farmaci antivirali.

Nozioni di base sulla diagnosi della malattia

La diagnosi di epatite B si basa sulla valutazione delle manifestazioni cliniche, del saggio immunoenzimatico e dei metodi strumentali di ricerca. La malattia si verifica nella fase acuta dopo il periodo di incubazione e, a seconda della dose di infezione e dell'efficacia del trattamento, entra in uno stadio cronico. L'obiettivo principale del trattamento è quello di prevenire la cronizzazione, cioè l'eliminazione di tutte le particelle virali dal sangue. Il decorso clinico della malattia è una cura senza successiva viremia.

Il fatto di eliminare l'infezione deve essere dimostrato da un metodo quantitativo di ricerca.

Poiché qualsiasi test immunoenzimatico qualitativo rende possibile la diagnosi indiretta dell'HBV, cioè non mostra la presenza dell'agente patogeno nell'ambiente interno del corpo, ma caratterizza la risposta immunitaria all'infezione, monitorando l'efficacia della terapia e il fatto di curare diventa difficile da dimostrare. Pertanto, il paziente con epatite B o con la presenza di criteri diagnostici a suo favore deve essere effettuato la reazione a catena della polimerasi al fine di quantificare il numero di particelle virali nel sangue. Il tasso diagnostico è la mancanza di copie del DNA dell'infezione.

Descrizione del metodo diagnostico

Il metodo altamente sensibile della diagnosi di PCR dell'epatite B appartiene alla categoria degli studi biologici molecolari ingegnerizzati geneticamente. Attraverso esso è determinato dalla quantità di DNA virale nel materiale biologico del paziente e il tasso ammissibile. In base ai risultati ottenuti, viene stabilito il numero di particelle virali per unità di volume. Il materiale per il test diagnostico è il sangue venoso del paziente. Un'assunzione è desiderabile a stomaco vuoto a causa del possibile effetto del siero chilo sul risultato dello studio.

I risultati ottenuti devono essere forniti al medico per l'interpretazione e la determinazione di ulteriori tattiche. La decodifica indipendente non rappresenta un valore diagnostico.

Il significato del risultato del numero di particelle virali ottenuto con il metodo PCR supera il valore dei saggi immunologici enzimatici. Poiché l'analisi in modalità in tempo reale mostra la presenza dell'agente causativo della malattia nel sangue, il suo contenuto informativo è superiore ad altri. Se il test ELISA indica solo la presenza di anticorpi, osservati da 4 settimane del periodo di incubazione e che durano più di 8 settimane dopo l'eliminazione del virus dal sangue, la reazione a catena della polimerasi conferma chiaramente il decorso attivo della malattia o la sua cura, caratterizza la dinamica della terapia prescritta.

La reazione a catena della polimerasi con determinazione quantitativa delle particelle patogene risolve le domande diagnostiche a favore dell'arresto del trattamento a causa del recupero o della terapia continua a causa della sua mancanza di efficacia. Il metodo è il più specifico possibile per il virus HBV e si distingue per un errore accettabile.

Indicazioni e obiettivi di prestazione

L'analisi quantitativa dell'epatite B è la più affidabile e consente di confermare i dati ottenuti con i metodi ELISA. Viene nominato quando:

  1. ottenere un risultato diagnostico positivo di ELISA;
  2. trattare un paziente con una diagnosi accertata di danno epatico virale;
  3. nella diagnosi di epatite mista eziologia;
  4. se necessario, determinare la carica virale in un paziente.

Poiché il metodo del saggio immunologico enzimatico è usato più ampiamente nella pratica di uno specialista di malattie infettive, alcuni pazienti con malattia lieve possono essere trattati senza dover contare la carica virale. Ma la PCR è generalmente considerata il "gold standard" della diagnostica in epatologia, poiché, a causa dell'unicità del suo risultato, rimuove una serie di problemi organizzativi. Pertanto, la direzione del paziente per l'analisi quantitativa ha i seguenti obiettivi:

  • ottenere dati sul numero di particelle virali nel sangue del paziente;
  • conferma del decorso acuto dell'epatite e verifica tempestiva della malattia cronica;
  • rilevamento costante di portatori di virus latenti con test ELISA positivi, monitoraggio della loro viremia;
  • decidere la nomina di un trattamento antivirale, la sua combinazione e la risoluzione.

L'obiettivo più significativo di applicare un test quantitativo di PCR per rilevare l'HBV è identificare possibili combinazioni di trattamento. In caso di elevata carica virale, il risultato dell'analisi offre allo specialista l'opportunità di procedere con la combinazione di farmaci. Durante la terapia, è facile determinare l'efficacia del trattamento farmacologico prescritto in base al risultato della PCR. Guidato solo dai dati dei metodi di immunodosaggio, è impossibile determinare tempestivamente il fatto del trattamento e la sua efficacia attuale. Pertanto, un test quantitativo in tempo reale è un'analisi necessaria prima di iniziare il trattamento per l'epatite acuta, l'infezione da virus latente con alta viremia e HBV cronica.

Interpretazione dei risultati quantitativi della prova PCR

L'interpretazione dei risultati del test quantitativo della PCR deve essere eseguita dal medico curante del paziente. È necessario valutare l'indicatore diagnostico e determinare le tattiche terapeutiche.

Un analizzatore standard è in grado di produrre un indicatore quantitativo che rifletta il numero di copie del DNA virale presente nel sangue venoso studiato. Unità di misura: copie / ml, UI / ml (copie per millilitro, unità internazionali per millilitro). L'interpretazione dei risultati è riportata nella tabella con l'indicazione delle diverse unità di misura.

L'essenza dell'analisi della PCR per l'epatite B e i suoi risultati

L'epatite B virale viene trattata con successo se viene rilevata nel tempo e il numero di anticorpi e antigeni nel sangue del paziente è correttamente determinato. Con l'aiuto di un saggio immunoenzimatico per l'epatite, è possibile rilevare la presenza di marcatori virali, ma non è possibile determinare lo stadio esatto del processo.

Per la valutazione quantitativa è stata utilizzata la diagnostica PCR. Utilizzando il test, è possibile contare il numero di marker, prevedere il decorso della malattia e la probabilità di cura con l'aiuto di farmaci antivirali.

Il vantaggio principale dello studio è la capacità di rilevare anche concentrazioni minime del virus, per identificare l'agente patogeno nella fase di specie.

Diagnosi di epatite B

Il virus dell'epatite B è altamente contagioso e resistente alle influenze esterne. Rimane attivo nel sangue di un paziente per diverse settimane. Pertanto, ogni persona è a rischio di infezione, anche se si osserva la profilassi.

Per diagnosticare la malattia si prescrivono i seguenti studi:

L'essenza del metodo PCR

Il chimico americano K. Mullis ha ricevuto il premio Nobel e il suo metodo diagnostico è ancora usato.

L'antenato del metodo PCR (reazione a catena della polimerasi) è considerato uno scienziato norvegese H. Kleppe. Inizialmente ha iniziato a eseguire l'amplificazione (recupero) del DNA usando una catena corta di DNA, cioè un primer sintetico (una sorta di copia).

Tuttavia, lo scienziato non è riuscito a realizzare la sua idea. Studi simili sono stati fatti dal chimico americano K.Mullis, che nel 1993 ha ricevuto il premio Nobel per la sua invenzione. Da allora, la PCR è stata utilizzata per stabilire la paternità, diagnosticare malattie genetiche e rilevare i virus.

L'essenza della reazione è che con l'aiuto degli enzimi viene copiato un certo pezzo di DNA. È possibile copiare solo l'area che corrisponde ai parametri specificati e se si trova nel campione presentato. I seguenti componenti sono utilizzati per iniziare la reazione:

  1. DNA matrice con un sito da copiare.
  2. Primer simili nella struttura del DNA.
  3. Polimerasi, cioè l'enzima che innesca la reazione. Dovrebbe essere termostabile, cioè per resistere a temperature estreme.
  4. Soluzione con determinati parametri, garantendo il passaggio della reazione.

La reazione viene eseguita in più fasi:

Per la rilevazione dell'epatite B vengono utilizzati due tipi di reazioni: quantitativa e qualitativa.

PCR quantitativa

Il metodo quantitativo determina la quantità del genoma dell'HBV

La PCR quantitativa comporta la creazione simultanea di copie di frammenti di DNA e la determinazione del numero di molecole. La misurazione viene eseguita dopo ogni fase, cioè in tempo reale. Questo risultato è ottenuto utilizzando sonde fluorescenti, che sono incluse in una catena di molecole e si illuminano in un certo periodo dello studio.

Questo metodo viene utilizzato per rilevare i frammenti di DNA che sono marcatori del virus dell'epatite. Utilizzando il metodo quantitativo, è possibile isolare con precisione il genotipo del virus. In altre parole, viene calcolato il numero di copie del genoma dell'HBV per numero di cellule del paziente.

L'analisi quantitativa fornisce risposte alle seguenti domande:

  1. Con quale intensità progredisce la malattia.
  2. Quanto è efficace il trattamento.
  3. Si è sviluppata la resistenza ai farmaci?

Inoltre, la misurazione quantitativa è necessaria per la diagnosi della fase cronica dell'infezione. Se la quantità di DNA è inferiore a 100 pz / ml al livello normale di transaminasi, la persona è portatrice del virus.

Nella fase acuta, la quantità di anticorpi è molto più alta.Nella terapia antivirale, un aumento del numero di anticorpi indica lo sviluppo della resistenza ai farmaci, che è un segnale per regolare il trattamento.

PCR di alta qualità

La PCR di alta qualità fornisce meno informazioni, ma può eliminare l'infezione.

La PCR di alta qualità può solo stabilire la presenza del patogeno nel sangue. Se sono assenti, il paziente non è infetto, se l'agente patogeno entra nel sangue, il risultato sarà positivo.

Tuttavia, con l'aiuto della reazione qualitativa è impossibile chiarire il genoma del virus, lo stadio della malattia. Pertanto, per la diagnosi dell'HBV sono state eseguite misure sia quantitative che qualitative.

Preparazione per il sondaggio

Il sangue venoso è richiesto per l'analisi PCR. Questo deve essere fatto al mattino a stomaco vuoto.

Il paziente deve prepararsi adeguatamente allo studio:

  1. Per 10 ore per rifiutare il cibo, puoi bere solo acqua pulita.
  2. Alla vigilia di smettere di prendere alcolici, per 4 ore non fumare.
  3. Prima dell'esame dovrebbe evitare lo stress fisico ed emotivo.
  4. Interrompere l'uso di farmaci per 2 giorni, se ciò non è possibile, è necessario informare il tecnico di laboratorio. Alcuni farmaci hanno un effetto sul risultato finale.

Interpretazione dei dati

In una reazione quantitativa, gli indicatori ottenuti vengono valutati in base al numero di copie del DNA.

È facile interpretare i dati di misurazione della qualità. Dà una risposta positiva o negativa.

In una reazione quantitativa, è possibile valutare gli indicatori ottenuti in base al numero di copie del DNA. L'unità di misura è copie / ml.

I dati sono decodificati come segue:

  1. Se la quantità di DNA dell'HBV è inferiore a 90, l'infezione è assente. Il paziente ha sviluppato l'immunità post-vaccinazione, oppure è stato curato dalla malattia.
  2. Quando il numero di copie 2x100 parla del vettore del virus.
  3. Il numero 2x106 indica uno stadio cronico della malattia.
  4. Con il DNA più di 2x109, il paziente ha uno stadio acuto di epatite.

Risultati errati

I vantaggi del metodo diagnostico usando le reazioni della polimerasi sono i seguenti:

  1. Rilevazione diretta di agenti patogeni. Al contrario, l'ELISA fornisce informazioni sulla presenza di anticorpi al virus.
  2. Specificità. Cioè, è la regione del DNA che è presente nel campione di biomateriale che viene copiato.
  3. Ipersensibilità. Il metodo può anche rilevare frammenti di singole cellule.
  4. Diagnosi di malattie negli stadi acuti e latenti. Cioè, è possibile diagnosticare la malattia allo stadio delle manifestazioni precliniche.

Il metodo ha difetti che portano a risultati falsi. Lo svantaggio più significativo è la probabilità di contaminazione del materiale. La principale fonte di contaminazione è rappresentata da provette, mani di laboratorio, reagenti scarsamente trasformati.

Parte del DNA di una precedente reazione può entrare nel sangue. Pertanto, i laboratori hanno bisogno di maggiori requisiti sanitari: stanze separate, tubi di plastica, trattamento ultravioletto dei laboratori, ecc.

Risultati falsi negativi possono essere dovuti alla ridotta sensibilità della reazione. Questo succede nelle seguenti situazioni:

  • il paziente sta assumendo farmaci, ad esempio, anticoagulanti;
  • la persona ha sofferto di stress fisico prima dell'analisi (fare sport, lavorare sodo);
  • l'infezione si è verificata di recente.

Se il paziente ha un'alta probabilità di infezione e il risultato dello studio è negativo, deve essere riesaminato.

Vedi anche:

conclusione

Il metodo di reazione a catena della polimerasi è il principale e più informativo per la diagnosi dell'HBV. Permette non solo di stabilire lo stato portatore dell'infezione, ma anche di chiarire lo stadio della malattia, per valutare i risultati del trattamento.

Per una diagnosi più accurata, viene utilizzata una misurazione qualitativa e quantitativa. Gli svantaggi del metodo includono la probabilità di contaminazione, la sensibilità ridotta e un prezzo piuttosto elevato.

Affinché i risultati siano più affidabili, è necessario prepararsi adeguatamente allo studio e condurlo in clinica con la licenza appropriata e la buona reputazione.

Decifrazione dell'analisi del sangue per l'epatite B

L'epatite B è una delle malattie più pericolose del nostro tempo.

È causato da un virus che entra nel corpo quando il sangue entra in contatto con materiale biologico infetto, compresi quelli che rimangono su accessori per manicure, strumenti medici, macchine per tatuaggi che non sono state disinfettate nel modo corretto. Il virus può anche essere trasmesso attraverso il contatto sessuale.

L'epatite B viene analizzata per diagnosticare la malattia prelevando il sangue del paziente.

L'infezione avviene attraverso percorsi sessuali e domestici, il tipo di diffusione è ematogena (attraverso il sangue). Una volta infettato, il virus entra negli epatociti (cellule epatiche), che viene prodotto in futuro. Attraverso il flusso sanguigno, la malattia si sta rapidamente diffondendo in tutto il corpo. Il virus B (HBV) è caratterizzato da un'elevata resistenza agli effetti della temperatura e dell'acido ed è in grado di mantenere le sue proprietà dannose per sei mesi.

Quali esami del sangue hai per l'epatite B?

Se l'epatite B ha mostrato i primi sintomi, è necessario superare i test prima di iniziare la terapia e il trattamento. Un esame del sangue è un metodo affidabile per l'installazione dell'infezione da epatite. Condotto in laboratorio. Il materiale di test dell'epatite B viene somministrato a stomaco vuoto: un minimo di 8 ore deve passare dall'ultimo pasto.

Per rilevare il virus dell'epatite B nel sangue, vengono utilizzati test di tre tipi che caratterizzano la presenza del virus nel sangue:

  • analisi per la presenza di DNA di HBV nel materiale studiando la reazione a catena della polimerasi;
  • studio qualitativo della presenza della proteina IgG anti-HBc e dell'antigene HBsAg (presente in soggetti sani, infetti e malati);
  • analisi per il rilevamento di proteine ​​HBeAg e anti-HBc IgM (caratterizzano il peggioramento della malattia).

Per completezza, si consiglia di condurre simultaneamente ricerche su diversi marker.

Test immunologici per l'epatite B

I test più comuni per l'epatite B sono immunologici. La loro essenza è di rilevare gli anticorpi nel sangue prodotto dal corpo o dal fegato. I campioni sono qualitativi e quantitativi. I test e le trascrizioni dell'epatite B di solito contengono informazioni su diverse proteine ​​caratteristiche. Durante il test, vengono testati i seguenti anticorpi:

Si manifesta nelle prime fasi dell'infezione prima dell'insorgenza dei segni clinici.

Un marker positivo indica la presenza di un virus, ma si trova anche in persone completamente sane. Se nel sangue è presente meno di 0,05 UI / ml, il risultato è considerato negativo. Se la concentrazione dell'anticorpo è più alta, l'analisi è considerata positiva.

Si trova praticamente in ogni paziente infetto. Mantenere gli indicatori ad alto livello può indicare una transizione della malattia in una forma cronica del corso. Un marker positivo indica la presenza della malattia nel periodo di esacerbazione, recupero prolungato. L'HBeAg è un segno estremamente negativo. Il paziente è molto contagioso. Normalmente, la proteina non viene rilevata nel sangue.

Esistono due tipi di anticorpi anti-HBc: IgG e IgM. La presenza di IgM nel sangue è un segno del decorso della forma acuta, l'alta infettività del paziente e la possibilità della malattia pererohoda nella forma cronica. Normalmente, la presenza di IgM non è consentita. IgG è un indicatore favorevole. Il marcatore indica l'immunità corporea contro l'epatite B.

Se viene rilevato un marcatore nel sangue, si può trarre una conclusione sul decorso favorevole della malattia e sulla formazione dell'immunità protettiva nel paziente.

  • Anti-HBs.

Il segnale segnala il recupero e la formazione di immunità.

Rilevazione del DNA dell'HBV mediante PCR

Per l'analisi di laboratorio e il rilevamento della presenza di una diagnosi di epatite B nel sangue, viene utilizzato il metodo PCR. Il modo in cui viene considerata la reazione a catena della polimerasi è il più aggiornato nel campo del rilevamento della malattia.

La decodifica finale mostra se ci sono tracce della presenza genica del patogeno nelle cellule del fegato.

Se tutti i principi vengono seguiti durante la ricerca, il risultato è assolutamente accurato. Il metodo viene utilizzato per la diagnosi, utilizzato nel processo di trattamento e nella terapia antivirale.

  1. Una PCR di alta qualità sul totale ha solo due significati: "rilevato" e "non rilevato". La procedura viene eseguita per ogni paziente con sospetta epatite. Con una sensibilità media del test PCR nell'intervallo da 10 a 500 UI / ml, con bassi livelli di DNA di virus nel sangue, non verrà rilevato alcun materiale genico.
  2. PCR quantitativa. In contrasto con la qualità, indica non solo l'epatite B. L'analisi quantitativa indica fino a che punto la norma di una persona sana è lontana dagli indicatori del paziente in termini numerici. Il metodo consente di valutare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento. La sensibilità del test PCR in seguito quantitativo è superiore rispetto al metodo qualitativo. La base è il conteggio del DNA rilevato, che è espresso in copie per millilitro o IU / ml.

Inoltre, la PCR quantitativa fornisce informazioni sugli effetti del trattamento e sulla correttezza della terapia scelta. A seconda della quantità di materiale genico virale, può essere presa una decisione per abbreviare il periodo di trattamento o, al contrario, per prolungarlo e rafforzarlo.

Esame del sangue biochimico per l'epatite B

Il metodo di analisi biochimica è necessario per ottenere un quadro clinico completo del decorso della malattia. Questo metodo diagnostico fornisce una comprensione del lavoro degli organi interni (fegato, reni, cistifellea, tiroide e altri). La decodifica dà una comprensione del tasso metabolico nel corpo, le possibili patologie del metabolismo. Indicatori dettagliati indicheranno una mancanza di vitamine, macronutrienti e minerali necessari per la salute e la vita umana.

Puoi fare un test per l'epatite in qualsiasi altro centro diagnostico (Invitro, Gemotest, ecc.). L'analisi del sangue biochimica per l'individuazione dell'epatite B include i seguenti componenti.

Analisi quantitativa dell'enzima ALT (AlAt)

Questo enzima si trova più spesso in concentrazioni elevate nell'epatite acuta e cronica. La sostanza è contenuta nelle cellule del fegato e con le lesioni degli organi attraverso il flusso sanguigno entra nei vasi sanguigni.

La quantità e la concentrazione nel sangue durante una malattia virale sono in continua evoluzione, quindi la ricerca viene condotta almeno una volta al trimestre. ALT riflette non solo l'attività del virus dell'epatite, ma anche il grado di compromissione da esso provocato nel fegato. Il livello di ALT aumenta con l'aumentare delle quantità di sostanze tossiche di origine epatica e in presenza del virus.

Analisi quantitativa dell'enzima AST

La proteina è un componente degli organi più importanti dell'uomo: fegato, tessuto nervoso, tessuto renale, scheletro e muscoli. L'enzima è coinvolto nella costruzione del muscolo più importante: il cuore. Un alto AST in un paziente con epatite B può segnalare la fibrosi epatica. Una situazione simile si verifica quando alcol, droghe o altri danni tossici alle cellule del fegato.

Gli indicatori di surriscaldamento sono un segno di danno epatico a livello cellulare. Quando si effettua una diagnosi, è necessario prendere in considerazione il rapporto tra AST e ALT (coefficiente di de Rytis). Un aumento simultaneo della concentrazione di entrambi gli enzimi è un segno di necrosi epatica.

bilirubina

La sostanza è formata nella milza e nel fegato a causa della scomposizione dell'emoglobina nei loro tessuti. Questo componente fa parte della bile. Esistono due frazioni proteiche: bilirubina diretta (legata) e bilirubina indiretta (libera). Con un aumento della bilirubina legata al sangue, ha senso sospettare epatite o altri danni al fegato. Questo è direttamente correlato alla citolisi delle cellule epatiche.

Se la quantità di bilirubina indiretta aumenta, allora molto probabilmente c'è una lesione del tessuto parenchimale o della sindrome di Gilbert. L'alto livello di bilirubina in base ai risultati dell'analisi può essere una conseguenza dell'ostruzione dei dotti biliari. Quando il livello di bilirubina è superiore a 30 micromoli per litro, il paziente mostra una tonalità itterica della pelle, l'urina diventa scura e il bianco degli occhi cambia colore.

albumina

La sintesi di questa proteina avviene nel fegato. Se la sua quantità è ridotta, ciò indica una diminuzione della sintesi degli enzimi nel corpo a causa della presenza di gravi lesioni delle cellule epatiche.

Proteine ​​totali

Se la quantità di proteine ​​totali diventa significativamente inferiore alla norma accettata, allora questo indica un rallentamento del funzionamento del fegato.

GGT (GGTP)

Un enzima utilizzato nel rilevamento di ittero ostruttivo e colecistite. Un aumento del livello di GGT è un segnale di danno epatico tossico. Può essere provocato dall'alcolismo cronico e dall'uso incontrollato di droghe. Le proteine ​​sono particolarmente sensibili alle tossine e all'alcol, sotto la loro influenza la sua attività cresce rapidamente. Mantenere un'alta concentrazione di GGT nel sangue per un lungo periodo parla di gravi danni al fegato.

creatinina

È un prodotto del metabolismo delle proteine ​​che si verifica nel fegato. Un forte calo nel livello è un segnale che l'organo sta rallentando

Frazioni proteiche

Una diminuzione del livello delle frazioni proteiche è un segno di patologia epatica.

L'analisi di decodifica per l'epatite B e i valori sono normali

La diagnosi dell'epatite B è uno studio cumulativo di indicatori. Solo la loro analisi completa consente di trarre conclusioni sull'infezione del paziente. Considerare l'analisi di decodificazione per l'epatite B. Per confronto, il tasso di sostanze nel sangue.

Che cosa fa l'analisi quantitativa dell'epatite B mediante PCR e la norma dello studio

L'epatite è una patologia infiammatoria del fegato che si verifica a causa della penetrazione di virus nell'organo o dell'azione di veleni, tossine che portano alla distruzione degli epatociti (cellule funzionali dell'organo). In una forma non grave, la malattia si cura da sola. Nei casi gravi, porta a gravi complicazioni: fibrosi, cirrosi o oncologia. Sono identificati cinque tipi di epatite virale: A, B, C, D ed E. È possibile capire se una persona ha una malattia e in quale forma, in base ai risultati di studi speciali.

Tipi di virus

Gli agenti causali dell'epatite sono virus epatotropici. Entrano nelle cellule del fegato, si integrano nel loro genoma, distruggono la struttura, conducono alla necrosi dei tessuti. In altri organi raramente mettono radici. I virus non distruggono la cellula epatica, ma la usano per la riproduzione.

L'immunità umana combatte vigorosamente i virus, cercando di portare al loro indebolimento e arresto della riproduzione. Ma più forte è la lotta, più gli epatociti muoiono. Ciò porta allo sviluppo di infiammazione (epatite) e compromissione della funzionalità epatica.

Con una buona immunità, il fegato stesso può sbarazzarsi del virus e sconfiggere il disturbo. Questo accade con i tipi A, E e B. Se il sistema immunitario perde nel combattimento, l'epatite diventa cronica (specialmente per i tipi C, D e meno spesso B).

Esistono cinque tipi di malattia:

  1. Epatite A (agente causale HAV). Il percorso di trasmissione è fecale-orale. La sporcizia, i prodotti non lavati e l'acqua sporca sono causa di infezione. A volte trasmessi durante l'intimità. Spesso ha una forma lieve e porta al completo recupero, seguito dalla formazione dell'immunità. Le specie rare rare sono mortali. La vaccinazione è effettuata.
  2. Epatite B (HBV). Entra nel corpo attraverso materiale biologico liquido (sangue, liquido seminale) e il bambino al momento della nascita. Quando si usa una siringa usata con l'introduzione di droghe per iniezione (a tossicodipendenti a rischio). Attraverso strumenti non sterili e riutilizzabili negli ospedali (per negligenza del personale). Attraverso l'infusione di sangue donatore senza previa verifica. C'è un vaccino.
  3. Epatite C (HCV). Infetto, come con l'epatite B. I vaccini non esistono ancora.
  4. L'epatite D (HDV) colpisce solo le persone infette da HBV. A causa del doppio attacco del fegato, aumenta la gravità della malattia. La vaccinazione contro B protegge anche contro l'HDV.

Se l'epatite virale dura a lungo e di nascosto, porta a conseguenze pericolose e irreversibili. La conoscenza di questo fatto è un incentivo a non perdere la malattia e ad agire tempestivamente.

Epatite B

L'epatite B è una patologia infiammatoria del fegato che si verifica a causa dell'ingresso nell'organo del virus B. La malattia è pericolosa per la cirrosi epatica o oncologica dell'organo.

Modi di penetrazione della malattia:

  • uso di una siringa usata per iniezioni;
  • attraverso strumenti non sterili e riutilizzabili nelle istituzioni mediche (per negligenza del personale);
  • utilizzare senza previa verifica del sangue del donatore;
  • la pratica del sesso non protetto;
  • trasmissione verticale da un bambino sofferente alla madre.

In tempo per riconoscere la malattia e iniziare il trattamento aiuterà la conoscenza dei segni della malattia:

  1. Attacchi di nausea e voglia di vomitare.
  2. Perdita di appetito
  3. Sensazione di disagio sotto le costole a destra.
  4. Dolore doloroso alle articolazioni.
  5. Violazioni della frequenza e consistenza delle feci (feci incolori, urine scure).
  6. L'aspetto della pelle itterica.
  7. Sonnolenza e stanchezza rapida.

Oggi non ci sono medicine che bandiscono completamente il virus dal corpo e guariscono completamente. Ma se le misure mediche vengono prese al momento giusto, è possibile garantire la sicurezza del fegato.

Cos'è il DNA dell'epatite B? Definizione quantitativa

Per rilevare il DNA del virus dell'epatite B può essere utilizzata la PCR (reazione a catena della polimerasi). Per sospettare la malattia - in clinica, con l'aiuto di metodi di laboratorio e strumentali. Inizialmente, la patologia è nascosta (il periodo di incubazione), quindi passa allo stadio acuto.

Nel tempo, diventa una malattia cronica, ma colpisce il numero di virus e la qualità della terapia. È molto importante prevenire l'ultima fase.

Esiste un test immunoenzimatico di alta qualità per la presenza del DNA del virus. Ma non è completamente obiettivo. Non rileva la presenza di un agente patogeno all'interno degli organi.

Aiuta a identificare:

  • come reagisce l'immunità alle infezioni;
  • se ci sono antigeni nel sangue e anticorpi.

Pertanto, il controllo della terapia è complicato. Dimostra che una persona ha recuperato, in base a questo metodo è impossibile. Rileva e identifica non confermato dall'analisi qualitativa del DNA del virus dell'epatite B utilizzando l'analisi quantitativa.

Tale analisi è affidabile e viene assegnata nei seguenti casi:

  1. Il test dell'immunosorbente legato all'enzima (ELISA) per gli anticorpi è positivo.
  2. Stabilita la presenza di malattia epatica virale.
  3. Ci sono possibilità di diversi tipi di epatite.
  4. Se hai bisogno di sapere quale sia il carico di virus sul corpo.

Se la malattia procede facilmente e senza complicazioni, non è necessario determinare il carico di virus. Il paziente viene trattato sulla base della testimonianza dell'ELISA.

La scienza medica ha sviluppato un metodo di reazione a catena della polimerasi (PCR) con questa analisi, viene determinata la presenza del DNA del virus e la sua quantità nel sangue.

Rilevazione del DNA dell'HBV mediante PCR

Per rilevare il DNA del virus dell'epatite B, la PCR viene eseguita per calcolare il numero di particelle di HBV per unità di volume di siero di sangue. Il conteggio del virus dell'epatite è considerato normale in assenza del gemello del DNA dell'infezione.

Questa diagnostica ha un obiettivo:

  1. Calcola il numero di particelle virali per unità di volume di siero.
  2. Confermare l'epatite acuta.
  3. Prevenire tempestivamente la transizione della malattia in una condizione cronica.
  4. Identificare i portatori del virus con risultati ELISA positivi.
  5. Traccia il ritorno dei virus dopo il trattamento.
  6. Prendi la decisione giusta sulla nomina della terapia, la sua combinazione o risoluzione.

Dopo un periodo di incubazione, l'epatite acuta è positiva per PCR dopo sette-quattordici giorni.

Prima di assegnare il sangue per l'analisi, il medico scopre la storia del paziente:

  • se le droghe sono state iniettate in una vena;
  • se il sangue di qualcun altro scorreva o si arrendeva come sangue da donatore;
  • c'erano delle operazioni?
  • se ci fossero lesioni cutanee;
  • se ci fossero dubbie relazioni sessuali;
  • c'erano contatti con persone infette da epatite B?

Il sangue viene prelevato per l'analisi da una vena a stomaco vuoto al mattino dalle 7 alle 9 in modo che i risultati siano affidabili.

Preparati per il campionamento del sangue, osservando le regole:

  • non mangiare cibi grassi per 12 ore, non assumere bevande alcoliche, non fumare;
  • evitare carichi fisici e sportivi;
  • Avvertire in laboratorio se il farmaco è stato preso (evitare di prenderlo se possibile);
  • ai bambini sotto i cinque anni, mezz'ora prima del prelievo di sangue, bevete duecento grammi di acqua bollita a intervalli di dieci minuti.

La concentrazione di HBV DNA è misurata in copie / ml o me / ml.

Nel valutare i risultati dello studio sono guidati dai seguenti indicatori:

  • 2x10 ^ 6 -in novantacinque per cento dei casi diventeranno cronici.

La PCR quantitativa è il metodo principale per diagnosticare le esacerbazioni dell'epatite B, identificando la portatrice latente dell'infezione con alta viremia HBV.

In quali malattie è quantificato il DNA del virus dell'epatite B

L'epatite PCR viene eseguita per rilevare l'infezione (HBV DNA). Questo tipo di rilevamento diagnostico di microrganismi dannosi viene in aiuto non solo nell'epatite B. Per trovare patogeni che sono segreti e difficili da trovare negli organi, la PCR viene spesso utilizzata per confermare o confutare l'infezione nella pratica ginecologica e urologica.

Esaminando il sangue, scopri:

  • epatite A, B, C, D e TT;
  • Infezione da HIV;
  • malattia del fegato;
  • herpes di tutti i tipi;
  • citomegalovirus;
  • infezione da enterovirus;
  • toxoplasmosi;
  • rosolia;
  • altre malattie causate da virus.

Non solo il siero del sangue è adatto per diagnosticare le malattie con questo metodo. Altri biomateriali sono anche presi per l'analisi. Questa è saliva, sbavature dai genitali, eiaculato.

Pertanto, l'elenco delle malattie per le quali viene mostrata la diagnosi PCR si espande:

  1. Tubercolosi.
  2. Salmonellosi.
  3. Difterite.
  4. Malattie veneree
  5. Papillomi virali

La PCR è inclusa in una serie di test obbligatori per una donna che porta un bambino. Al fine di prevenire il percorso patologico della gravidanza e le anomalie nello sviluppo del bambino, è necessario escludere la probabilità di infettare la madre con malattie pericolose.

Il termine dell'analisi del DNA del virus dell'epatite B in modo quantitativo

La PCR senza errori con alta precisione rileva la presenza del virus in una fase precoce. Nello studio di ELISA, l'antigene appare solo due mesi dopo l'infezione. Con PCR - in trenta giorni. Viene rilevato non solo un virus comune, ma anche ceppi mutati che nessun'altra analisi può rilevare.

Esistono numeri standard per la quantificazione del virus. Sono confrontati con i valori ottenuti nello studio e traggono conclusioni sul grado di sviluppo della malattia o sulla sua assenza. L'analisi dei dati della PCR viene emessa in due settimane.

Spesso le persone non sanno di avere avuto l'epatite B. Lo confondono con il raffreddore o l'influenza. A causa della malattia, il rischio aumenta nel corso della vita per acquisire gravi complicazioni dal fegato. Pertanto, è meglio giocare sul sicuro e contattare uno specialista di malattie infettive.

Quali medici dovrebbero essere consultati

Il paziente, avendo ricevuto sulle sue mani i risultati dei test, cerca di trarre conclusioni sulla presenza di epatite e determinare lo stadio di sviluppo della malattia. In questo caso, viene spesso commesso un errore nel valutare lo stato reale delle cose. Per evitare questo, vengono dai medici per un consiglio.

Specialisti medici in questo settore:

Il medico curante analizza il test quantitativo della PCR, decifrando la natura del decorso dell'epatite B e le indicazioni per un'ulteriore diagnosi.

Aiuta a scegliere il trattamento necessario o lo cancella in assenza della malattia del paziente.

Il medico delle malattie infettive valuterà obiettivamente lo stato di salute del paziente dopo la decrittazione, prescriverà il trattamento corretto e darà consigli.

Per non avere i problemi associati a questo disturbo, gli epatologi raccomandano vivamente di mettere i vaccini contro l'epatite B. L'introduzione di un vaccino garantisce al cento per cento che una persona sarà protetta dalla malattia.

  • tutti i bambini subito dopo la nascita;
  • dipendenti di istituzioni mediche;
  • quelli che sono infusi con il sangue di qualcun altro.

Per quanto tempo il vaccino introdotto agirà dipende dall'immunità di ciascuna persona individualmente (da 10 a 20 anni). Se necessario, ripetere la vaccinazione.

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Trattamento, sintomi, droghe

Trascrizione dell'analisi quantitativa dell'epatite B

L'epatite B è una delle malattie più pericolose del nostro tempo.

È causato da un virus che entra nel corpo quando il sangue entra in contatto con materiale biologico infetto, compresi quelli che rimangono su accessori per manicure, strumenti medici, macchine per tatuaggi che non sono state disinfettate nel modo corretto. Il virus può anche essere trasmesso attraverso il contatto sessuale.

L'epatite B viene analizzata per diagnosticare la malattia prelevando il sangue del paziente.

L'infezione avviene attraverso percorsi sessuali e domestici, il tipo di diffusione è ematogena (attraverso il sangue). Una volta infettato, il virus entra negli epatociti (cellule epatiche), che viene prodotto in futuro. Attraverso il flusso sanguigno, la malattia si sta rapidamente diffondendo in tutto il corpo. Il virus B (HBV) è caratterizzato da un'elevata resistenza agli effetti della temperatura e dell'acido ed è in grado di mantenere le sue proprietà dannose per sei mesi.

Quali esami del sangue hai per l'epatite B?

Se l'epatite B ha mostrato i primi sintomi, è necessario superare i test prima di iniziare la terapia e il trattamento. Un esame del sangue è un metodo affidabile per l'installazione dell'infezione da epatite. Condotto in laboratorio. Il materiale di test dell'epatite B viene somministrato a stomaco vuoto: un minimo di 8 ore deve passare dall'ultimo pasto.

Per rilevare il virus dell'epatite B nel sangue, vengono utilizzati test di tre tipi che caratterizzano la presenza del virus nel sangue:

  • analisi per la presenza di DNA di HBV nel materiale studiando la reazione a catena della polimerasi;
  • studio qualitativo della presenza della proteina IgG anti-HBc e dell'antigene HBsAg (presente in soggetti sani, infetti e malati);
  • analisi per il rilevamento di proteine ​​HBeAg e anti-HBc IgM (caratterizzano il peggioramento della malattia).

Per completezza, si consiglia di condurre simultaneamente ricerche su diversi marker.

Test immunologici per l'epatite B

I test più comuni per l'epatite B sono immunologici. La loro essenza è di rilevare gli anticorpi nel sangue prodotto dal corpo o dal fegato. I campioni sono qualitativi e quantitativi. I test e le trascrizioni dell'epatite B di solito contengono informazioni su diverse proteine ​​caratteristiche. Durante il test, vengono testati i seguenti anticorpi:

Si manifesta nelle prime fasi dell'infezione prima dell'insorgenza dei segni clinici.

Un marker positivo indica la presenza di un virus, ma si trova anche in persone completamente sane. Se nel sangue è presente meno di 0,05 UI / ml, il risultato è considerato negativo. Se la concentrazione dell'anticorpo è più alta, l'analisi è considerata positiva.

Si trova praticamente in ogni paziente infetto. Mantenere gli indicatori ad alto livello può indicare una transizione della malattia in una forma cronica del corso. Un marker positivo indica la presenza della malattia nel periodo di esacerbazione, recupero prolungato. L'HBeAg è un segno estremamente negativo. Il paziente è molto contagioso. Normalmente, la proteina non viene rilevata nel sangue.

Esistono due tipi di anticorpi anti-HBc: IgG e IgM. La presenza di IgM nel sangue è un segno del decorso della forma acuta, l'alta infettività del paziente e la possibilità della malattia pererohoda nella forma cronica. Normalmente, la presenza di IgM non è consentita. IgG è un indicatore favorevole. Il marcatore indica l'immunità corporea contro l'epatite B.

Se viene rilevato un marcatore nel sangue, si può trarre una conclusione sul decorso favorevole della malattia e sulla formazione dell'immunità protettiva nel paziente.

Il segnale segnala il recupero e la formazione di immunità.

Rilevazione del DNA dell'HBV mediante PCR

Per l'analisi di laboratorio e il rilevamento della presenza di una diagnosi di epatite B nel sangue, viene utilizzato il metodo PCR. Il modo in cui viene considerata la reazione a catena della polimerasi è il più aggiornato nel campo del rilevamento della malattia.

La decodifica finale mostra se ci sono tracce della presenza genica del patogeno nelle cellule del fegato.

Se tutti i principi vengono seguiti durante la ricerca, il risultato è assolutamente accurato. Il metodo viene utilizzato per la diagnosi, utilizzato nel processo di trattamento e nella terapia antivirale.

  1. Una PCR di alta qualità sul totale ha solo due significati: "rilevato" e "non rilevato". La procedura viene eseguita per ogni paziente con sospetta epatite. Con una sensibilità media del test PCR nell'intervallo da 10 a 500 UI / ml, con bassi livelli di DNA di virus nel sangue, non verrà rilevato alcun materiale genico.
  2. PCR quantitativa. In contrasto con la qualità, indica non solo l'epatite B. L'analisi quantitativa indica fino a che punto la norma di una persona sana è lontana dagli indicatori del paziente in termini numerici. Il metodo consente di valutare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento. La sensibilità del test PCR in seguito quantitativo è superiore rispetto al metodo qualitativo. La base è il conteggio del DNA rilevato, che è espresso in copie per millilitro o IU / ml.

Un esame del sangue per l'epatite B sotto forma di PCR quantitativa fornisce una comprensione del grado di infettività del paziente. Più alto è il punteggio, maggiore è il rischio di diffusione del virus.

Inoltre, la PCR quantitativa fornisce informazioni sugli effetti del trattamento e sulla correttezza della terapia scelta. A seconda della quantità di materiale genico virale, può essere presa una decisione per abbreviare il periodo di trattamento o, al contrario, per prolungarlo e rafforzarlo.

Esame del sangue biochimico per l'epatite B

Il metodo di analisi biochimica è necessario per ottenere un quadro clinico completo del decorso della malattia. Questo metodo diagnostico fornisce una comprensione del lavoro degli organi interni (fegato, reni, cistifellea, tiroide e altri). La decodifica dà una comprensione del tasso metabolico nel corpo, le possibili patologie del metabolismo. Indicatori dettagliati indicheranno una mancanza di vitamine, macronutrienti e minerali necessari per la salute e la vita umana.

Se si sospetta l'epatite B, i test includono necessariamente uno studio biochimico basato sul sangue venoso. In questo caso, prestare particolare attenzione agli indicatori che caratterizzano il lavoro del fegato e il suo possibile danno.

Puoi fare un test per l'epatite in qualsiasi altro centro diagnostico (Invitro, Gemotest, ecc.). L'analisi del sangue biochimica per l'individuazione dell'epatite B include i seguenti componenti.

Analisi quantitativa dell'enzima ALT (AlAt)

Questo enzima si trova più spesso in concentrazioni elevate nell'epatite acuta e cronica. La sostanza è contenuta nelle cellule del fegato e con le lesioni degli organi attraverso il flusso sanguigno entra nei vasi sanguigni.

La quantità e la concentrazione nel sangue durante una malattia virale sono in continua evoluzione, quindi la ricerca viene condotta almeno una volta al trimestre. ALT riflette non solo l'attività del virus dell'epatite, ma anche il grado di compromissione da esso provocato nel fegato. Il livello di ALT aumenta con l'aumentare delle quantità di sostanze tossiche di origine epatica e in presenza del virus.

Analisi quantitativa dell'enzima AST

La proteina è un componente degli organi più importanti dell'uomo: fegato, tessuto nervoso, tessuto renale, scheletro e muscoli. L'enzima è coinvolto nella costruzione del muscolo più importante: il cuore. Un alto AST in un paziente con epatite B può segnalare la fibrosi epatica. Una situazione simile si verifica quando alcol, droghe o altri danni tossici alle cellule del fegato.

Gli indicatori di surriscaldamento sono un segno di danno epatico a livello cellulare. Quando si effettua una diagnosi, è necessario prendere in considerazione il rapporto tra AST e ALT (coefficiente di de Rytis). Un aumento simultaneo della concentrazione di entrambi gli enzimi è un segno di necrosi epatica.

bilirubina

La sostanza è formata nella milza e nel fegato a causa della scomposizione dell'emoglobina nei loro tessuti. Questo componente fa parte della bile. Esistono due frazioni proteiche: bilirubina diretta (legata) e bilirubina indiretta (libera). Con un aumento della bilirubina legata al sangue, ha senso sospettare epatite o altri danni al fegato. Questo è direttamente correlato alla citolisi delle cellule epatiche.

Bilirubina negli esseri umani

Se la quantità di bilirubina indiretta aumenta, allora molto probabilmente c'è una lesione del tessuto parenchimale o della sindrome di Gilbert. L'alto livello di bilirubina in base ai risultati dell'analisi può essere una conseguenza dell'ostruzione dei dotti biliari. Quando il livello di bilirubina è superiore a 30 micromoli per litro, il paziente mostra una tonalità itterica della pelle, l'urina diventa scura e il bianco degli occhi cambia colore.

albumina

La sintesi di questa proteina avviene nel fegato. Se la sua quantità è ridotta, ciò indica una diminuzione della sintesi degli enzimi nel corpo a causa della presenza di gravi lesioni delle cellule epatiche.

Proteine ​​totali

Se la quantità di proteine ​​totali diventa significativamente inferiore alla norma accettata, allora questo indica un rallentamento del funzionamento del fegato.

L'aumento dei livelli di proteine ​​segnala il processo infiammatorio nel corpo.

GGT (GGTP)

Un enzima utilizzato nel rilevamento di ittero ostruttivo e colecistite. Un aumento del livello di GGT è un segnale di danno epatico tossico. Può essere provocato dall'alcolismo cronico e dall'uso incontrollato di droghe. Le proteine ​​sono particolarmente sensibili alle tossine e all'alcol, sotto la loro influenza la sua attività cresce rapidamente. Mantenere un'alta concentrazione di GGT nel sangue per un lungo periodo parla di gravi danni al fegato.

creatinina

È un prodotto del metabolismo delle proteine ​​che si verifica nel fegato. Un forte calo nel livello è un segnale che l'organo sta rallentando

Frazioni proteiche

Una diminuzione del livello delle frazioni proteiche è un segno di patologia epatica.

L'analisi di decodifica per l'epatite B e i valori sono normali

La diagnosi dell'epatite B è uno studio cumulativo di indicatori. Solo la loro analisi completa consente di trarre conclusioni sull'infezione del paziente. Considerare l'analisi di decodificazione per l'epatite B. Per confronto, il tasso di sostanze nel sangue.

Il tasso di analisi quantitativa per l'epatite B

DNA del virus dell'epatite B, determinazione quantitativa

Qual è la quantificazione del DNA del virus dell'epatite B?

L'HBV è un virus complesso contenente DNA e appartiene alla famiglia Hepadnaviridae del genere Orthohepadnavirus.

Epatite B - infezione anthroponotic, preferibilmente un meccanismo di infezione parenterale, che possono assumere la forma di un vettore virale, della malattia epatica acuta e cronica ed è caratterizzata da un possibile sviluppo di insufficienza epatica acuta, epatite cronica, cirrosi e cancro primario del fegato (carcinoma epatocellulare).

Infezione con il corpo umano avviene attraverso la penetrazione diretta dell'HBV nel sangue (con qualsiasi intervento invasivo e trasfusioni di sangue e dei suoi prodotti), o tramite la mucosa e la pelle durante la consegna, durante contatti domestici sessuali e stretti. Una volta nel fegato, l'HBV penetra nell'epatocita, dove inizia a moltiplicarsi rapidamente.

Lo sviluppo di un processo infettivo può avvenire in due modi: replicativo e integrativo. infezione forma replicativa porta a epatite acuta o cronica e la cirrosi epatica, mentre integrativa - per un sano sviluppo di infezione da virus, epatite attiva cronica, cirrosi epatica e carcinoma epatocellulare primario.

La diagnosi sierologica e la prognosi dell'infezione da HBV si basa sulla rilevazione di antigeni del virus e anticorpi ad esso. Ma, come si è scoperto, ce ne sono abbastanza mutanti (HBeAg-negativi) nella popolazione del virus dell'epatite B, che non sono rilevati dai test sierologici convenzionali. Pertanto, il metodo PCR per la diagnosi dell'infezione da HBV è estremamente importante.

Determinazione quantitativa del DNA del virus dell'epatite B mediante PCR.

Indicatori analitici: rilevazione del DNA del virus dell'epatite B (virus dell'epatite B) mediante il metodo della reazione a catena della polimerasi (PCR) e determinazione della carica virale nel plasma sanguigno.

Il frammento identificato è l'unica sequenza di DNA del gene della proteina strutturale del virus dell'epatite B. La specificità della determinazione è del 98%. La sensibilità di rilevazione è da 2x105 IU / ml 5x103 copie / ml di particelle virali sieriche.

caratterizzazione quantitativa del contenuto di DNA del virus dell'epatite B è importante per valutare l'efficacia della terapia antivirale e ha valore prognostico per la definizione di epatite cronica B: inizialmente basso livello di viremia (DNA HBV almeno 2x105 copie / ml (2x105 / ml) IU) percentuale cronica acuta epatite B vicino a a zero. Ad una concentrazione di 2x105 HBV DNA copie / ml (2x105 IU / ml) a 2x10 copie / ml (8h105 UI / ml) processo chronization si osserva nel 25-30% dei pazienti, e ad alti livelli in un paziente vi remii (2x10 più copie / ml (8x105 IU / ml)) l'epatite B acuta il più delle volte diventa cronica. Una riduzione dell'85% della concentrazione del DNA del virus dell'epatite B entro il terzo giorno dall'inizio della terapia è un parametro rapido e accurato per prevedere l'efficacia della terapia.

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Base di conoscenza: HBV, DNA quantificato [PCR in tempo reale]

HBV, DNA quantificato [PCR in tempo reale]

Studio per identificare l'agente eziologico dell'epatite B (HBV), in cui il metodo di reazione a catena della polimerasi in tempo reale (RT-PCR) è determinata dalla presenza di materiale genetico (DNA) del virus e il suo volume (il carico virale) nel campione di sangue.

Il DNA dell'HBV può essere rilevato a una concentrazione al di fuori del limite inferiore dell'intervallo di concentrazione lineare. L'intervallo di concentrazione lineare è l'intervallo in cui è possibile calcolare con precisione il numero di copie dell'agente patogeno. Per questa analisi, l'intervallo lineare delle concentrazioni di HBV DNA determinato dall'amplificatore di rilevazione è 7,5 × 10 2 - 1,0 × 10 8 copie / ml del campione.

Virus dell'epatite B (HBV), quantificazione del DNA.

DNA del virus dell'epatite B, PCR quantitativo, in tempo reale, sangue; HBV Viral Load; DNA del virus dell'epatite B Quant.

Reazione a catena della polimerasi in tempo reale.

Copia / ml (copia per millilitro).

Quale biomateriale può essere utilizzato per la ricerca?

Come prepararsi per lo studio?

Non fumare per 30 minuti prima di donare il sangue.

Informazioni generali sullo studio

L'epatite B virale (HBV) è una malattia epatica infettiva causata da un virus dell'epatite B contenente DNA (HBV). Tra tutte le cause di epatite acuta e infezione virale cronica, il virus dell'epatite B è considerato uno dei più comuni al mondo. Il numero effettivo di infetti è sconosciuto, dal momento che molte persone hanno l'infezione senza sintomi specifici e non cercano aiuto medico. Spesso il virus viene rilevato durante i test di laboratorio preventivi. Secondo stime approssimative, ci sono circa 350 milioni di persone nel mondo colpite dal virus dell'epatite B e 620.000 muoiono a causa dei suoi effetti ogni anno. In Russia, il numero di portatori di HBV supera i 5 milioni di persone.

La fonte di infezione è un paziente HBV o un vettore di virus asintomatico. L'HBV viene trasmessa con sangue e altri fluidi corporei. È possibile essere infettati attraverso il contatto sessuale non protetto, uso di aghi contaminati, trasfusioni di sangue e trapianti di organi, il bambino può infettare la madre durante o dopo la nascita (attraverso le fessure i capezzoli). Quelli a rischio sono: medici professionisti, che possono venire in contatto con il sangue del paziente, pazienti in emodialisi, i tossicodipendenti, le persone che sono promiscua, i bambini nati da madri con HBV.

Il periodo di incubazione della malattia va da 4 settimane a 6 mesi. L'epatite B virale può presentarsi sotto forma di forme lievi che durano diverse settimane, così come nella forma di un'infezione cronica a lungo termine. I principali sintomi di epatite: ingiallimento della pelle, febbre, nausea, stanchezza, in test di laboratorio - disfunzione epatica e antigeni specifici sono la malattia acuta da HBV può portare rapidamente alla morte, a passare in un'infezione cronica o terminato con recupero completo. Si ritiene che dopo aver sofferto l'HBV abbia formato una forte immunità. L'epatite virale cronica B è associata allo sviluppo di cirrosi e cancro del fegato.

Esistono diversi test specifici per identificare l'epatite virale B esistente o passata. Per confermare la presenza di infezione e chiarire il periodo della malattia, viene utilizzata la definizione di antigeni virali, anticorpi anti-virus e DNA.

La reazione a catena della polimerasi è altamente sensibile e specifica. La PCR può essere utilizzata per determinare il DNA di un virus sia qualitativamente che quantitativamente. A causa del metodo qualitativo, è confermata la presenza del virus dell'epatite B nel corpo e la sua riproduzione attiva. Quantificare la carica virale consente di valutare l'intensità dello sviluppo della malattia, l'efficacia della terapia o lo sviluppo di resistenza ai farmaci antivirali.

Esiste una relazione tra la concentrazione del virus nel sangue e l'esito dell'epatite virale acuta B. Con un basso livello di viremia, la probabilità che l'infezione diventi cronica è prossima allo zero e una persona infetta è innocua per gli altri. Con una elevata carica virale (5 copie / ml) la cronicità si verifica frequentemente e il paziente è una potenziale fonte di infezione. Comprovata relazione tra la quantità di DNA del virus nel siero, la presenza di HBeAg, l'aumento di ALT e lo sviluppo di cirrosi e carcinoma epatocellulare (cancro del fegato).

L'efficacia della terapia antivirale viene valutata riducendo la quantità di DNA del virus nel sangue. 3-6 mesi dopo l'inizio del trattamento, la carica virale con un'adeguata risposta terapeutica dovrebbe diminuire di 1-2 ordini di grandezza. L'assenza di una diminuzione del numero del virus o il suo aumento sullo sfondo del trattamento richiesto richiede una revisione e un cambio di terapia.

La determinazione quantitativa del DNA del virus dell'epatite B, unitamente al quadro clinico della malattia e agli indicatori biochimici, ai marcatori di infezione e al risultato della biopsia epatica, consente di prevedere la malattia e valutare la necessità di una terapia antivirale.

A cosa serve la ricerca?

  • Per predire il decorso dell'epatite virale B.
  • Per confermare la forma cronica dell'epatite virale B.
  • Identificare i portatori di epatite B virale e monitorare l'attività riproduttiva del virus.
  • Identificare ceppi nascosti e mutanti dell'epatite B.
  • Valutare l'efficacia della terapia antivirale per l'epatite B e decidere su ulteriori tattiche di trattamento.

Quando è programmato uno studio?

  • Con rilevazione del DNA di alta qualità del virus dell'epatite B.
  • Nell'epatite virale acuta e cronica B.
  • In caso di epatite mista.
  • Prima e durante la terapia antivirale.

Cosa significano i risultati?

  • Non rilevato - non è stato rilevato alcun DNA di virus dell'epatite B o il valore è inferiore al limite di sensibilità del metodo (200 copie / ml = 90 UI / ml).
  • 10 ^ 5 copie / ml (2 * 10 ^ 4 IU / ml) - alta carica virale, processo infettivo attivo (è necessaria una terapia antivirale).
  • 1,0 * 10 ^ 8 copie / ml (4,8 * 10 ^ 7 IU / ml) - Il DNA del virus dell'epatite B è stato rilevato a una concentrazione superiore all'intervallo di concentrazione lineare.

L'intervallo lineare delle concentrazioni di DNA del virus dell'epatite B determinate dall'amplificatore di rilevazione è 7,5 * 10 ^ 2 - 1,0 * 10 ^ 8 copie / ml (3,6 * 10 ^ 2 - 4,8 * 10 ^ 7 IU / ml).

Cosa può influenzare il risultato?

  • La determinazione quantitativa del DNA del virus dell'epatite B è uno studio obbligatorio prima della nomina della terapia antivirale. Durante il corso del trattamento, l'analisi deve essere ripetuta dopo 3-6 mesi.
  • L'epatite B virale è spesso associata all'epatite virale D.

Chi fa lo studio?

  1. Zh.I. Vozianova Malattie infettive e parassitarie: in 3 tonnellate - K. Health, 2000 - T.1. 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling e altri. Reagente per l'epatite B del DNA del virus dell'epatite B 2003 ottobre; 41 (10): 4793-4795. PMCID: PMC294957
  3. Principi di medicina interna di Harrison. 16 ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Gestione dell'epatite B. Una conferenza sullo sviluppo del consenso del NIH. Programma e abstract. 20-22 ottobre 2008.

Quali sono le norme per quantificare l'epatite C?

Il virus dell'epatite C è in grado di moltiplicarsi nelle cellule del sangue e causare malattie linfoproliferative. A causa di molteplici mutazioni, la difesa immunitaria del corpo si indebolisce, appaiono genotipi e sottotipi del virus. Con la determinazione corretta e tempestiva di un tipo specifico, dipende l'efficacia della terapia antivirale. Il pericolo di infezione è che la malattia è asintomatica. Solo il 15% dei 100 può manifestare nausea e vomito, perdita di peso e febbre.

Rilevazione del virus dell'epatite C

Il tasso standard di epatite C è nelle dimensioni da 40 a 60 nm, con la maggior parte dei lipidi, danni al fegato derivanti da un decorso acuto o cronico della malattia. L'epatite C, vale a dire il virus RNA della famiglia Togaviridae, è estremamente resistente, viene trasmessa mediante trasfusioni di sangue o l'uso di articoli non sterili, forniture di igiene improprie, ecc. L'analisi quantitativa consente di esaminare il sangue e identificare la struttura genetica del virus infetto.

Per l'epatite C e i suoi genotipi sono stati determinati, condurre un'analisi quantitativa. A seconda dell'analizzatore è possibile determinare i tre livelli di incidenza del virus dell'RNA.

I sottotipi possono produrre varie modifiche, quindi la specificità e la sensibilità dell'analizzatore devono essere al cento per cento. Oltre a rilevare la malattia in un paziente, è necessario determinare il grado della sua gravità. Alcuni laboratori non hanno tutti i dati sulla decodifica del virus RNA, esiste la possibilità di una falsa risposta positiva.

La ricerca sull'epatite C sarà più accurata quando si studiano questi indicatori:

Attirando l'attenzione sui risultati di questi indicatori e sulla condizione generale del corpo, viene visualizzato un risultato che mostra il grado di infezione, la forma e il numero di cellule epatite C nel sangue. Ciò contribuisce al processo di guarigione e all'efficacia della terapia antivirale.

Tipi di analisi per l'epatite C

Una reazione a catena multi-dimensionale (PCR) dà un'idea del numero di particelle di DNA nelle analisi dei pazienti effettuate, identificando correttamente l'agente infettivo.

Possono verificarsi agenti causativi di malattie infettive. Tale malattia infettiva del fegato come epatite C. è oggi curabile quando viene rilevata in modo tempestivo. Se si sospetta un virus, viene eseguita l'analisi PCR.

Dato che a lungo i sintomi del virus possono essere mascherati, una persona potrebbe non sentire l'insorgere della malattia. Ma con un esame approfondito nel 60-70% dei casi, viene rilevata l'epatite C, la prima analisi, che è ELISA, seguita dalla diagnosi PCR. L'analisi viene effettuata in determinati periodi per determinare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento appropriato. Per farne a meno, senza applicare tutte queste procedure, è possibile essere vaccinati contro l'epatite.

L'analisi, inclusa la diagnostica PCR, fornisce un quadro della malattia, quanto è attivo il virus in diversi periodi di sviluppo.

Innanzitutto, c'è un'analisi qualitativa che conferma solo l'ipotesi sull'infezione e quindi un quantitativo, determinando il carico sul fegato. L'opzione ideale sarebbe un risultato negativo per l'epatite C nel materiale genetico del paziente.

Analisi qualitativa e quantitativa

Ci sono analisi qualitative e quantitative. L'essenza del primo è che determina la presenza di infezione nel sangue. E questo significa che il virus infetta cellule epatiche sane. Quando si trovano anticorpi contro l'epatite C in un paziente, viene immediatamente eseguito un test qualitativo. Il tasso che il risultato dovrebbe dare è "non rilevato nel sangue". Quando si determina la concentrazione di un virus, è necessario conoscere la sensibilità del sistema diagnostico, poiché le persone sottoposte a terapia antivirale possono eseguire l'analisi. Il grado di sensibilità dell'analizzatore non deve essere inferiore a 50 IU / ml.

Quando viene rilevato un virus, viene eseguita un'analisi quantitativa, in altre parole, la carica virale, che determina la concentrazione del virus nel sangue e la gravità della malattia.

L'RNA virale, che è in una certa quantità di sangue, è definito come la norma al ritmo di 1 ml per 1 centimetro cubico. Dopo aver quantificato la carica virale, è possibile valutare il grado di infezione dell'ambiente ancora non infetto. Non appena la concentrazione di epatite C sale nel sangue, è necessario isolare dall'ambiente.

È importante nelle prime fasi rilevare il grado di concentrazione dell'epatite, al fine di determinare il ritmo della riabilitazione. Se il tasso di epatite C è superato di oltre 800 mila IU / ml, è considerato troppo alto, con un aumento fino a un milione - critico. Se l'intervallo quantitativo è inferiore a 400 mila IU / ml, si ritiene che l'infezione di quelli intorno sarà meno probabile. Questa cifra chiarisce che l'epatite C è presente nel corpo in dosi molto piccole. L'analisi non è stata in grado di determinare il valore quantitativo delle particelle di RNA del virus, per cui è stata rinominata diverse volte per una diagnosi accurata.

Risultati dell'analisi quantitativa

Il compito di determinare la quantità di carica virale nel sangue di un paziente è l'identificazione del grado di infezione per gli altri.

Un'analisi dell'epatite C consente di valutare l'efficacia della terapia antivirale, il livello di infettività e il numero di tessuti infetti.

È importante prevenire la progressione della malattia, adottare misure preventive nel tempo, prescrivere il trattamento corretto basato sulla diagnostica della PCR. Se, in base ai risultati, il livello di carica virale è inferiore a 400 mila IU / ml, la concentrazione potrebbe essere minima, il che indica un possibile recupero completo. La norma per un risultato positivo è l'assenza di infezione.

  1. Una risposta positiva significa un'infezione nel materiale biologico. L'analisi consente di determinare il numero esatto di cellule infette.
  2. Una risposta negativa indica l'assenza di infezione, che viene attentamente ricercata nel corpo.

Il metodo di determinazione quantitativa dell'epatite C è accurato e informativo, eseguito su apparecchiature ad alta sensibilità. Decifrare i risultati dell'analisi consente di scoprire se l'infezione e la sua specificità, per vedere il minor numero di cellule infette su analizzatori altamente sensibili.

I risultati falsi positivi o opposti sono raramente dati dall'analisi, più spesso ciò avviene negli studi di immunodosaggio.