Analisi qualitativa per l'epatite C

8 marzo 2017, 12:29 Articoli esperti: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

Un'analisi qualitativa della reazione a catena della polimerasi - la PCR per l'epatite C determina la presenza o l'assenza di HCV nel corpo. In condizioni di laboratorio, viene studiata la struttura dell'RNA, che includerà il virus. In caso di rilevamento del virus C, è necessario sottoporsi a un ciclo di trattamento, poiché lo stato trascurato del fegato si tradurrà in gravi conseguenze. La PCR di alta qualità viene eseguita dopo il recupero per confermare l'assenza di anticorpi. Nominato e per ispezione di routine. Con una bassa concentrazione dell'agente causale nel sangue, la PCR (qualitativa) potrebbe non rilevare nulla, poiché il sistema diagnostico ha le proprie soglie di sensibilità. Nel caso della fase iniziale della malattia o della forma lieve, la PCR viene eseguita mediante analisi ultradiagnostica su apparecchiature ultrasensibili.

Cos'è il virus RNA?

Il termine RNA del virus dell'epatite C (o RNA del virus dell'epatite C) è la stessa malattia del fegato. Il virus C si lega alla cellula sana del corpo penetrando all'interno. Nel corso del tempo, si sviluppa in tutto il corpo, è necessario solo entrare nel sangue. Di conseguenza, il patogeno penetra nel fegato, si fonde con le sue cellule e lavora sodo. Le cellule epatiche (epatociti) lavorano sotto la sua influenza, subendo cambiamenti e da questo muoiono. Più a lungo il virus C è nel fegato, maggiore è il numero di cellule muoiono. Nel corso del tempo si sviluppano malattie pericolose che portano a degenerazione e morte maligne.

L'infezione del fegato con questo tipo di virus potrebbe non manifestarsi esternamente. Per molti anni o decenni, una persona infetta si sente completamente in salute, e solo un esame casuale rivela molto spesso la patologia. Durante la donazione di sangue per l'epatite, viene esaminata una porzione della catena di RNA (acido ribonucleico) che fa parte del gene umano (DNA). I risultati degli esami di laboratorio non devono essere utilizzati per l'autotrattamento, perché questo è solo un indicatore. L'immagine esatta e l'ulteriore diagnosi sono meglio determinate dal medico.

Al termine: indicazioni per la ricerca

In conferma dell'HCV, l'analisi della PCR viene eseguita (reazione a catena della polimerasi). Gli studi sulla PCR aiutano a trovare l'agente eziologico nella struttura dell'RNA e prescrivono una terapia efficace. Nominato nei seguenti casi:

  • individuazione dei segni di infiammazione del fegato;
  • studi di screening per la prevenzione;
  • esame delle persone in contatto;
  • diagnosi di epatite di origine mista (determinazione dell'agente patogeno principale);
  • determinare il livello di attività riproduttiva del virus nella forma cronica;
  • cirrosi epatica;
  • determinare l'efficacia del trattamento prescritto.
Ricerca PCR prescrive un medico per determinare l'efficacia del ciclo di trattamento dell'epatite.

Esiste un'analisi qualitativa e quantitativa della PCR. La PCR quantitativa mostra la percentuale di RNA con i vettori del virus nel sangue e qualitativa indica la presenza o assenza virale. Un indicatore positivo di qualità (presenza di RNA dell'epatite C) richiede anche una ricerca quantitativa. Un alto livello di concentrazione dell'agente causale dell'epatite C è associato al rischio della sua trasmissione, cioè l'infezione di altri. I numeri bassi sono meglio curabili. La quantità di virus a RNA nel sangue non è correlata all'intensità della malattia. L'analisi della PCR viene eseguita anche nel caso della terapia con interferone al fine di prescrivere la durata e la complessità del ciclo di trattamento.

Caratteristiche di analisi PCR di alta qualità per l'epatite C

Un'analisi qualitativa viene assegnata con un indicatore di reazione a catena della polimerasi per tutti i pazienti che hanno anticorpi contro l'epatite C. Nel sangue, coloro che sono stati malati e recuperati devono ripetere il test. Si raccomanda di effettuare un'analisi per l'epatite B, quindi, in caso di conclusione positiva, e per l'epatite D. Inoltre, la reazione qualitativamente analizzata deve essere eseguita insieme ad altri esami del sangue. Le analisi mostreranno un quadro completo della diffusione virale.

Dai risultati del test, solo un test positivo per l'epatite C sarà visibile o negativo, cioè la presenza o l'assenza di un virus. Se l'output è "rilevato", il virus è e continua ad essere attivo. La designazione "non rilevato" indica l'assenza di un virus o la sua piccola quantità. Con questo indicatore, si dovrebbe tenere presente che la sensibilità analitica dei sistemi diagnostici è diversa e che l'epatite C dell'RNA potrebbe essere ancora nel sangue, ma non manifestarsi nell'analisi.

Un metodo PCR particolarmente sensibile rivela l'ultra epatite C anche in piccole quantità. Viene utilizzato uno studio di ibridazione a fluorescenza, che è molte volte superiore rispetto ai sistemi PCR standard. Il metodo è utilizzato in diversi casi:

  • sospette forme nascoste di epatite C;
  • La diagnostica della PCR non ha confermato l'agente patogeno, ma ci sono anticorpi;
  • in caso di recupero;
  • per rilevare l'infezione precoce.
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Analisi di decodifica

La decodifica PCR dell'HCV influisce sulla decisione finale quando si effettua una diagnosi, in particolare con il metodo ultrametod. Il principale svantaggio di questo studio è la stretta aderenza alle condizioni sterili per il campione e i materiali. Una leggera deviazione a volte mostra conclusioni analitiche imprecise, complica la diagnosi e il successivo trattamento. L'analisi della PCR per la determinazione dell'RNA dell'epatite non sempre mostra con sicurezza un quadro della malattia, a volte sono consentite imprecisioni e in entrambe le direzioni.

Diagnosticare il virus dell'epatite, si consiglia di utilizzare un esame completo.

Norma degli indicatori

L'assenza di anticorpi JgM contro l'epatite C virale nei risultati dello studio è considerata la norma nell'analisi della reazione a catena della polimerasi. Allo stesso tempo, i risultati dell'analisi sierologica indicano la presenza di anticorpi contro il virus C e questo è anche entro il range normale. Una definizione qualitativa non mostra l'intensità della malattia, ma rivela solo l'agente eziologico dell'epatite C nell'RNA. Questa analisi viene ripetuta dopo il trattamento per confermare il recupero effettivo.

deviazioni

Se sono presenti anticorpi JgM per HCV RNA, questo indica un'infezione in via di sviluppo. La malattia procede allo stesso tempo in modo acuto o cronico, manifestandosi in diverse fasi. Se viene registrata una diminuzione del numero di anticorpi, l'analisi indicherà che i risultati del trattamento sono stati raggiunti durante il recupero. Vi sono casi estremamente rari di risultati falsi positivi nella diagnostica. Si trovano nelle donne durante la gravidanza e nelle persone con altre malattie infettive.

Diagnostica PCR per epatite C

L'epatite C è un'infiammazione delle cellule del fegato che si verifica a seguito dell'infezione con il virus HCV (epatite C) attraverso il contatto con il sangue di una persona infetta. Il codice genetico del flavivirus HCV è trasportato da una molecola di RNA (acido ribonuclenico) contenuta nella struttura del virus. Questo fenomeno potenzialmente letale si distingue per segretezza nella fase iniziale della patologia. L'intervallo di tempo tra l'infezione e l'insorgenza dei sintomi (la risposta del sistema immunitario) può variare da un mese a sei mesi. Di norma, la malattia assume una forma cronica ed è difficile da curare.

La medicina moderna consente di diagnosticare patologie con danni al fegato minori. I metodi diagnostici più comuni ed efficaci includono l'analisi PCR. Considera in questo articolo che cos'è e che tipo di esso esiste.

Qual è lo studio

L'analisi PCR per l'epatite C è un esame di laboratorio che rileva il flavirus, il materiale genetico dell'acido ribonuclelenico (RNA). Determina il numero di molecole di RNA nel sangue, la qualità del materiale biologico, il tipo genetico di flavour HCV.

Il metodo PCR per l'epatite C rende possibile rilevare la quantità minima di flavirus prima della formazione di anticorpi, di norma, subito dopo l'infezione.

Lo studio viene spesso definito come analisi dell'RNA, in quanto rileva particelle di acido ribonucleico con dimensioni di 30-60 nm contenute nel flavavirus.

Lo studio è condotto come segue: a stomaco vuoto, il paziente dà sangue da una vena, che viene poi testato con vari metodi:

  • La PCR in tempo reale viene eseguita in modo automatico chiuso e presenta un limite inferiore per la rilevazione del virus dell'RNA, pari a 15 IU / ml;
  • COBAS AMPLICOR con una sensibilità di 50-100 UI / ml.

Maggiore è la soglia di sensibilità della tecnica diagnostica, maggiori sono le possibilità di trovare il contenuto virale più basso nel materiale biologico sotto esame.

Quali tipi di analisi utilizzare

Un'analisi che è stata utilizzata con successo per diversi decenni è chiamata epatite PCR e può essere rilevata abbastanza facilmente e rapidamente. In medicina, ci sono due metodi di reazione, fondamentalmente diversi l'uno dall'altro:

  • il metodo qualitativo rivela la presenza nel materiale biologico della fonte genetica di un virus specifico;
  • l'analisi quantitativa misura il numero di materia genetica, che consente di determinare lo stadio della patologia o valutare l'efficacia del decorso terapeutico;
  • la genotipizzazione determina il tipo di virus presente nel corpo.

In generale, un esame del sangue aiuta a identificare la natura della viremia e il tipo genetico del patogeno. Di norma, la ricerca viene eseguita 1 volta in base al grado di sensibilità del sistema diagnostico. Se necessario, ripetere il test utilizzando un reagente ultrasensibile.

PCR di alta qualità

Cos'è l'RNA PCR di alta qualità per l'epatite C? L'essenza della reazione risiede nella presenza della sequenza dell'epatite RNA e la reazione è possibile solo in presenza di proteine ​​virali di etimologia simile nell'ELISA. Nel processo di confronto, vengono rilevati il ​​carico e il possibile danno all'area del fegato.

Una caratteristica distintiva di questo metodo è la capacità di rilevare anche la presenza di un gene separato.

Va notato che, dopo aver ricevuto i risultati dei test PCR e ELISA, il paziente richiede un trattamento appropriato, indipendentemente dal risultato finale immunologico. Positivo indica infezione e PCR negativo indica un numero ridotto di particelle virali rispetto al livello di sensibilità.

Esistono diverse condizioni che influenzano la produzione di PCR e ELISA negativi:

  • mancanza di adeguate condizioni di raccolta dei materiali;
  • l'analisi risultante contiene contaminazione;
  • in caso di una precoce iniezione di eparina al paziente.

Il paziente non ha bisogno di seguire determinate regole per il prelievo di sangue per l'analisi PCR, in questo caso la qualità di questa analisi dipende dal professionista medico che esegue la procedura. La capacità di stabilire la presenza della malattia (specialmente nella forma acuta) appare entro poche settimane dopo l'infezione.

Analisi quantitativa

Un test quantitativo è raccomandato per il rilevamento della carica virale immediatamente prima della formazione di un'ulteriore terapia e della reazione del corpo. Il processo di prelievo del sangue viene eseguito in modo simile con PCR e ELISA di alta qualità, l'unica condizione è l'assenza della possibilità di fumare il paziente prima della procedura.

Per quanto riguarda le caratteristiche ottenute dallo studio dei dati, il carico aumentato è caratterizzato da indicatori da 800000 UI / ml, basso - 400000 UI / ml. La presenza di un virus nel corpo del paziente è indicata dalla PCR perché l'epatite non è un test qualitativo negativo.

Questo tipo di ricerca rende possibile determinare quanto sia pericoloso il paziente per le persone che lo circondano. Ad esempio, l'identificazione di un livello elevato indica una maggiore infettività del paziente. Inoltre, i risultati dell'analisi aiutano a formulare l'ulteriore trattamento più efficace e determinano quanto la terapia esistente è considerata efficace.

La rapida risposta negativa dei test indica il successo della tecnica scelta e quella lenta indica la necessità di aggiustamenti e l'uso di un trattamento multi-sfaccettato.

Il processo di assunzione della procedura di analisi dipende dal giorno specifico del decorso della malattia. La prima determinazione viene effettuata il primo giorno dopo che il paziente è ricoverato in ospedale, quindi la procedura viene ripetuta alle 4, 12 e 24 settimane dopo l'assunzione dei farmaci.

Pertanto, un'analisi quantitativa mostra quale terapia sia la più efficace, la durata della terapia disponibile e il pericolo del paziente in relazione ad altre persone.

genotipizzazione

Nello studio dell'analisi dei materiali, è importante determinare l'accuratezza del genotipo del virus, che ha luogo. Attualmente, ci sono 11 varietà del virus dell'epatite C, che a loro volta includono alcune sottospecie.

Tutte queste specie rispondono in modo diverso a trattamenti diversi, con singole varietà assolutamente resistenti a molti farmaci.

Il genotipo consente di determinare e mostrare lo stato del fegato. Non è raro che i risultati siano "non digitati" nei risultati, il che significa che il virus nel sangue del paziente non viene rilevato da questo sistema di test. Questo può essere rilevato se un particolare genotipo non corrisponde a questa zona. In tale situazione, l'analisi viene ripetuta più volte e viene utilizzato un sistema più sensibile per studiare il materiale.

Metodo Ultra Sensibile

Il metodo ultrasensibile è necessario in alcuni casi quando la diagnosi di epatite non può essere eseguita con altri metodi e quando effettuare un'analisi è determinata dal medico curante:

  • se si sospetta la presenza di virus dell'epatite C in pazienti con una varietà nascosta della malattia;
  • la presenza di anticorpi contro il virus dell'epatite C, non confermata dalla diagnostica PCR;
  • al fine di determinare la qualità dell'efficacia del metodo di trattamento scelto e confermare l'eliminazione della malattia.

La sensibilità di questo metodo è molto più alta di quella comunemente usata, tuttavia, questo metodo non esclude l'ottenimento di risultati falsi, sia positivi che negativi. In tale situazione è importante controllare la qualità della procedura e la possibilità di contaminazione del materiale stesso.

Spiegazione dell'analisi PCR

La decodifica dell'analisi viene effettuata sulla base dei materiali presentati, mentre i risultati della ricerca di laboratorio includono alcuni dati sopra descritti.

Il trascritto può includere una reazione a catena della polimerasi PCR positiva e un ELISA negativo nel dosaggio, il che significa che il paziente non ha segni di epatite C nel sangue, ma in passato ha trasferito la forma acuta della malattia. Di norma, durante la diagnosi, gli specialisti ricorrono all'uso di indicatori di test della PCR.

Riassumendo quanto sopra, si può concludere che durante l'analisi è importante osservare tutte le regole e le raccomandazioni in modo che i risultati ottenuti siano il più precisi possibile e sulla base dei dati ottenuti è possibile determinare l'efficacia della terapia utilizzata e l'ulteriore possibilità di recupero completo.

Condurre un'analisi PCR per l'epatite C e decodificare i risultati

L'analisi PCR dell'epatite C è uno studio il cui scopo principale è identificare il materiale genetico dell'agente causale. L'analisi rivela l'agente eziologico della malattia mediante l'uso della reazione a catena della polimerasi. Questa diagnosi ha un alto grado di precisione, specificità per rilevare l'assenza o la presenza di un'infezione virale.

L'essenza della diagnosi

Per effettuare un'analisi PCR per la determinazione del virus dell'epatite C da un paziente, viene prelevato sangue venoso, che potenzialmente contiene l'HCV dell'RNA (acido ribonucleico) del virus desiderato.

Il test PCR per l'epatite C implica una procedura per l'aggiunta alle particelle di sangue del paziente:

  • primer (brevi regioni artificialmente sintetizzate del gene necessario);
  • enzima speciale (RNA polimerasi).

Dopo il campionamento, il materiale biologico viene inviato per la ricerca al laboratorio. Una porzione di sangue è necessaria per l'analisi PCR diretta, la seconda è inviata per essere testata da ELISA. L'enzima è in grado in breve tempo di aumentare il numero di materiale genetico del virus del patogeno. In un apparecchio speciale, vengono eseguiti diversi cicli di processi di riscaldamento e raffreddamento. Nella fase finale, il materiale ottenuto viene confrontato con i geni del virus e viene fatta una conclusione sulla presenza o assenza di patologia nel corpo del paziente.

L'essenza e la condotta dell'analisi PCR in laboratorio. Girato da SiberianMedicalLaboratory.

Tipi di ricerca

Esistono 3 tipi di diagnostica, che consentono di determinare la presenza del virus dell'epatite C nel corpo umano:

  • genotipizzazione;
  • qualità;
  • quantitativa.

Metodo qualitativo

La diagnosi di epatite C con un metodo qualitativo è applicabile ai pazienti in cui gli anticorpi al virus vengono rilevati nel test del sangue. Nel caso della presenza della fase acuta dell'HCV RNA, tali misure diagnostiche possono determinare la presenza della malattia entro 1-2 settimane dopo l'infezione. Durante questo periodo, gli anticorpi contro l'epatite C potrebbero non essere ancora sviluppati.

Metodo quantitativo

Viene utilizzato un metodo diagnostico quantitativo per determinare la concentrazione del virus nei campioni di sangue. Tale test per la viremia (grado di concentrazione) rende possibile determinare con precisione il numero di unità di RNA virale. Il risultato finale è espresso nel volume corrispondente. Se parliamo di analisi quantitativa, gli indicatori sono misurati in 1 ml (1 cubetto Cm).

Il parametro della carica virale indica il livello di infettività della malattia, cioè riflette il grado di "infettività" del paziente. In pratica, questo significa che maggiore è la concentrazione del virus nel sangue, maggiori sono le probabilità che il paziente infetti altri con epatite C. Un metodo di ricerca quantitativo consente anche di stabilire la qualità e l'efficacia del trattamento.

genotipizzazione

La genotipizzazione rivela mutazioni dell'agente causale della malattia. Prima di prescrivere un piano di trattamento, viene determinato il genotipo del virus: la qualità e la durata della terapia dipendono da questo. Ad esempio, nel trattamento della malattia di tipo I, l'efficienza è del 60%, nel caso del tipo II, III - circa l'80%.

Benefici dell'analisi PCR dell'epatite

Tra i principali vantaggi della procedura vi sono:

  1. La possibilità di una diagnosi precoce. L'analisi PCR è in grado di rilevare la presenza di un virus nelle prime fasi dell'infezione.
  2. Risultati di errore bassi. La risorsa biologica studiata consente di diagnosticare una sezione di materiale genetico che è caratteristico di un solo tipo di infezione virale. Questa circostanza consente di evitare risultati falsi diagnostici.
  3. Alto grado di sensibilità. L'analisi PCR è in grado di rilevare l'RNA del virus in piccole quantità, il che rende possibile monitorare le infezioni latenti nel tempo.

Indicazioni per

I test per la PCR per l'epatite C sono necessari, se disponibili:

  • avere contatti con persone malate, che potrebbero portare a infezioni;
  • sintomi di cirrosi epatica (ingrossamento della milza, alterazioni non caratteristiche della dimensione del fegato, rilevamento di un plesso venoso sull'addome sotto la pelle);
  • risultati positivi di ELISA;
  • aumento dell'attività di AST e ALT (manifestata nell'analisi biochimica del sangue);
  • la necessità di controllare la condotta della terapia antivirale;
  • la fase iniziale del trattamento per la necessità di stabilire una carica virale;
  • eseguire la fase finale della terapia per escludere possibili recidive;
  • il paziente ha l'epatite B per escludere lo sviluppo di un danno epatico misto.

Come prepararsi alla donazione di sangue per la ricerca sulla PCR

La preparazione per l'analisi PCR include le seguenti raccomandazioni:

  • il sangue è preso al mattino;
  • l'analisi viene eseguita a stomaco vuoto, quindi è consigliabile fare una pausa tra l'ultima assunzione di cibo di 8-10 ore;
  • alcuni giorni prima della diagnosi dovrebbero essere esclusi cibi grassi, piccanti e fritti, bevande alcoliche e fumo;
  • un giorno prima dell'analisi si dovrebbe astenersi dallo sforzo fisico pesante, escludere le lezioni in palestra o in piscina.

Risultati dell'analisi: norme e deviazioni

L'analisi in sé non è a lungo termine e l'esperto epatologo o specialista in malattie infettive altamente qualificato decifra i risultati della PCR per l'epatite C. Sulla base dei risultati dell'analisi, il paziente viene diagnosticato.

Per decifrare correttamente i risultati del sondaggio, vengono presi in considerazione i seguenti indicatori:

  • analisi biochimica del sangue;
  • dati ad ultrasuoni;
  • risultati della biopsia.

Interpretazione dell'analisi quantitativa

Quando si ottengono i risultati dell'analisi quantitativa della PCR, vengono presi in considerazione i seguenti indicatori:

Diagnosi con PCR per l'epatite C

Non tutti sanno perché utilizzano il metodo diagnostico della PCR per l'epatite C. Uno dei gruppi più comuni di malattie sono le malattie infettive del tratto gastrointestinale. Lo stomaco (ulcere), l'intestino (colite, enterite) e il fegato (epatite) sono più comunemente colpiti.

Tra tutti gli organi sopra elencati, il peso maggiore viene imposto al fegato. Nel corpo, il ruolo del fegato è estremamente importante:

  1. Quasi tutte le reazioni metaboliche avvengono nel fegato (è qui che si formano tutti i tipi di componenti vitali che permettono al corpo di funzionare pienamente).
  2. Il fegato è il principale organo di disintossicazione. Con il suo aiuto (in particolare attraverso la bile), vengono rimossi molti substrati che possono causare intossicazione e portare a gravi conseguenze.

Sfortunatamente, molte persone non controllano la loro salute, motivo per cui il fegato inizia a soffrire. Di solito si sviluppano epatiti di varie eziologie (virali, tossiche).

Definizione di epatite

L'epatite virale occupa un posto importante tra le malattie del fegato. La gravità del decorso della malattia, la complessità del trattamento li mettono al primo posto nella patologia dell'altra natura di questo organo.

Tutta l'epatite è divisa in acuta e cronica. Le epatiti A e B sono classificate come acute, tra le quali l'epatite C cronica.

Questa malattia è causata dal virus dell'epatite C. Una caratteristica è che la malattia può durare a lungo senza manifestazioni cliniche.

È trasmesso principalmente attraverso il sangue. Con il flusso di sangue, il virus entra nel fegato, dove inizia a moltiplicarsi nelle sue cellule. Come risultato dell'accumulo di virioni, si verifica la distruzione dell'epatocita infetto. In risposta a questo, gli anticorpi cominciano a essere prodotti, che iniziano ad attaccare i resti di epatociti. A causa di ciò, una piscina contro le cellule del fegato si sviluppa nel tempo, il che aggrava il decorso della malattia.

A causa del fatto che la malattia è lieve asintomatica o asintomatica e i segni clinici compaiono solo quando le cellule sono significativamente colpite, questa malattia richiede la creazione di metodi diagnostici per rilevare la sua presenza e adottare misure appropriate.

Diagnosi dell'epatite C: analisi qualitativa e quantitativa

Attualmente, per la diagnosi dell'epatite C, vengono utilizzati metodi quali la biopsia epatica e l'immunogramma.

Permettono di determinare direttamente la presenza di epatociti infetti (campioni di biopsia epatica) o anticorpi specifici contro le cellule interessate (immunogramma). Tuttavia, esiste un metodo che consente di determinare in modo affidabile la presenza del virus stesso. Questa è la reazione a catena della polimerasi PCR.

L'essenza di questo metodo sta nel fatto che in determinate condizioni, si verifica la produzione di catene di RNA. Ciò è dovuto al fatto che ci sono frammenti di una particella virale nel sangue o la biopsia in questione. Quando li si collega con alcune molecole nel mezzo, si verifica la sintesi di catene complementari all'RNA virale. Nella loro successiva analisi e confronto con la nota sequenza nucleotidica del virus dell'epatite C, è possibile determinare se il virus è presente nel corpo e se è presente un danno al fegato.

La PCR viene eseguita dopo il rilevamento di anticorpi specifici contro il virus dell'epatite nel sangue. Dopo il test viene eseguito il risultato: l'RNA viene "rilevato" o "non rilevato". Occasionalmente può dire "non abbastanza materiale" - in questo caso è necessario ripetere il test per l'epatite C.

Se il numero di particelle virali è inferiore all'importo minimo richiesto, allora possiamo dire che non c'è epatite e che quantità minime di materiale genetico potrebbero essere "confuse" a causa della mimica di materiale genetico o di sequenze di nucleotidi che potrebbero coincidere con il virus.

  1. Con la PCR, è possibile osservare un risultato negativo quando nel sangue sono presenti particelle virali, ma sono così piccole (l'infezione si è verificata di recente o l'analisi è stata preceduta da una terapia antivirale intensiva a lungo termine) che il sistema di test non è stato in grado di determinare normalmente la concentrazione. RNA - "non rilevato."
  2. Se la PCR ha un risultato positivo, ci sono così tante particelle virali nel sangue che il loro numero supera la soglia di sensibilità inferiore del sistema di test. In questo caso, c'è un alto rischio di sviluppare un processo infettivo (o è già presente in uno stadio piuttosto avanzato). Di solito un'elevata quantità di virus è già un'indicazione per il trattamento e il successivo trapianto di fegato.

A volte un test può diventare falso positivo o falso negativo.

Un risultato di PCR falso negativo di epatite è osservato nel caso in cui alcuni componenti sono presenti nel mezzo di reazione che inibiscono la formazione di copie della particella virale. Per questo motivo, non è possibile ottenere un'immagine reale dello stato del sangue, che contribuisca al passaggio del virus e alla progressione della malattia. La presenza di eparina nel sangue può anche influenzare la reazione (riducendo la viscosità relativa del sangue). L'interpretazione errata dell'analisi è possibile anche quando le condizioni di trasporto e conservazione del materiale in esame non sono state soddisfatte.

Risultati falsi positivi, quando viene diagnosticata l'epatite C, la PCR si verifica più spesso quando la provetta o l'ambiente di lavoro sono contaminati. Inoltre, si possono osservare risultati positivi con la presenza di virus dell'epatite di altri gruppi (a causa di una reazione crociata).

Analisi qualitativa della PCR per il rilevamento dell'epatite C

Anche la presenza nel sangue di un gran numero di crioglobuline influisce direttamente sulla condotta della PCR. Per questo motivo è indispensabile determinare la loro concentrazione nel sangue prima di testare l'epatite C al fine di rilevare una distorsione del risultato in anticipo e prevenirlo.

Dopo questi test, diventa chiaro se ci sono particelle virali nel sangue. Nel determinarli, si raccomanda di iniziare immediatamente la terapia antivirale per rallentare la progressione del processo. A differenza dell'epatite B, non esiste una cura completa per l'epatite C; la malattia passa solo nello stadio latente e inizia a procedere più lentamente. Il danno al fegato è inevitabile. Nell'ultima fase del processo, quando il fegato non riesce più a far fronte alla sua funzione, potrebbe richiedere il suo trapianto.

Il trattamento viene effettuato principalmente con due farmaci: interferone e ribavirina.

Dimostrato la loro efficacia nel rallentare il processo di sconfitta degli epatociti. Lungo la strada, la terapia infusionale è necessariamente prescritta per facilitare il lavoro del fegato.

Tutti i pazienti che hanno visto un aumento del numero di particelle virali nel sangue sono necessariamente registrati con un epatologo. Diverse volte all'anno, si consiglia di sottoporsi a un esame preventivo per determinare la progressione del processo e la rilevazione tempestiva delle indicazioni per il trapianto. Inoltre, è possibile utilizzare epatoprotettori, sebbene le opinioni dei medici differiscano in qualche modo. Alcuni credono che questi farmaci ti consentano di sospendere il processo e proteggere gli epatociti ancora non colpiti; altri sono convinti che non è sensato assumerli e deve essere effettuata una terapia antivirale intensiva.

Pertanto, l'epatite C appartiene alla categoria delle malattie, la cui identificazione presenta alcune difficoltà. Migliorare i metodi diagnostici e gli esami preventivi tempestivi ridurranno l'incidenza di questa malattia. Altrettanto importante è la prevenzione di questa malattia. Bisogna evitare accuratamente il contatto con il sangue, rifiutarsi di assumere droghe, solo allora questa malattia sarà sradicata. La cosa principale nella prevenzione e nel trattamento è l'atteggiamento consapevole del paziente nei confronti della loro salute.

Studio PCR sull'epatite C: tipi, indicazioni, trascrizione

L'epatite C virale è una malattia grave che si verifica con danni al fegato. Nell'otto percento dei pazienti, diventa cronico. Il virus si moltiplica nelle cellule del fegato - gli epatociti - e causa la loro morte. Il tessuto morto viene sostituito da focolai di tessuto connettivo, si sviluppa la fibrosi.

Man mano che la fibrosi si sviluppa, il fegato non è in grado di svolgere le sue funzioni, inizia la cirrosi epatica, che è pericolosa per le sue complicanze: aumento della pressione nel sistema delle vene portale, sanguinamento gastrointestinale, alterata coagulazione del sangue, alterazioni mentali dovute al danneggiamento dei nuclei cerebrali da parte di prodotti tossici.

La causa della malattia è l'infezione da parte di un virus della famiglia Flaviviridae, che appartiene al tipo di virus a RNA. Ciò significa che il materiale genetico mediante il quale le proteine ​​del patogeno sono sintetizzate è codificato nella molecola di acido ribonucleico. L'infezione avviene attraverso il sangue, sessualmente, e da una donna incinta al feto. Sfortunatamente, una quantità sufficiente di tempo può passare tra l'infezione e l'inizio della produzione di anticorpi - da due settimane a sei mesi. Ciò non consente di determinare l'infezione da ELISA e iniziare il trattamento in una fase precoce.

Cos'è l'analisi PCR?

La PCR è un metodo di analisi molecolare, che consente di rilevare il materiale genetico del patogeno già nella prima settimana dopo l'infezione con l'aiuto della reazione a catena della polimerasi. Lo studio ha un'elevata specificità, accuratezza e consente non solo di determinare la presenza o l'assenza del virus, ma anche la sua concentrazione e il genotipo.

Per lo studio, viene prelevato il sangue di un paziente in cui l'RNA del virus può potenzialmente essere localizzato. I primer vengono aggiunti al sangue - regioni artificialmente sintetizzate del gene desiderato di piccola lunghezza, e l'RNA polimerasi è un enzima speciale che aumenta ripetutamente la quantità del materiale genetico del patogeno. Utilizzando un apparecchio speciale, vengono eseguiti diversi cicli di riscaldamento e raffreddamento. Quindi il materiale viene analizzato e confrontato con i geni noti del virus, sulla base dei quali viene formulata una conclusione sulla presenza o assenza di infezione.

Tipi di analisi PCR per l'epatite C

Esistono tre tipi di analisi PCR:

    Analisi qualitativa della PCR. La prima fase dello studio. Ti permette di identificare il materiale genetico del virus nel sangue.

Analisi quantitativa della PCR. Consente di determinare la carica virale - la concentrazione del materiale genetico del patogeno in un millilitro di sangue. Questo studio viene condotto prima dell'inizio della terapia, e poi nella prima, quarta, dodicesima e (se il corso è lungo) ventiquattr'ore della settimana di trattamento per valutare la sua efficacia.

  • Genotipizzazione. L'agente eziologico dell'epatite C si modifica spesso e rapidamente. C'erano sette varianti di questo genotipo di virus trovato sul pianeta. In Russia, il primo, il secondo e il terzo tipo sono comuni. Ognuno dei genotipi ha una diversa resistenza alla terapia, per esempio, l'efficacia del trattamento del primo tipo è del sessanta per cento, e per il secondo e il terzo questa cifra raggiunge ottantacinque. Pertanto, al fine di selezionare i farmaci appropriati e prescrivere un ciclo di trattamento di durata sufficiente, è necessario determinare esattamente quale tipo di virus è stato infettato dal paziente.
  • Indicazioni per l'analisi PCR per l'epatite C

    Lo studio PCR è prescritto nei seguenti casi:

    • contatto con una persona ammalata alla quale potrebbe verificarsi un'infezione;
    • saggio immunoenzimatico positivo;
    • segni di cirrosi epatica: un cambiamento delle dimensioni del fegato, una milza ingrossata, la comparsa di un plesso venoso sottocutaneo sull'addome;
    • la comparsa di sintomi di danno epatico: dolore all'addome destro, ingiallimento della pelle;
    • aumento dell'attività di ALT e AST nell'analisi biochimica del sangue;
    • prima di iniziare il trattamento per determinare la carica virale;
    • monitorare l'efficacia della terapia antivirale;
    • dopo il trattamento per controllare la ricaduta;
    • in presenza di diagnosi di epatite B, per escludere un danno epatico misto.

    Spiegazione degli studi PCR sull'epatite C

    La decodifica dell'analisi PCR e del saggio immunologico enzimatico per l'epatite C dovrebbe essere eseguita da un epatologo o da uno specialista in malattie infettive. L'analisi dei risultati della PCR è necessaria in combinazione con i dati dell'analisi biochimica del sangue, della biopsia e degli ultrasuoni. Solo un medico qualificato sarà in grado di analizzare i risultati della ricerca e, sulla base di essi, prescriverà il trattamento corretto.

    Decodifica dell'analisi qualitativa.

    Nel materiale biologico analizzato trovato il materiale genetico del patogeno. Infezione confermata

    L'infezione è assente o la quantità di RNA patogeno è inferiore al limite di sensibilità.

    Decodifica dell'analisi quantitativa.

    Tasso normale per persone sane. Significa che il materiale di test non contiene RNA dell'epatite C o la sua concentrazione è inferiore alla soglia di sensibilità dello studio.

    La concentrazione di RNA è inferiore all'intervallo di quantificazione. Questi risultati sono interpretati molto attentamente, li correlano con i dati di altri studi, spesso riesaminano.

    Il livello di carica virale a una determinata concentrazione è considerato basso. Di solito, una diminuzione della quantità di virus significa che la terapia ha successo.

    Più di 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Il livello di carica virale a una data concentrazione è considerato alto.

    Più di 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    La quantità di RNA è superiore al limite superiore dell'intervallo di quantificazione. È impossibile trarre conclusioni sul grado di carica virale con questo risultato. Solitamente in tali casi, il test viene ripetuto con la diluizione di un campione di sangue.

    Genotipizzazione decodifica.

    RNA di un genotipo specifico rilevato

    Il virus dell'epatite C di un determinato genotipo e sottotipo è stato rilevato nel biomateriale. Il risultato è codificato in numeri romani e lettere latine, ad esempio - 1a, 2b. In totale ci sono sette genotipi e sessantasette sottotipi, ma in Russia ci sono solo tre primi tipi.

    Rilevato RNA del virus dell'epatite C

    L'RNA è stato trovato nel sangue di un raro genotipo per la Russia, che non può essere attribuito al primo, al secondo o al terzo tipo. Sono necessarie ulteriori ricerche

    Questo risultato indica che il paziente è sano o che la quantità di RNA patogeno è troppo piccola.

    È possibile che l'analisi PCR per l'epatite C sia negativa e il saggio immunoassorbente legato all'enzima riconosca gli anticorpi contro il virus. Ciò significa che il paziente ha avuto un'epatite C acuta e si è ripreso da solo. Circa venti casi di infezione provocano un recupero spontaneo se il corpo del paziente ha una resistenza sufficiente all'infezione.

    Sebbene la PCR sia estremamente accurata, i suoi risultati potrebbero essere distorti nelle seguenti situazioni:

    • il sangue è stato trasportato in laboratorio in condizioni inadeguate, la temperatura è stata violata;
    • il campione di biomateriale era contaminato;
    • c'erano tracce residue di eparina e altri anticoagulanti nel sangue;
    • Gli investigatori sono stati trovati per essere inibitori - sostanze che rallentano o fermano la reazione a catena della polimerasi.

    I vantaggi della PCR rispetto ad altri metodi

      Diagnosi nelle prime fasi. PCR rileva il materiale genetico dell'agente causale. Utilizzando l'analisi di immunofluorescenza, è possibile identificare solo le immunoglobuline, sostanze che il corpo produce in risposta a un'infezione. In caso di infezione da epatite C, il divario tra l'infezione e l'insorgenza della risposta immunitaria può essere di diverse settimane e mesi, in questo momento l'ELISA sarà inefficace. La PCR darà una risposta nella prima settimana dopo l'infezione.

    Bassa probabilità di errore. Nel materiale in studio determinare l'area del materiale genetico, che è caratteristico di un solo tipo di agenti patogeni. Questo elimina risultati falsi. Quando sono possibili errori ELISA, poiché lo stesso tipo di anticorpo può essere rilasciato contro diversi virus - tali anticorpi sono chiamati anticorpi.

  • Alta sensibilità La PCR consente di rilevare l'RNA dell'agente causativo anche in quantità minime. Questo rende possibile identificare le infezioni nascoste.
  • Come prepararsi alla donazione di sangue per la ricerca sulla PCR

    Per l'analisi PCR dell'epatite C, viene raccolto sangue venoso. Di solito, due porzioni di sangue vengono prelevate dalla vena del paziente alla volta: il primo viene inviato per la PCR e il secondo da ELISA. Questo viene fatto per valutare con maggiore precisione quanto un paziente è stato infettato da un virus e in che modo l'immunità combatte contro di esso.

    Di solito al paziente è richiesto di seguire le seguenti regole:

    • un esame del sangue viene effettuato al mattino;
    • L'intervallo tra l'ultimo pasto e la donazione di sangue dovrebbe essere da otto a dieci ore;
    • due o tre giorni prima dell'analisi, è necessario abbandonare cibi fritti e grassi e alcol;
    • per ventiquattro ore prima dell'analisi, il paziente dovrebbe evitare lo sforzo fisico: non portare pesi, non andare in palestra o in piscina.

    Quantitativo di PCR per l'epatite C

    Il virus dell'epatite C è in grado di moltiplicarsi nelle cellule del sangue e causare malattie linfoproliferative. A causa di molteplici mutazioni, la difesa immunitaria del corpo si indebolisce, appaiono genotipi e sottotipi del virus. Con la determinazione corretta e tempestiva di un tipo specifico, dipende l'efficacia della terapia antivirale. Il pericolo di infezione è che la malattia è asintomatica. Solo il 15% dei 100 può manifestare nausea e vomito, perdita di peso e febbre.

    Rilevazione del virus dell'epatite C

    Il tasso standard di epatite C è nelle dimensioni da 40 a 60 nm, con la maggior parte dei lipidi, danni al fegato derivanti da un decorso acuto o cronico della malattia. L'epatite C, vale a dire il virus RNA della famiglia Togaviridae, è estremamente resistente, viene trasmessa mediante trasfusioni di sangue o l'uso di articoli non sterili, forniture di igiene improprie, ecc. L'analisi quantitativa consente di esaminare il sangue e identificare la struttura genetica del virus infetto.

    Per l'epatite C e i suoi genotipi sono stati determinati, condurre un'analisi quantitativa. A seconda dell'analizzatore è possibile determinare i tre livelli di incidenza del virus dell'RNA.

    I sottotipi possono produrre varie modifiche, quindi la specificità e la sensibilità dell'analizzatore devono essere al cento per cento. Oltre a rilevare la malattia in un paziente, è necessario determinare il grado della sua gravità. Alcuni laboratori non hanno tutti i dati sulla decodifica del virus RNA, esiste la possibilità di una falsa risposta positiva.

    La ricerca sull'epatite C sarà più accurata quando si studiano questi indicatori:

    AlAT, AsAT; Scudo alcalino; LDH.

    Attirando l'attenzione sui risultati di questi indicatori e sulla condizione generale del corpo, viene visualizzato un risultato che mostra il grado di infezione, la forma e il numero di cellule epatite C nel sangue. Ciò contribuisce al processo di guarigione e all'efficacia della terapia antivirale.

    Tipi di analisi per l'epatite C

    Una reazione a catena multi-dimensionale (PCR) dà un'idea del numero di particelle di DNA nelle analisi dei pazienti effettuate, identificando correttamente l'agente infettivo.

    Possono verificarsi agenti causativi di malattie infettive. Un'infezione del fegato, come l'epatite C, è curabile nei nostri tempi quando viene rilevata tempestivamente. Se si sospetta un virus, viene eseguita l'analisi PCR.

    Dato che a lungo i sintomi del virus possono essere mascherati, una persona potrebbe non sentire l'insorgere della malattia. Ma con un esame approfondito nel 60-70% dei casi, viene rilevata l'epatite C, la prima analisi, che è ELISA, seguita dalla diagnosi PCR. L'analisi viene effettuata in determinati periodi per determinare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento appropriato. Per farne a meno, senza applicare tutte queste procedure, è possibile essere vaccinati contro l'epatite.

    L'analisi, inclusa la diagnostica PCR, fornisce un quadro della malattia, quanto è attivo il virus in diversi periodi di sviluppo.

    Innanzitutto, c'è un'analisi qualitativa che conferma solo l'ipotesi sull'infezione e quindi un quantitativo, determinando il carico sul fegato. L'opzione ideale sarebbe un risultato negativo per l'epatite C nel materiale genetico del paziente.

    Analisi qualitativa e quantitativa

    Ci sono analisi qualitative e quantitative. L'essenza del primo è che determina la presenza di infezione nel sangue. E questo significa che il virus infetta cellule epatiche sane. Quando si trovano anticorpi contro l'epatite C in un paziente, viene immediatamente eseguito un test qualitativo. Il tasso che il risultato dovrebbe dare è "non rilevato nel sangue". Quando si determina la concentrazione di un virus, è necessario conoscere la sensibilità del sistema diagnostico, poiché le persone sottoposte a terapia antivirale possono eseguire l'analisi. Il grado di sensibilità dell'analizzatore non deve essere inferiore a 50 IU / ml.

    Quando viene rilevato un virus, viene eseguita un'analisi quantitativa, in altre parole, la carica virale, che determina la concentrazione del virus nel sangue e la gravità della malattia.

    L'RNA virale, che è in una certa quantità di sangue, è definito come la norma al ritmo di 1 ml per 1 centimetro cubico. Dopo aver quantificato la carica virale, è possibile valutare il grado di infezione dell'ambiente ancora non infetto. Non appena la concentrazione di epatite C sale nel sangue, è necessario isolare dall'ambiente.

    È importante nelle prime fasi rilevare il grado di concentrazione dell'epatite, al fine di determinare il ritmo della riabilitazione. Se il tasso di epatite C è superato di oltre 800 mila IU / ml, è considerato troppo alto, con un aumento fino a un milione - critico. Se l'intervallo quantitativo è inferiore a 400 mila IU / ml, si ritiene che l'infezione di quelli intorno sarà meno probabile. Questa cifra chiarisce che l'epatite C è presente nel corpo in dosi molto piccole. L'analisi non è stata in grado di determinare il valore quantitativo delle particelle di RNA del virus, per cui è stata rinominata diverse volte per una diagnosi accurata.

    Risultati dell'analisi quantitativa

    Il compito di determinare la quantità di carica virale nel sangue di un paziente è l'identificazione del grado di infezione per gli altri.

    Test dell'epatite C

    consente di valutare l'efficacia della terapia antivirale, il livello di infettività e il numero di tessuti infetti.

    È importante prevenire la progressione della malattia, adottare misure preventive nel tempo, prescrivere il trattamento corretto basato sulla diagnostica della PCR. Se, in base ai risultati, il livello di carica virale è inferiore a 400 mila IU / ml, la concentrazione potrebbe essere minima, il che indica un possibile recupero completo. La norma per un risultato positivo è l'assenza di infezione.

    I risultati dell'analisi PCR:

    Una risposta positiva significa un'infezione nel materiale biologico. L'analisi consente di determinare il numero esatto di cellule infette. Una risposta negativa indica l'assenza di infezione, che viene attentamente ricercata nel corpo.

    Il metodo di determinazione quantitativa dell'epatite C è accurato e informativo, eseguito su apparecchiature ad alta sensibilità. Decifrare i risultati dell'analisi consente di scoprire se l'infezione e la sua specificità, per vedere il minor numero di cellule infette su analizzatori altamente sensibili.

    I risultati falsi positivi o opposti sono raramente dati dall'analisi, più spesso ciò avviene negli studi di immunodosaggio.

    L'epatite C è una delle malattie virali più pericolose e difficili da diagnosticare. Per determinare la malattia, viene utilizzato il metodo PCR dell'epatite C. Si tratta di una nuova tecnica high-tech che consente di studiare il materiale genetico per l'esistenza della vita nelle particelle più piccole (molecole) e nelle più piccole quantità. Il virus dell'epatite è molto persistente, può vivere a lungo nell'ambiente ed è ben consolidato nel corpo umano.

    Cos'è la PCR?

    Oggi c'è un numero enorme di varie malattie. E non un numero inferiore di metodi per la loro determinazione. Poiché gli agenti di infezione hanno imparato a mettere radici nell'ambiente e ad evolversi facilmente, vengono utilizzate le ultime tecnologie per diagnosticare loro. La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un metodo più rapido e più accurato che cerca di trovare l'agente causale della malattia aumentando significativamente la porzione del DNA del virus dell'epatite nel campione. Di lui spesso scrive: cerca un ago in un pagliaio e poi costruisce una pila di aghi.

    Tipi di metodo PCR

    I test qualitativi aiuteranno a determinare la presenza del virus dell'epatite C nel corpo.

    Assegni l'analisi qualitativa e quantitativa di epatite. Per determinare se il virus è nel corpo e coloro che hanno trovato anticorpi contro l'epatite C, eseguire test di alta qualità. L'analisi di decodifica dà il risultato: "positivo"; "Negativo". Significato negativo: o una persona è sana o non ci sono abbastanza agenti nel sangue e non possono essere trovati. Quindi vale la pena di fare un riesame dopo un po '.

    Un risultato positivo indica l'esistenza di un'infezione. Questo è quasi sempre il valore esatto. I risultati errati di solito dipendono dal fattore umano (stoccaggio improprio o non conformità con le regole della procedura). Quando il tasso è, il risultato è negativo. Prima di testare non ci sono regole speciali, basta prendere il sangue da una vena.

    Se trovato, condurre un'analisi quantitativa (carica virale) - dà valori numerici: quanto RNA del virus dell'epatite è in questo momento nel volume prescritto del materiale in studio. Con lo sviluppo attivo dell'infezione, può essere rilevato a 1-2 settimane in una persona infetta. Anche il sangue viene solitamente esaminato perché gli agenti circolano liberamente in esso.

    Caratteristiche dell'analisi quantitativa della PCR

    La PCR quantitativa ti aiuterà a scegliere il trattamento più efficace per l'epatite C.

    La differenza nell'analisi quantitativa è che non tutto passa. Qualitativo - determina la presenza e quantitativa - aiuta con la conferma della conclusione "virus dell'epatite", la prognosi del decorso della malattia e determina il corso del trattamento. Quanto è efficace la terapia è dal numero di RNA prima e durante il trattamento. Inoltre con il suo aiuto determina la nomina di dosi di farmaci.

    Di norma, viene prodotto prima dell'inizio del trattamento. Le principali indicazioni possono essere:

    determinazione della carica virale e controllo della terapia antivirale, PCR di alta qualità trovato anticorpi di epatite C, individuazione di epatite C acuta e cronica, l'esistenza di epatite mista, quando si pianifica il trattamento, se uno studio qualitativo trova ancora la presenza della malattia dopo la dodicesima settimana di terapia.

    Guarda anche, quale carica virale nell'epatite: bassa - la terapia viene eseguita con successo; aumentato - il trattamento non è efficace e deve essere cambiato.

    Cosa viene eseguito in varie fasi della malattia?

    L'analisi aiuterà a monitorare i risultati della terapia in tutte le fasi del trattamento.

    In diverse fasi della malattia, viene effettuato uno studio per dare una revisione dei benefici del trattamento e la pianificazione della sua durata. Con buone risposte alla terapia, si accorcia. Altrimenti, con il lento ritiro del virus, il trattamento si prolunga. La PCR per l'epatite fa 1,4, 12, 24 settimane di terapia. Quando gli indicatori non cadono dopo 12 settimane, concludono che la terapia non è adatta a questo organismo. Questa analisi viene utilizzata per determinare quanto è attiva l'infezione e quanto è probabile che sia trasmessa. Ad esempio, durante la gravidanza c'è il rischio di infettare un bambino. Dopo la terapia, identificare il rischio di recidiva della malattia.

    trascrizione

    Dopo lo studio, l'analisi può decifrare non in numeri, ma con le parole: "sotto l'intervallo di misurazione" e "non rilevato". La PCR quantitativa è più sensibile alla qualità. La conclusione "non rilevata" può dire che l'infezione non è stata trovata. "Sotto l'intervallo di misurazione" - il test non ha rilevato il virus, ma ha un valore basso. In questa situazione, fai un secondo studio.

    Il carico virale è la determinazione del numero di RNA infettivi in ​​un volume di sangue prescritto (1 ml = 1 metro cubico quantitativamente). Formulato in misure internazionali IU / ml. Laboratori separati designano copie / ml. Diversi sistemi di test possono decifrare la traduzione di componenti in valori internazionali a modo loro. Tabella 1. Decifrazione dell'analisi quantitativa dell'RNA del virus

    La diagnosi di epatite comprende una serie di test per determinare la presenza di un virus nel sangue. Un modo per individuare una malattia è un metodo di ricerca come la PCR per l'epatite C. Di cosa si tratta, perché l'analisi della PCR per l'epatite è tanto importante quanto viene eseguita e decodificata?

    Cos'è?

    La reazione a catena della polimerasi, o PCR, viene utilizzata per diagnosticare ulcere gastriche, colite, enterite. Ma il suo principale vantaggio è che aiuta a rilevare nel corpo sia il virus dell'epatite C che gli anticorpi che hanno la capacità di non causare reazioni del sistema immunitario a causa della loro capacità di mutare.

    Lo studio e la sua essenza sta nella creazione di determinate condizioni in cui si verifica la reazione a catena dell'epatite RNA. Se, confrontate con la sequenza nucleotidica del virus dell'epatite C, si riscontrano coincidenze, ciò indica che nel sangue sono presenti particelle virali e che i processi di disintegrazione si verificano nel fegato. Se la quantità di virus è inferiore a un certo livello, viene fatta una diagnosi negativa e, se superiore, positiva.

    Esistono due tipi di esami del sangue che utilizzano il metodo PCR per l'epatite: analisi quantitativa e analisi qualitativa.

    La PCR quantitativa, come menzionato sopra, determina la concentrazione di RNA del virus dell'epatite. Inoltre, è in grado di fornire informazioni sull'intensità con cui si sviluppa la patologia e sull'efficacia del trattamento prescritto. Un'analisi quantitativa dell'epatite C è estremamente importante perché fissa la resistenza all'azione dei farmaci antivirali e consente di regolare la terapia.

    Dopo che il paziente è stato sottoposto a un ciclo di trattamento, la PCR aiuta a determinare l'ulteriore ordine degli appuntamenti. In alcuni casi, la necessità di ulteriori sondaggi. Ad esempio, se il livello di ALP è aumentato (ma non più di 2 volte entro sei mesi) e la trascrizione dell'analisi indica una carica virale superiore a 105 IU / ml, al paziente viene prescritta una biopsia. Se un'analisi quantitativa della PCR rivela una grave infiammazione e fibrosi, al paziente viene prescritto un ciclo di trattamento con farmaci antivirali.

    In situazioni in cui un gran numero di particelle virali è combinato con un'alta ALT, il paziente deve essere immediatamente trattato senza ulteriori misure diagnostiche.

    Fai questo test e scopri se hai problemi al fegato.

    Solo specialisti qualificati ed esperti possono decifrare qualitativamente in analisi quantitativa del sangue per l'epatite, e le moderne tecnologie aiutano a farlo con una bassa concentrazione del virus nel sangue.

    L'analisi qualitativa della PCR ha lo scopo di determinare e confermare l'effettiva presenza del virus nel corpo. Viene eseguito quando nel sangue sono rilevati anticorpi contro l'epatite. È un'analisi qualitativa dell'epatite che garantisce l'accuratezza del risultato del 100% e consente di formulare una diagnosi nelle prime fasi della malattia, che consente di iniziare la lotta contro l'epatite già durante le prime settimane dopo l'infezione e aumenta le probabilità di guarigione completa (nel caso della malattia di tipo B).

    Benefici della PCR

    Nello studio mediante PCR e decifrando un esame del sangue per l'epatite, è anche possibile determinare il genotipo del patogeno. In totale, ci sono 6 genotipi del virus e un gran numero di sottotipi, tuttavia nella nostra regione sono diventati comuni genotipi 1, 2 e 3.

    Altri vantaggi di questo tipo di diagnosi sono:

    • alta precisione degli indicatori ottenuti e bassa probabilità di errore in essi;
    • alto livello di sensibilità alle particelle virali nel sangue;
    • la possibilità di identificare più agenti patogeni contemporaneamente;
    • diagnosi di microrganismi patogeni intracellulari con elevata variabilità antigenica;
    • lavorare con l'analisi della decodifica per l'epatite consente di rilevare infezioni nascoste attuali.

    Chi è nominato

    Le seguenti categorie di persone devono passare l'analisi PCR per l'epatite:

    • donne incinte;
    • personale sanitario;
    • potenziale donatore di sangue e di organi;
    • quelli che hanno segni caratteristici della malattia;
    • Individui con infezione da HIV;
    • tossicodipendenti;
    • prostitute promiscue.

    Come viene condotta l'analisi ed è necessario prepararla

    Il prelievo di sangue per la PCR è fatto da una vena. Di norma, ciò si verifica al mattino prima che la persona abbia mangiato, perché dopo aver mangiato un pasto devono passare almeno 8 ore. In casi estremi, sangue può essere preso per l'esame durante il giorno o la sera, ma il divario di tempo tra analisi e assunzione di cibo dovrebbe essere di almeno 5 ore.

    Il fattore umano può influenzare quantitativamente i risultati: la loro accuratezza in alcuni casi diminuisce dal 100% al 95%, pertanto è necessario preparare in anticipo la donazione del sangue. La qualità del biomateriale per l'analisi sarà appropriata quando il paziente segue le seguenti regole:

    • prima di donare il sangue, puoi bere solo acqua pulita;
    • due giorni prima dello studio, è necessario abbandonare l'assunzione di cibi fritti e grassi, così come le bevande alcoliche;
    • un giorno prima della visita al laboratorio dovrebbe smettere di prendere medicine. Se ciò non è possibile, è indispensabile informare il tecnico di laboratorio e il medico curante;
    • il giorno prima hai bisogno di evitare situazioni stressanti e sforzi fisici;
    • ultrasuoni, esami radiografici e strumentali non dovrebbero essere eseguiti poco prima della donazione di sangue;
    • per un'ora prima dell'analisi, devi astenersi dal fumare;
    • 20 minuti prima di donare il sangue, è necessario distrarsi, calmarsi ed espirare.

    Se un bambino di età inferiore ai 5 anni supera lo studio, i genitori devono assicurarsi di bere acqua bollita ogni 10 minuti per mezz'ora prima di assumere il biomateriale.

    Decrittografia dei dati ricevuti

    La decodifica dell'analisi può essere rappresentata in parole (nel caso di uno studio qualitativo), ad esempio "non rilevato" o "sotto l'intervallo di modifiche". Nel primo caso, ciò indica che l'infezione non è stata rilevata. Nel secondo - che il virus è presente, ma in piccole quantità. Questa situazione richiede una nuova ricerca.

    Il carico virale è determinato dalla quantità di RNA infetto e viene indicato come IU / ml o copie / ml.

    Un normale indicatore (norma) di un'analisi quantitativa per l'epatite C è compreso tra 1,8x102 e 2,4x107 IU / ml.

    La concentrazione di virus nel sangue può essere:

    • basso: da 600 IU / ml a 3x10 4 / ml;
    • media: da 3x10 4 IU / ml a 8x10 5 IU / ml;
    • alto: oltre 8x10 5 IU / ml.

    L'analisi quantitativa e qualitativa della PCR per l'epatite consente di determinare la presenza del virus nel corpo e il livello della sua concentrazione. Una reazione a catena multi-dimensionale è in grado di diagnosticare la malattia nelle sue fasi iniziali, ma per questo è necessario che i pazienti si rivolgano il prima possibile alle strutture mediche per ricevere aiuto e seguano rigorosamente le raccomandazioni del medico curante.

    Il virus dell'epatite C è in grado di moltiplicarsi nelle cellule del sangue e causare malattie linfoproliferative. A causa di molteplici mutazioni, la difesa immunitaria del corpo si indebolisce, appaiono genotipi e sottotipi del virus. Con la determinazione corretta e tempestiva di un tipo specifico, dipende l'efficacia della terapia antivirale. Il pericolo di infezione è che la malattia è asintomatica. Solo il 15% dei 100 può manifestare nausea e vomito, perdita di peso e febbre.

    Rilevazione del virus dell'epatite C

    Il tasso standard di epatite C è nelle dimensioni da 40 a 60 nm, con la maggior parte dei lipidi, danni al fegato derivanti da un decorso acuto o cronico della malattia. L'epatite C, vale a dire il virus RNA della famiglia Togaviridae, è estremamente resistente, viene trasmessa mediante trasfusioni di sangue o l'uso di articoli non sterili, forniture di igiene improprie, ecc. L'analisi quantitativa consente di esaminare il sangue e identificare la struttura genetica del virus infetto.

    Per l'epatite C e i suoi genotipi sono stati determinati, condurre un'analisi quantitativa. A seconda dell'analizzatore è possibile determinare i tre livelli di incidenza del virus dell'RNA.

    I sottotipi possono produrre varie modifiche, quindi la specificità e la sensibilità dell'analizzatore devono essere al cento per cento. Oltre a rilevare la malattia in un paziente, è necessario determinare il grado della sua gravità. Alcuni laboratori non hanno tutti i dati sulla decodifica del virus RNA, esiste la possibilità di una falsa risposta positiva.

    La ricerca sull'epatite C sarà più accurata quando si studiano questi indicatori:

    Attirando l'attenzione sui risultati di questi indicatori e sulla condizione generale del corpo, viene visualizzato un risultato che mostra il grado di infezione, la forma e il numero di cellule epatite C nel sangue. Ciò contribuisce al processo di guarigione e all'efficacia della terapia antivirale.

    Tipi di analisi per l'epatite C

    Una reazione a catena multi-dimensionale (PCR) dà un'idea del numero di particelle di DNA nelle analisi dei pazienti effettuate, identificando correttamente l'agente infettivo.

    Possono verificarsi agenti causativi di malattie infettive. Un'infezione del fegato, come l'epatite C, è curabile nei nostri tempi quando viene rilevata tempestivamente. Se si sospetta un virus, viene eseguita l'analisi PCR.

    Dato che a lungo i sintomi del virus possono essere mascherati, una persona potrebbe non sentire l'insorgere della malattia. Ma con un esame approfondito nel 60-70% dei casi, viene rilevata l'epatite C, la prima analisi, che è ELISA, seguita dalla diagnosi PCR. L'analisi viene effettuata in determinati periodi per determinare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento appropriato. Per farne a meno, senza applicare tutte queste procedure, è possibile essere vaccinati contro l'epatite.

    Analisi qualitativa e quantitativa

    Ci sono analisi qualitative e quantitative. L'essenza del primo è che determina la presenza di infezione nel sangue. E questo significa che il virus infetta cellule epatiche sane. Quando si trovano anticorpi contro l'epatite C in un paziente, viene immediatamente eseguito un test qualitativo. Il tasso che il risultato dovrebbe dare è "non rilevato nel sangue". Quando si determina la concentrazione di un virus, è necessario conoscere la sensibilità del sistema diagnostico, poiché le persone sottoposte a terapia antivirale possono eseguire l'analisi. Il grado di sensibilità dell'analizzatore non deve essere inferiore a 50 IU / ml.

    Quando viene rilevato un virus, viene eseguita un'analisi quantitativa, in altre parole, la carica virale, che determina la concentrazione del virus nel sangue e la gravità della malattia.

    L'RNA virale, che è in una certa quantità di sangue, è definito come la norma al ritmo di 1 ml per 1 centimetro cubico. Dopo aver quantificato la carica virale, è possibile valutare il grado di infezione dell'ambiente ancora non infetto. Non appena la concentrazione di epatite C sale nel sangue, è necessario isolare dall'ambiente.

    È importante nelle prime fasi rilevare il grado di concentrazione dell'epatite, al fine di determinare il ritmo della riabilitazione. Se il tasso di epatite C è superato di oltre 800 mila IU / ml, è considerato troppo alto, con un aumento fino a un milione - critico. Se l'intervallo quantitativo è inferiore a 400 mila IU / ml, si ritiene che l'infezione di quelli intorno sarà meno probabile. Questa cifra chiarisce che l'epatite C è presente nel corpo in dosi molto piccole. L'analisi non è stata in grado di determinare il valore quantitativo delle particelle di RNA del virus, per cui è stata rinominata diverse volte per una diagnosi accurata.

    Risultati dell'analisi quantitativa

    Il compito di determinare la quantità di carica virale nel sangue di un paziente è l'identificazione del grado di infezione per gli altri.

    I risultati dell'analisi PCR:

    1. Una risposta positiva significa un'infezione nel materiale biologico. L'analisi consente di determinare il numero esatto di cellule infette.
    2. Una risposta negativa indica l'assenza di infezione, che viene attentamente ricercata nel corpo.

    Il metodo di determinazione quantitativa dell'epatite C è accurato e informativo, eseguito su apparecchiature ad alta sensibilità. Decifrare i risultati dell'analisi consente di scoprire se l'infezione e la sua specificità, per vedere il minor numero di cellule infette su analizzatori altamente sensibili.

    I risultati falsi positivi o opposti sono raramente dati dall'analisi, più spesso ciò avviene negli studi di immunodosaggio.

    Il virus dell'epatite C è un virus che contiene una molecola di RNA. È in grado di evitare la risposta immunitaria del corpo a causa della sua elevata capacità di mutare. Esistono sei principali genotipi del virus e molti sottotipi. Nella nostra regione, i genotipi 1, 2 e 3 sono distribuiti principalmente.

    Nel 75-80%, la malattia diventa cronica, che causa la fibrosi epatica, una condizione in cui il tessuto epatico viene sostituito dal tessuto connettivo. La fibrosi, a sua volta, porta al cancro o alla cirrosi. La principale modalità di trasmissione della malattia è attraverso il sangue. Se una persona ha indicazioni per testare l'epatite C, gli verranno dati due test di base. Gli anticorpi del virus sono determinati e, in loro assenza, si ritiene che non abbia l'epatite. Se viene rilevata la presenza di anticorpi contro il virus dell'epatite nel sangue, viene eseguita l'analisi della PCR.

    L'RNA mediante questo metodo è determinato nel sangue entro 10-12 giorni dall'infezione e indica che il virus si replica attivamente nel corpo. Durante questo periodo, è semplicemente impossibile rilevare il virus in un altro modo, poiché non produce ancora anticorpi specifici e il danno epatico non è visibile con test biochimici e biopsie.

    Varietà di studi sulla PCR

    L'analisi della reazione a catena della polimerasi presenta alcuni vantaggi:

    1. In questo studio, viene determinato il virus stesso e non i suoi prodotti metabolici. In questo caso, è possibile determinare il tipo di agente patogeno.
    2. La tecnica ha un'elevata specificità dovuta al fatto che solo una certa sezione del DNA viene studiata, la probabilità di ottenere risultati errati diminuisce.
    3. Ha una sensibilità molto elevata, è determinata anche dalla quantità minima di virus nel sangue.

    Esistono due metodi principali per testare il sangue per l'epatite C mediante PCR: analisi qualitativa e quantitativa della PCR. Il metodo qualitativo viene utilizzato per determinare se è presente un virus. Qualcuno con anticorpi antiepatite è stato rilevato nel sangue, tale analisi viene effettuata. Il risultato può essere di due tipi: "rilevato" e "non rilevato", quest'ultimo valore è considerato la norma.

    Un risultato positivo del test significa che nel campione sono stati trovati frammenti dell'RNA del virus che, a sua volta, indicano che la persona è stata infettata da epatite. Nel caso di un risultato negativo, sono possibili due opzioni: non c'era infezione o la sua concentrazione è così bassa da non essere rilevata da questa tecnica.

    Il metodo quantitativo differisce nella sostanza della ricerca, nei suoi compiti e nelle indicazioni. Non tutti i pazienti con epatite subiscono tale analisi. Lui, come ogni altro, ha determinati obiettivi. Viene utilizzata la determinazione della carica virale o l'analisi quantitativa della PCR per l'RNA virale:

    • per la determinazione dell'RNA del virus nel sangue e la diagnosi di "epatite virale";
    • predire la cronicità dell'epatite e il decorso della malattia;
    • monitorare il trattamento antivirale e decidere sulla sua estensione, riduzione o cambiamento nelle tattiche di trattamento.

    Lo studio è condotto in presenza di tali indicazioni:

    • L'epatite C è stata rilevata da uno studio qualitativo e gli anticorpi sono stati rilevati nel sangue;
    • con epatite mista;
    • se è prevista una terapia antivirale;
    • durante e dopo il trattamento per l'epatite C;
    • in presenza di epatite C cronica e acuta

    Il test viene condotto per stimare il numero di unità virali in un dato volume di un campione di sangue di 1 cm³ o 1 ml. I risultati sono espressi in numeri. Indicatori utilizzati: IU / ml, che significa unità internazionale per millilitro e copie per ml, il numero di copie di RNA in 1 ml del campione. Più alto è l'indicatore quantitativo dell'analisi, maggiore è la probabilità di trasmissione del virus a un'altra persona.

    L'R-DNA è un metodo di DNA ramificato. Metodo più semplice ed economico. Usato per più campioni, ha bassa sensibilità, da 500 IU / ml. Con tale sensibilità, c'è la possibilità di non identificare il virus, anche se è presente nel sangue.

    TMA è un metodo di amplificazione della trascrizione. Questa tecnica rileva gli acidi nucleici nel sangue. Ha un basso costo e alta sensibilità, da 5-10 IU / ml. Una tecnica relativamente nuova che consente di accelerare e ridurre il costo del processo di test.

    I risultati dell'analisi quantitativa della definizione del virus dell'RNA, presentata dal laboratorio, sono interpretati come segue: