Conta leucocitaria nel sangue

Principio. Conteggio dei leucociti durante la microscopia in un certo numero di quadrati della camera di conteggio e il calcolo del loro numero in 1 litro di sangue, tenendo conto della diluizione del sangue e del volume della camera di conteggio.

Reagente: soluzione al 3-5% di acido acetico, colorato per i nuclei di colorazione dei leucociti con alcune gocce di soluzione di blu di metilene. La soluzione ha un colore blu, può essere conservata a lungo.

Il corso della determinazione. In una provetta asciutta versare 0,4 ml di soluzione di acido acetico. 0,02 ml di sangue vengono prelevati da un dito (è possibile utilizzare sangue venoso stabilizzato anticoagulante). Pulire la punta della pipetta, quindi soffiare il sangue da esso sul fondo del tubo, mescolare, ricomporre e soffiare la miscela di sangue e reagente (pipettaggio). Etichettare il tubo e lasciarlo fino al conteggio. Si consiglia di conservare una miscela di sangue con una soluzione di acido acetico non più di 2-4 ore.

Il sangue diluito in una provetta con acido acetico, mescolare accuratamente e riempirlo con una camera di conteggio. La camera piena viene lasciata in posizione orizzontale per 1 minuto per sedimentare i globuli bianchi. Senza cambiare la posizione orizzontale della fotocamera, la posizionano sul tavolo del microscopio e con un basso ingrandimento (oculare 10 ×, obiettivo 8 ×) contano i globuli bianchi in 100 quadrati grandi, che corrispondono a 1600 piccoli.

Per una maggiore precisione, i leucociti vengono contati attraverso la griglia in grandi quadrati, non divisi in piccoli quadrati e strisce, a partire dall'angolo in alto a sinistra della griglia. Per un contrasto migliore, scurire il campo visivo, far cadere il condensatore e chiudere l'apertura. Le celle situate all'interno del quadrato e situate su due linee qualsiasi vengono contate per non contare due volte la stessa cella.

Il calcolo del numero di leucociti viene effettuato secondo la formula:

dove X è il numero di leucociti in 1 ml di sangue; e - il numero di leucociti in 100 quadrati grandi; 20 - diluizione del sangue; 100 è il numero di grandi quadrati; 250 è il fattore di conversione per 1 μl, poiché il volume di un quadrato grande è 1/250 μl (il lato del quadrato è 1/5 mm, l'altezza è 1/10 mm).

In pratica, per calcolare il numero di leucociti in 1 ml di sangue, il loro numero in 100 quadrati grandi viene moltiplicato per 50, e in 1 litro - il valore risultante viene moltiplicato per 106.

Nota. Quando si contano i leucociti, un errore è inevitabile nel 6-8% dei casi.

1. Con un gran numero di normociti nel sangue periferico, sono contati nel numero di leucociti (sia leucociti che normociti - cellule nucleate). Per stabilire correttamente il numero di leucociti, dal numero totale di cellule di sangue nucleate è necessario sottrarre il numero di normociti.
2. Gli errori rimanenti sono simili a quelli che si presentano quando si calcola il numero di globuli rossi nella camera di conteggio.

Conta dei leucociti

Il metodo di conteggio nella fotocamera. Assunzione e diluizione del sangue prodotto con il metodo del tubo. Nella provetta vengono introdotti 0,4 ml del fluido diluente e 0,02 ml di sangue capillare (preferibilmente Vidalevskaya). La diluizione risultante è praticamente considerata 1:20: una soluzione al 3-5% di acido acetico colorato con blu di metilene viene solitamente utilizzata come diluente (eritrociti a base di acido acetico, macchie di blu di metilene nei nuclei dei leucociti). Prima di riempire la camera la provetta di Goryaeva con sangue diluito viene completamente scossa. La camera viene riempita allo stesso modo del conteggio dei globuli rossi.

I leucociti sono molto più piccoli degli eritrociti (1-2 per quadrato grande), quindi, per la precisione, i conteggi vengono fatti in 100 quadrati grandi (non graduati). Calcolo: 100 grandi quadrati (1600 piccoli) sono contati un leucocita.
Ricordando che il volume di un quadratino è 1/4000 mm3 e il sangue viene diluito 20 volte, viene calcolato il numero di leucociti in 1 ml di sangue: 4000 20 e diviso per 1600 = a x 1/2. In pratica, per ottenere il contenuto effettivo dei leucociti in 1 ml di sangue, è sufficiente dividere la metà del numero ottenuto nel calcolo e aggiungere 2 zeri. L'errore medio del metodo è ± 7%.

Più preciso (errore del 2-3%) e perfetto è il conteggio dei leucociti che utilizzano dispositivi elettronici. Il conteggio dei leucociti nei contatori di particelle viene effettuato secondo lo stesso principio degli eritrociti. Il pre-sangue viene diluito e miscelato con qualsiasi globulo rosso di lisi dei reagenti. Nell'analizzatore automatico "Technicon", una soluzione di acido acetico viene utilizzata come tale nei dispositivi "Culter" e "Celloskop" - saponina o sapoglobina, che vengono aggiunti diluiti (1: 500, 1: 700) in soluzione di cloruro di sodio isotonico (6 gocce per 20 ml diluizione).

Il conteggio dei leucociti nel sangue viene eseguito su strisci di sangue periferico macchiato.
È meglio contare nel punto più sottile vicino alla fine dello striscio, almeno 200 cellule (eccetto la leucopenia pronunciata), e quindi ricavare il rapporto percentuale di alcuni tipi di globuli bianchi. Il conteggio è raccomandato nello stesso ordine: la metà delle celle deve essere contata nella parte superiore, metà nella parte inferiore del tratto, senza andare al bordo e al centro, zigzagando (3-4 campi di vista lungo il tratto, 3-4 campi ad angolo retto rispetto al centro del tratto, poi 3-4 campi sul lato parallelo al bordo, sempre ad angolo retto verso l'alto e così via su un lato).

Preparazione di strisci Il vetro accuratamente lavato e sgrassato (il suo bordo) tocca una goccia di sangue nel sito di iniezione. Lo smear crea un vetro per molatura, posizionandolo con un angolo di 45 ° rispetto al vetrino davanti alla goccia. Avendo portato il bicchiere a questa goccia, aspettano che il sangue si sparga lungo il bordo, poi con un movimento rapido e facile portano in avanti il ​​vetro della levigatura, senza toglierlo dal soggetto prima che asciughi tutta la goccia.

Uno striscio fatto correttamente ha un colore giallastro (sottile), non raggiunge i bordi del vetro e finisce in una traccia (baffi).

Macchia di strisci asciutti prodotti dopo la fissazione preliminare. La migliore fissazione si ottiene in alcool metilico assoluto (3-5 minuti) o in una miscela di Nikiforov di parti uguali di etanolo assoluto ed etere (30 minuti).

Le principali pitture ematologiche comprendono il blu di metilene e il suo derivato - azzurro I (metilene azzurro) e azzurro II (una miscela di parti uguali di blu I e blu di metilene), eosina gialla solubile in acqua e solubile in acqua.

● Dipinto di Romanovsky-Giemsa. La pittura Romanovsky-Giemsa (fabbricata in fabbrica) ha la seguente composizione: Azur II - 3 g, eosina gialla solubile in acqua - 0,8 g, alcool metilico - 250 ml e glicerina - 250 ml. La soluzione di pittura funzionante viene preparata alla velocità di 1,5-2 gocce della vernice finita per 1 ml di acqua distillata. La vernice viene versata su una macchia con uno strato possibilmente più alto; tempo di colorazione - 30-35 minuti Dopo questo periodo, i tamponi vengono lavati con acqua e asciugati all'aria. In questo metodo, è possibile differenziare bene il nucleo, ma la granularità neutrofila del citoplasma è molto peggiore, quindi è ampiamente usata per colorare uno striscio di sangue periferico.

● Colorazione combinata May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa secondo Pappenheim. Un colorante finito, un fissativo May-Grunwald, che è una soluzione di blu eosalmetilene in alcool metilenico, viene pipettato su uno striscio fisso per 3 minuti. Dopo 3 minuti, una quantità uguale di acqua distillata viene aggiunta alla vernice che ricopre la soluzione e la colorazione viene continuata per un altro 1 minuto. Successivamente, la vernice viene lavata via e la macchia viene asciugata all'aria. Quindi lo striscio essiccato viene ridipinto con una soluzione acquosa preparata di fresco di vernice Romanovsky per 8-15 minuti. Questo metodo è considerato il migliore, soprattutto per le macchie di puntini di midollo.

Un aumento del numero di leucociti nel sangue periferico al di sopra del livello normale è chiamato leucocitosi e una diminuzione è chiamata leucopenia. Leucocitosi (leucopenia) è raramente caratterizzata da un aumento proporzionale (diminuzione) del numero di leucociti di tutti i tipi, ad esempio leucocitosi con ispessimento del sangue. Nella maggior parte dei casi vi è un aumento del numero (diminuzione) di qualsiasi tipo di cella. L'aumento o la diminuzione del numero di singoli tipi di leucociti nel sangue può essere relativo o assoluto, in base al conteggio totale dei leucociti: normale, elevato o diminuito. La variazione del numero, il rapporto tra le forme individuali e la morfologia dei leucociti dipende dal tipo e dalla virulenza del patogeno, dalla natura, dal corso e dall'entità del processo patologico, dalla reazione individuale dell'organismo.

Metodo di conteggio dei leucociti nella camera di Goryaev

I globuli bianchi - globuli bianchi - svolgono un ruolo importante nella protezione antimicrobica del corpo. I granulociti fagocitano i microbi e li distruggono con l'aiuto di enzimi racchiusi nei granuli, i linfociti producono anticorpi e forniscono risposte immunitarie all'organismo.

Il metodo per determinare il metodo della provetta: versare in una provetta da 0,4 ml di una soluzione di Türk (il liquido di Türk contiene acido acetico per distruggere i globuli rossi e blu di metilene per la colorazione dei nuclei dei leucociti). Utilizzare una pipetta capillare per prelevare 0,02 ml di sangue da una goccia fresca, soffiare delicatamente in una provetta con un reagente e risciacquare la pipetta. Mescolare bene Allo stesso tempo, la diluizione del sangue è 20 volte. Una goccia di sangue diluito viene raccolta all'estremità di un'asta di vetro rotonda e applicata al bordo di una camera di vetro lucido.

Il conteggio viene effettuato in 100 grandi quadrati ininterrotti, messi assieme per quattro. Usato un piccolo aumento.

La derivazione della formula numero di conteggio 1.

1. 100 quadrati contengono 1600 piccoli quadrati (16x 100)

2. Volume del sangue sopra il quadratino 1/4000 mm3

3. Diluizione del sangue 20 volte

Il numero di leucociti in 1 ml di sangue = a -4000-20. = Ax 50

Ad esempio: 130 leucociti sono stati contati in 100 grandi quadrati della griglia di Goryaev. In 1 ml di sangue, il numero di leucociti sarà 130 x 50 = 6500 o 6,5-10 3.

Per determinare il contenuto di leucociti in 1 litro di sangue, il numero di leucociti, espresso in migliaia, deve essere moltiplicato per 10 9.

Nel nostro esempio, il numero di leucociti in 1 litro di sangue è 6.5-10 9.

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Conta leucocitaria nel sangue

Leucocitosi può essere assoluta (vera) e relativa (redistributiva).

Leucocitosi assoluta è osservata nei processi infiammatori acuti, necrosi dei tessuti, infezioni batteriche acute (ad eccezione della febbre tifoide, brucellosi, tularemia, ecc.), Condizioni allergiche, tumori maligni (con distruzione tissutale), ferite alla testa e emorragie cerebrali, diabete. coma uremico, shock, perdita acuta di sangue, come reazione primaria - con malattia da radiazioni. Un aumento significativo del numero di leucociti si verifica con la leucemia.

Relativo (redistributivo) è una conseguenza della ricezione di leucociti nel flusso sanguigno dagli organi che servono per il suo deposito. Si manifesta dopo aver mangiato (leucocitosi alimentare), bagni caldi e freddi, forti emozioni (leucocitosi vegetovascolare), intenso lavoro muscolare (leucocitosi miogenica), ecc.

Leucopenia. La leucopenia è considerata un indicatore di inibizione della capacità funzionale del midollo osseo a seguito di esposizione a sostanze tossiche (arsenico, benzene, ecc.), Alcuni farmaci (sulfanilamidi, cloramfenicolo, butadione, immuno, ciclofosfamide, ecc.), Virus (influenza, epatite virale, morbillo, ecc.), microbi (tifo, brucellosi, ecc.), radiazioni ionizzanti, raggi X e ipersplenismo (aumento della milza).

Leucocitosi e leucopenia sono raramente caratterizzate da un aumento proporzionale (diminuzione) del numero totale di leucociti di tutti i tipi (ad esempio leucocitosi con ispessimento del sangue); nella maggior parte dei casi vi è un aumento (diminuzione) del numero di qualsiasi tipo di cellula, pertanto vengono utilizzati i termini "neutrofilia", "neutropenia", "linfocitosi", "linfopenia", "eosinofilia", "eosinopenia", "monocitosi", "monocitopenia" "Basofilia".

Nella valutazione clinica dei cambiamenti nel numero di leucociti, grande importanza è legata al rapporto percentuale delle singole forme di leucociti, cioè la formula dei leucociti.

Emocromo leucocitario di una persona sana:

Importo relativo Importo assoluto

Basofili............................0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l

Eosinofili........................ 0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l

Neutrofili: - mielociti............ 0% assente

- pugnalato... 1-6% 0.040-0.300 x 10 9 / l

- segmentato....47-72% 2.0-5.5 x 10 9 / l

Linfociti..................................19-37% 1.2-3.0 x 10 9 / L

Monociti...............................3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / L

Il conteggio dei leucociti viene eseguito su strisci di sangue periferico macchiato. Per la corretta interpretazione dei risultati dello studio della formula dei leucociti, si raccomanda di contare in quantità assolute, ma non in quelle relative. I metodi più comuni di pittura sbavature di Romanovsky-Giemsa, Pappenheim. Sotto immersione, vengono contate almeno 200 celle, quindi viene calcolato il rapporto percentuale di alcuni tipi di leucociti. L'analisi del leucogramma tenendo conto di altri parametri del sangue e del quadro clinico è un metodo valido di esame, aiuta nella diagnosi e nella determinazione della prognosi della malattia.

Le principali cause della neutrofilia.

Infezioni batteriche acute - localizzate e generalizzate.

Infiammazione o necrosi del tessuto.

Effetti medicinali (corticosteroidi).

Le principali cause di neutropenia.

Infezioni - batteriche (febbre tifoide, brucellosi, tularemia, febbre paratifo) e virali (epatite infettiva, morbillo, influenza, rosolia e altri).

Effetti micelotossici e soppressione della granulocitopoiesi (radiazioni ionizzanti, agenti chimici - benzene, anilina, DDT, effetti medicinali - citostatici e immunosoppressori; vitamina B₁₂-anemia da carenza di acido folico, leucemia aleucemica acuta, anemia aplastica).

Esposizione anticorpale (forme immunitarie) - ipersensibilità a farmaci, malattie autoimmuni (LES, artrite reumatoide, leucemia linfatica cronica), manifestazioni isoimmunitarie (malattia emolitica del neonato).

Ridistribuzione e deposizione negli organi: condizioni di shock, malattie con splenomegalia e ipersplenismo.

Forme ereditarie (neutropenia cronica benigna familiare).

Le principali cause di eosinofilia.

Invasioni parassitarie (trichinosi).

Lesioni cutanee croniche - psoriasi, pemfigo, eczema.

Tumori (varianti eosinofiliche della leucemia).

Altre malattie - endocardite fibroplastica Lefflera, scarlattina.

Nella fase di recupero di infezioni e malattie infiammatorie (segno prognostico favorevole).

Cause di eosinopenia (aneosinofilia).

Aumento dell'attività di adrenocorticosteroidi nel corpo.

Le principali cause della basofilia:

Leucemia mieloide cronica ed eritmia.

Le principali cause della monocitosi.

Infezioni batteriche subacute e croniche.

Infezioni parassitarie - leishmaniosi, malaria.

Hemoblastosis - leucemia monocitica, linfogranulematoz, linfomi.

Altre condizioni sono SLE, sarcoidosi, artrite reumatoide, monocitosi infettiva; nel periodo di recupero dalle infezioni, quando si lascia agranulocitosi, dopo splenectomia.

La diminuzione del numero di monociti è importante soprattutto nella valutazione del rapporto linfocitario-monocitico nella tubercolosi polmonare.

Le principali cause di linfocitosi.

Infezioni: virali acute (mononucleosi infettiva, morbillo, rosolia, varicella), batteri cronici (tubercolosi, sifilide, brucellosi), protozoi (toxoplasmosi).

Emoblastosi (leucemia linfocitica, linfoma).

Altre malattie - ipertiroidismo, morbo di Addison, vitamina B₁₂-anemia da carenza folica, anemia ipo-aplastica.

Linfocitopenia è osservata in LES, malattia di Hodgkin, tubercolosi diffusa dei linfonodi, nella fase terminale di insufficienza renale, malattia da radiazioni acute, stati di immunodeficienza, assunzione di glucocorticoidi.

L'aumento o la diminuzione del numero di certi tipi di leucociti nel sangue può essere relativo o assoluto. Se cambia solo la percentuale di un particolare tipo di globuli bianchi, si verificano neutrofilia relativa, eosinopenia relativa, ecc. L'aumento o la diminuzione del contenuto assoluto di qualsiasi tipo di leucociti, ovvero il numero di queste cellule per unità di volume di sangue, è definito neutrofilia assoluta, eosinopenia assoluta, ecc.

Spostare la formula a sinistra (aumentando il numero di forme giovani di neutrofili) è un segno di infiammazione o di un processo necrotico nel corpo.

Lo spostamento della formula dei leucociti a destra è caratteristico della malattia da radiazioni e della vitamina B₁₂-anemia da carenza di acido folico.

L'assenza o la significativa riduzione del numero di tutti i tipi di leucociti granulari - i granulociti (neutrofili, eosinofili, basofili) sono indicati con il termine agranulocitosi. A seconda del meccanismo di occorrenza, si distinguono mielotossici (effetti delle radiazioni ionizzanti, assunzione citostatica) e immuni (agarucocitosi di aptene e autoimmune).

Leucociti (leucociti)

Leucociti. Determinazione quantitativa dei leucociti. Contando i leucociti usando la fotocamera Goryaeva. Contenuto quantitativo di leucociti. Leucocitosi.

Globuli bianchi

Il numero di leucociti nel sangue dipende sia dalla velocità della loro formazione, sia dalla loro mobilizzazione dal midollo osseo, nonché dal loro utilizzo e migrazione nei tessuti (alle lesioni), dalla cattura da parte dei polmoni e della milza. Questi processi, a loro volta, sono influenzati da un numero di fattori fisiologici, e quindi il numero di leucociti nel sangue di una persona sana è soggetto a fluttuazioni: sale alla fine della giornata, durante lo sforzo fisico, lo stress emotivo, l'assunzione di cibi proteici e bruschi cambiamenti nella temperatura ambiente.

Determinazione quantitativa dei leucociti

I leucociti vengono contati usando la fotocamera Goryaev e usando contatori automatici.

Contando i leucociti usando la fotocamera Goryaeva

Con il metodo in vitro di prendere il sangue per contare i leucociti:

• Nel tubo vengono versati 0,4 ml di una soluzione di acido acetico al 3-5% colorato con blu di metilene. Utilizzare una pipetta capillare per prelevare 20 μl di sangue da una goccia fresca (diluizione 20 volte), con cautela farla saltare in una provetta con un reagente e sciacquare la pipetta. Mescolare bene;
• un vetro di copertura pulito e asciutto viene strofinato sulla camera in modo che si formino anelli di arcobaleno nel punto di contatto;
• sangue diluito in una provetta, mescolare bene. L'estremità di un'asta di vetro rotonda prende una goccia di sangue e la porta sul bordo del vetro lucido della camera;
• dopo aver riempito la camera, rimane a riposo per 1 minuto per la sedimentazione dei leucociti;
• I leucociti sono considerati a basso ingrandimento (obiettivo × 8 o × 9, oculare × 10 o × 15) con un campo visivo oscurato (con un condensatore abbassato o un diaframma ristretto);
• per risultati soddisfacenti, i leucociti vengono contati in 100 quadrati grandi.

Conoscendo il volume di un quadrato grande e il grado di diluizione del sangue, trova il numero di leucociti in 1 μl e 1 l di sangue. Il lato del quadrato grande è di 1/5 mm, l'area è di 1/25 mm2, il volume dello spazio sopra questo quadrato è di 1/250 mm3.

Formula per il conteggio dei globuli bianchi:

dove B è il numero di leucociti in 100 quadrati grandi;
P - il grado di diluizione (20).

Conta dei leucociti

Norma: 4.0-9.0 × 10 9 / L

Viene chiamato l'aumento del numero di leucociti superiori a 9,0 × 10 9 / l
leucocitosi, una diminuzione del loro numero inferiore a 4,0 × 10 9 / l - leucopenia. Tuttavia, anche 3,5 × 10 9 in 1 l di leucociti per un numero di individui può essere la norma. Secondo la letteratura, queste persone hanno aumentato la resistenza immunitaria e hanno meno probabilità di ammalarsi, il che sembra essere dovuto alla necessità di una risposta immunitaria di avere una riserva di leucociti nei tessuti, dove ci sono 50-60 volte di più che nel sangue. Ovviamente, in individui sani con conta dei globuli bianchi a basso contenuto di sangue periferico, le loro riserve nei tessuti sono corrispondentemente aumentate. Questo fenomeno è spiegato dal carattere ereditario e familiare o da un aumento dell'influenza del sistema nervoso parasimpatico.

Leucopenia può essere funzionale e organica.
Leucopenia funzionale è associata a disregolazione della formazione del sangue e si osserva:

• con alcune infezioni batteriche e virali (febbre tifoide, influenza, vaiolo, rosolia, morbo di Botkin, morbillo);
• sotto l'azione di farmaci (sulfamidici, analgesici, anticonvulsivanti, antitiroidei, citostatici e altri farmaci);
• durante il lavoro muscolare, l'introduzione di proteine ​​estranee, effetti del nervo e della temperatura, fame, stati ipotonici;
• la leucocitopenia falsa può essere associata all'aggregazione dei leucociti durante la conservazione a lungo termine del sangue a temperatura ambiente (oltre 4 ore).

Leucopenia organica derivante dall'aplasia midollare e dalla sua sostituzione con tessuto adiposo, si verifica quando:

• anemia aplastica;
• agranulocitosi;
• leucemia leucopenica;
• alcune forme di malattia di Hodgkin;
• radiazioni ionizzanti;
• ipersplenismo (primario e secondario);
• malattie del collagene.

leucocitosi

Leucocitosi è la reazione del sistema ematopoietico agli effetti
fattori esogeni ed endogeni. Ci sono leucocitosi fisiologiche e patologiche.

Leucocitosi fisiologica è:

• digestivo - dopo aver mangiato, particolarmente ricco di proteine; il numero di leucociti non supera 10,0-12,0 × 10 9 / le dopo 3-4 ore ritorna normale;
• con stress emotivo (adrenalina), grave sforzo fisico, raffreddamento, eccessiva esposizione solare (scottature solari), somministrazione di numerosi ormoni (catecolamine, glucocorticosteroidi, ecc.), nella seconda metà della gravidanza, durante le mestruazioni e a causa della distribuzione irregolare dei leucociti nel sangue il mainstream.

Leucocitosi patologica è divisa in assoluto e relativo.

Leucocitosi assoluta - un aumento del numero di leucociti nel sangue fino a diverse centinaia di migliaia (100.0-600.0 × 10 9 / le più).

• Il più spesso osservato con leucemia: in leucemia cronica - nel 98-100% dei casi, con leucemia acuta - nel 50-60%. Cambiare il rapporto tra le cellule dei leucociti nel midollo osseo e il punteggiato del sangue funge da base per la diagnosi di leucemia.

Leucocitosi relativa è osservata:

• processi infiammatori e infettivi acuti, con l'eccezione della febbre tifoide, dell'influenza, del vaiolo, della rosolia, della malattia di Botkin, del morbillo. La leucocitosi maggiore (fino a 70,0-80,0 × 10 9 / l) è osservata nella sepsi;
• sotto l'influenza di sostanze tossiche (veleni d'insetto, endotossine), radiazioni ionizzanti (immediatamente dopo l'irradiazione);
• come risultato dell'azione di corticosteroidi, adrenalina, istamina, acetilcolina e preparazioni digitalizzate;
• con disintegrazione tissutale (necrosi), infarto miocardico, trombosi delle arterie periferiche con sviluppo di cancrena, ustioni, pleurite essudativa, pericardite, uremia, coma epatico;
• significativa perdita di sangue nelle lesioni, interna, ginecologica e altre emorragie.

L'aumento del numero di leucociti nelle malattie infettive nella maggior parte dei casi è accompagnato da uno spostamento della formula dei leucociti a sinistra

Conteggio dei leucociti e conteggio dei leucociti.

Per contare i leucociti, il sangue viene diluito nei miscelatori o nelle provette. A tale scopo, utilizzare una soluzione al 3-5% di acido acetico (per la distruzione dei globuli rossi), colorato con qualsiasi colorante all'anilina (per la colorazione dei nuclei dei leucociti). La griglia di conteggio viene riempita allo stesso modo del conteggio dei globuli rossi. I leucociti sono contati in 100 quadrati grandi. Nella griglia di Goryaev, è conveniente contarli in quadrati ininterrotti (ce ne sono 100 sulla griglia). Data la diluizione del sangue e il volume del fluido sopra i quadrati, calcola un moltiplicatore costante. Quando si riproduce 20 volte è 50.

Quando lavorano con provette, pre-versano 0,38 ml di liquido e rilasciano 0,02 ml di sangue. Per calcolare il conteggio automatico in provette, i globuli rossi emolizzano con saponina. La normale conta dei globuli bianchi è 4,3 • 10 9 -11,3 • 10 9 / l, o 4300-11 300 in 1 ml di sangue.

Il numero dei leucociti contava in strisci colorati.

Un buon striscio soddisfa i seguenti requisiti: è sottile e gli elementi sagomati giacciono in uno strato; in questo caso, lo striscio è giallo e traslucido. Un buon striscio è uniforme e le cellule non sono danneggiate dalla sbavatura. Affinché il sangue si depositi uniformemente sul vetro, viene sgrassato bruciando un bruciatore a gas sulla fiamma o conservato in una miscela di alcol ed etere. Con la fine del vetro, toccano la piccola goccia di sangue appena rilasciata e la diffondono senza indugio sul vetro. Prima della colorazione, lo striscio viene fissato mediante immersione in metanolo per 3 minuti, in etanolo o nella sua miscela con etere per 30 minuti. Ci sono un certo numero di altri fissatori. Il tampone asciugato dopo la fissazione è pieno di colorante.

Per distinguere le cellule del sangue (definizioni della formula dei leucociti) ricorrere alla colorazione differenziale. La colorazione più usata da Romanovsky-Giemsa. Questo colorante è una miscela di vernici debolmente acide (eosina) e debolmente alcaline (azure II). Le cellule e le loro parti, a seconda della reazione del mezzo, percepiscono l'uno o l'altro componente della tintura al loro interno: le sostanze acide (basofile) sono di colore blu eosino, alcalino (ossifilico) colorato di rosso; Neutro percepisce entrambi i colori e diventa viola.

La formula dei leucociti si riferisce alla percentuale di singole forme di leucociti del sangue.

NB: per un calcolo sufficientemente accurato è necessario visualizzare almeno 200 globuli bianchi.

Il conteggio è fatto con un sistema di immersione. A causa del fatto che le cellule si trovano in modo non uniforme nello striscio (quelle più grandi vanno ai bordi), è importante aderire a tale ordine di movimento sullo striscio, in cui i bordi e l'area centrale dovrebbero essere visualizzati allo stesso modo. Viene utilizzato uno dei due metodi di movimento: uno sposta il tratto dal bordo superiore a quello inferiore, lo sposta da 2 a 3 campi di vista lungo il bordo, quindi va nella direzione opposta al bordo superiore, ecc. Nel secondo metodo, si spostano dal bordo di 5 -6 campi al centro di un tratto, quindi la stessa quantità di lato, quindi di nuovo al bordo, spostare lateralmente diversi campi e ripetere il movimento di nuovo fino a contare 50 celle. Visualizza 4 di questi siti ai 4 angoli della macchia. Contato 200 celle, il numero è diviso a metà e determina il numero di ciascun tipo di globuli bianchi.

I leucociti sono elementi del sangue, reagiscono rapidamente alle varie influenze esterne e ai cambiamenti all'interno del corpo. La determinazione del numero totale di leucociti può essere di grande valore diagnostico, poiché rivela lo stato degli organi che formano il sangue o la loro risposta ad effetti dannosi. L'aumento del numero di leucociti - leucocitosi - è il risultato dell'attivazione della leucopoiesi, una diminuzione del loro numero - leucopenia - può dipendere dall'inibizione degli organi ematopoietici, dalla loro deplezione e dall'aumento della scomposizione dei leucociti sotto l'azione degli anticorpi anti-leucociti 1. Neutrofili. Il gruppo più variabile di leucociti sono i neutrofili, il cui numero aumenta con molte infezioni, intossicazioni e distruzione dei tessuti.

La caratteristica della neutroposi attiva non è solo un aumento del numero totale di neutrofili nel sangue, ma anche la comparsa di forme immature in esso: il numero di cellule portatrici di coltellate aumenta, appaiono giovani neutrofili, a volte anche mielociti. Questo "ringiovanimento" della composizione neutrofila è chiamato spostamento dei leucociti a sinistra. Il ruolo protettivo dei neutrofili è determinato dalla loro funzione fagocitaria, dall'azione battericida e dal rilascio di enzimi proteolitici che promuovono il riassorbimento del tessuto necrotico e la guarigione delle ferite.

Molto spesso, si verifica uno spostamento rigenerativo in presenza di qualsiasi processo infiammatorio o un focus di necrosi. Uno spostamento di sinistra molto pronunciato verso i promielociti e anche i mieloblasti con leucocitosi significativa è chiamato reazione leucemoide. La diminuzione del numero di neutrofili - neutropenia assoluta - si verifica quando il midollo osseo inibisce l'esposizione a tossine di alcuni microrganismi (agenti causali della febbre tifoide, brucellosi, ecc.) E virus, radiazioni ionizzanti, un certo numero di farmaci.

2. Linfociti. La linfocitosi si osserva nel periodo di guarigione da malattie infettive acute, con mononucleosi infettiva, linfocitosi infettiva, leucemia linfocitica, rosolia, brucellosi, tireotossicosi.

Linfopenia assoluta si verifica nella malattia da radiazioni, lesioni sistemiche del sistema linfatico: linfoma, linfosarcoma.

3. Eosinofili. Si trovano nel sangue in quantità relativamente piccole (che si trovano principalmente nei tessuti), ma il loro numero aumenta, a volte in modo significativo, nei processi allergici (malattia da siero, asma bronchiale), invasioni elmintiche e dermatosi pruriginose.

Una diminuzione del numero di eosinofili - eosinopenia - fino alla loro completa scomparsa è osservata in sepsi, forme gravi di tubercolosi, tifoide e grave intossicazione.

4. Basofili. Sono portatori di importanti mediatori del metabolismo dei tessuti ("equivalenti" di sangue delle cellule dei tessuti grassi). Quando un organismo viene sensibilizzato, il loro numero aumenta e quando l'allergene viene reintrodotto diminuisce bruscamente a causa della loro rottura.

5. Monociti L'aumento del numero di monociti - la monocitosi - è un indicatore dello sviluppo dei processi immunitari. I monociti sono riconosciuti come analoghi dei macrofagi dei tessuti. Il monocita si trova in un certo numero di malattie croniche (croniosepsis, tubercolosi, sifilide). La monocitopenia è talvolta osservata in forme settiche e ipertosse di febbre tifoide grave.

Agranulociti. Una caratteristica distintiva degli agranulociti è il nucleo non segmentato e il citoplasma basofilo (blu).

I linfociti sono le dimensioni dei leucociti più piccoli. Il nucleo è rotondo, ovale o a forma di fagiolo; occupa gran parte della cellula, intensamente colorata. Il citoplasma della maggior parte dei linfociti con un bordo stretto circonda il nucleo, è colorato in un colore blu chiaro e viene chiarito al nucleo.

Il monocita è il più grande dei globuli rossi. Grande nucleo di forma irregolare e colore relativamente chiaro. Il citoplasma è di colore grigio-bluastro, fumoso, non è chiarificato al centro

Oltre a queste cellule, è raro nel sangue normale e le plasmacellule possono spesso presentarsi nelle malattie. Si distinguono per un nucleo denso posizionato in modo eccentrico, spesso con struttura simile a una ruota. Il numero di queste cellule aumenta con alcune malattie infettive, sepsi ferita e mieloma multiplo.

Nel calcolare la formula dei leucociti, l'attenzione è rivolta non solo ai cambiamenti quantitativi in ​​esso, ma anche ai cambiamenti qualitativi negli elementi del modulo. In precedenza, sono stati notati cambiamenti degenerativi nei leucociti. Con grave intossicazione, la granularità dei neutrofili diventa abbondante, grande, intensamente colorata e viene chiamata tossica (o tossogenica). A volte, macchie di sangue si trovano negli strisci di sangue, dipinti come la sostanza nucleare dei leucociti. Queste sono le cosiddette ombre Botkin - Humprecht - residui di cromatina nucleare, che indicano un aumento della fragilità dei leucociti, che porta alla loro rottura - leucocitolisi

99. Metodi per determinare il gruppo sanguigno, il concetto del fattore Rh.

1. Determinazione del gruppo sanguigno mediante sieri standard:

È richiesta la seguente attrezzatura:

o due serie di gruppi di siero I (0), II (A), III (B) standard di due diverse serie e una fiala di siero IV (AB)

o bottiglia con soluzione isotonica di cloruro di sodio con una pipetta

o piatto asciutto lavato e lavato

o vetrini

o aghi per lancia sterili per perforare la carne del dito

o palle di garza sterili,

I sieri standard per la determinazione del gruppo sanguigno secondo il sistema ABO sono prodotti con una marcatura a colori specifica.: I (0) - incolore, II (A) - blu, III (B) - rosso, IV (AB) - giallo. Siero conservato a 4-10 ° C. Il siero dovrebbe essere leggero e trasparente. La presenza di fiocchi, sedimenti, torbidità sono segni di inadeguatezza del siero. I primi segni di agglutinazione dovrebbero apparire non più tardi di 30 secondi.

La placca è divisa in 4 quadrati da una matita colorata e in senso orario sono indicati i quadrati I (0), II (A), III (B). Una grande goccia di siero di due gruppi di serie I (0), II (A), W (B) viene inserita nel quadrato corrispondente della piastra con una pipetta. Il polpastrello viene trattato con alcool e un ago viene perforato sulla pelle. La prima goccia di sangue viene rimossa con una palla di garza, le successive gocce in diverse parti del vetrino vengono applicate successivamente alle gocce di siero e accuratamente agitate. Una goccia di sangue dovrebbe essere 5-10 volte meno di una goccia di siero. Quindi scuotendo la piastra accuratamente mescolare il sangue con il siero. I risultati preliminari vengono valutati dopo 3 minuti, dopo di che viene aggiunta una goccia di soluzione isotonica di cloruro di sodio, miscelata nuovamente scuotendo la piastra e dopo 5 minuti viene eseguita una valutazione finale della reazione di agglutinazione.

Con un test di isoemglutinazione positivo, i fiocchi e i chicchi dei globuli rossi aderiti non divergono quando si aggiunge una soluzione isotonica di cloruro di sodio e agitazione.

Quando una reazione negativa gocce di siero su un piatto trasparente, uniformemente rosa, non contengono scaglie e grani.

Sono possibili le seguenti 4 combinazioni di reazioni di agglutinazione con sieri standard dei gruppi I (0), II (A), III (B).

v Tutti i 3 sieri di entrambe le serie non agglutinano. Esame del sangue -

Io gruppo.

v La reazione isohemagglutination è negativa con i gruppi sierici P (A) di entrambe le serie e con i gruppi sierici I (0) e III (B). Esame del sangue -

II gruppo (A).

v La reazione isohemagglutination è negativa con siero del gruppo III (B) in entrambe le serie e positivo con siero dei gruppi I (0) e II (A). Esame del sangue -

III (B) gruppo.

v I gruppi di siero I (0), II (A), III (B) danno una reazione positiva in entrambe le serie. Il sangue appartiene al gruppo IV (AB). Ma prima di dare una tale conclusione, è necessario eseguire una reazione isohemagglutination con siero standard (AB) del gruppo utilizzando la stessa procedura. Un test isohemagglutination negativo consente infine di assegnare il sangue del test al gruppo IV (AB).

2. Il concetto del fattore Rh.

Un altro antigene (agglutinogeno) è stato trovato negli eritrociti, che è stato chiamato fattore Rh. Tutte le persone sono divise in individui con sangue Rh positivo (Rh +) e Rh negativo (Rh). È stato stabilito che l'85% delle persone negli eritrociti contiene il fattore Rh, cioè il loro sangue è Rh-positivo e il 15% non lo contiene, cioè il sangue di queste persone è Rh negativo. Per il fattore Rh (antigene Rh), normalmente non vi è alcun anti-Rh-agglutinina (anticorpi preconfezionati) nel sangue. Tali anticorpi compaiono nel siero di sangue solo come risultato di immunizzazione di una persona con sangue Rh-negativo con erythrocytes Rh positivo. Tale immunizzazione si verifica a causa di trasfusioni ripetute di sangue Rh positivo a un ricevente Rh-negativo o durante la gravidanza di una donna con sangue Rh positivo Rh positivo. Immunizzate in questo modo, le persone diventano sensibilizzate: quando vengono trasfuse con sangue Rh-positivo, si sviluppa una grave complicanza - uno shock trasfusionale.

Conta il numero di leucociti e piastrine

Fattori che influenzano la correttezza dello studio dei globuli bianchi

- lunga conservazione del sangue a temperatura ambiente

Norme del contenuto di leucociti nel sangue

Età Numero di leucociti

- 1 giorno 11,6 - 22,0

- 1 settimana 8.1.- 14.3

- 1 mese 7,6 - 12,4

- Adulti 4.0 - 9.0

Metodi per determinare il numero di leucociti nel sangue.

- Conteggio del numero di leucociti nella camera di conteggio

- Conteggio dei leucociti in analizzatori ematologici

Determinazione del numero di leucociti nella camera di conteggio.

- Il conteggio dei leucociti al microscopio viene effettuato dopo la lisi dei globuli rossi in 100 quadrati grandi della griglia di conteggio e ricalcolati per 1 litro di sangue, in base al volume dei quadrati e alla diluizione del sangue. Il conteggio dei leucociti deve essere effettuato entro 2-4 ore dalla raccolta del sangue.

- Se ci sono globuli rossi nucleati nel sangue periferico, essi non vengono lisati e contati insieme ai leucociti. In questo caso, per determinare il vero numero di leucociti, il numero di celle nella riga rossa viene sottratto dal numero totale di celle contate.

- Ad esempio: il numero totale di leucociti nel calcolo nella camera (o nell'analizzatore) -45x109 / l. Nel calcolare la formula dei leucociti, è stato rilevato che sono presenti 50 eritroblasti (normoblasti) per 100 leucociti.

Calcoliamo il vero numero di leucociti nel sangue:

150 celle - 45 x 109 / l

100 cellule (leucociti) - X

X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l

Quindi, il vero numero di leucociti nel sangue è 30 x109 / l.

Le principali fonti di errori nel calcolo dei leucociti nella camera:

- Rapporto errato di volume di acido acetico e del sangue prelevato in una provetta.

- Soluzione di acido acetico preparata in modo errato (a una concentrazione superiore al 5%, alcuni leucociti possono lisare, il che porterà a una sottostima del risultato).

- Esposizione prolungata del campione a temperature superiori a 28 ° C, che può accelerare la lisi dei leucociti nel campione e portare a una sottostima del risultato.

- Riempimento errato della camera di Goryaev. Come per il calcolo dei globuli rossi, la camera deve essere lasciata per 1 minuto per sistemare le cellule.

- La fotocamera Goryaev non è stata lavata abbastanza bene dopo la definizione precedente. I leucociti rimasti nella camera possono sovrastimare i risultati dell'analisi.

Metodi di conteggio delle piastrine

- nella camera di conteggio

Ogni gruppo di metodi presenta vantaggi e svantaggi.

- Il conteggio delle piastrine nella camera è sufficientemente preciso, non è necessario calcolare il numero di globuli rossi. D'altra parte, questo metodo è più laborioso, poiché le piastrine nella forma nativa sono rappresentate da elementi piccoli e scarsamente contrastati. Lo svantaggio del metodo è il conteggio delle piastrine nelle prossime ore dopo l'assunzione di sangue.

- Determinare il numero di piastrine negli strisci di sangue è significativamente inferiore nella sua accuratezza al metodo della camera o ai contatori automatici. Gli errori nel conteggio degli strisci di sangue possono essere dovuti alla scarsa qualità dello striscio e alla distribuzione irregolare associata delle piastrine, determinazione inaccurata del numero di globuli rossi. Uno svantaggio significativo del metodo è la necessità di contare simultaneamente piastrine e globuli rossi nel sangue. Il vantaggio è la capacità di studiare le piastrine in qualsiasi momento, indipendentemente dal momento del prelievo di sangue.

- Il metodo per determinare le piastrine utilizzando un analizzatore ematologico consente di determinare con precisione il numero di piastrine, il loro volume medio e la distribuzione per volume.

Metodo unificato per contare il numero di leucociti del sangue nella camera di conteggio;

Metodi per contare il numero di leucociti nel sangue

Metodi unificati 2 per determinare il numero di leucociti nel sangue:

- nella camera di conteggio;

- utilizzando analizzatori ematologici.

Principio I leucociti vengono contati al microscopio in un certo volume della camera di conteggio con diluizione costante del sangue dopo la distruzione dei globuli rossi.

Reagente: soluzione al 3-5% di acido acetico, colorato con una soluzione acquosa di blu di metilene per colorare i nuclei dei leucociti e facilitarne il conteggio. La soluzione è di colore blu, stabile nello stoccaggio.

Attrezzatura speciale: microscopio, camera di conteggio Goryaeva.

Il corso della determinazione. Utilizzando una pipetta di misurazione o un dispensatore automatico, si versano esattamente 0,4 ml di soluzione di acido acetico nella provetta di agglutinazione e si aggiungono 0,02 ml (capillare Sali) di sangue. Lavare il capillare più volte con una soluzione acida e miscelare il contenuto del tubo. Ciò si traduce in una diluizione del sangue 20 volte. Lasciare fino al conteggio, ma non più di 2-4 ore dopo il prelievo di sangue. La camera di Goryaev è pronta per il lavoro strofinando un vetro di copertura in modo da far apparire gli anelli arcobaleno. Ancora una volta, scuotere a fondo il contenuto del tubo e riempire la camera Goryaev con questa miscela usando una pipetta Pasteur o una bacchetta di vetro con un'estremità fusa. Lasciare la camera di conteggio piena per 1 minuto in posizione orizzontale per la sedimentazione dei leucociti. I leucociti sono contati in 100 quadrati grandi non grafici della camera di conteggio nelle condizioni: il condensatore è abbassato, l'oculare 10x o 15x, la lente 8x. Il conteggio inizia dall'angolo in alto a sinistra della griglia della telecamera Goryaev. Quando contano i leucociti, sono guidati dalla regola: tutte le celle all'interno del quadrato e sulle linee di demarcazione vengono conteggiate se per lo più entrano nel quadrato. Le celle intersecate da una linea divisoria esattamente a metà sono contate solo su due lati di un quadrato (ad esempio, la sinistra e la cima).

Calcolo. Quando si calcola il numero di leucociti in 1 ml di sangue, utilizzare la formula:

- il numero di leucociti in 1 ml di sangue;

a - il numero di leucociti, calcolato in 100 quadrati grandi;

4000 - fattore di conversione del volume a 1 ml, in base al volume del quadratino, che è μl;

1600 - il numero di quadratini piccoli contati;

20 - diluizione del sangue.

Per convertire il numero di leucociti in unità SI (in 1 l di sangue), la cifra risultante viene moltiplicata per 10 6.

Praticamente per determinare il contenuto di leucociti in 1 l di sangue, il numero di leucociti, calcolato in 100 quadrati grandi della camera di conteggio, viene moltiplicato per 50, diviso per 1000 (cioè, trasferito a una virgola di 3 segni a sinistra) e moltiplicato per 10 9.

Metodi di conteggio dei leucociti nella camera di Goryaev, norme di indicatori e deviazioni

La camera Goryaev è un dispositivo per misurare il numero di cellule e particelle in un determinato volume di liquido (sangue, urina), costituito da uno speciale oggetto spesso e da un vetro di copertura.

Un vetrino ha un'area incassata nel mezzo, sulla quale è applicata una griglia di 225 quadrati grandi. Di questi quadrati, 25 sono equamente suddivisi in 16 quadrati più piccoli. A causa di questo volume della griglia, il calcolo viene eseguito in modo più accurato rispetto ad altri dispositivi portatili di conteggio.

Servizio fotografico

Dopo aver usato lo strumento, il vetrino viene disinfettato per immersione in una soluzione di formalina al 4% per un'ora o in una soluzione di etanolo al 70% per mezz'ora. Successivamente, la camera viene accuratamente lavata con acqua distillata. Il liquido in eccesso viene rimosso con un panno morbido. Vale la pena prestare attenzione al fatto che la fotocamera non può essere cancellata con un batuffolo di cotone a causa delle fibre che aderiscono ad essa. Vetro conservato in un luogo asciutto.

Durante l'uso della telecamera, vengono calcolati PE che si trovano all'interno del quadrato della griglia e sulle linee superiore e sinistra del suo perimetro. In questo caso, le particelle che toccano le linee destra e inferiore del perimetro durante il calcolo di questa cella non sono incluse.

Determinazione dei leucociti nel sangue

Metodo di conteggio dei leucociti

Il calcolo del numero di leucociti inizia con la diluizione del sangue in una soluzione al 3-5% di acido etanoico con blu di metile per 20 volte. Lavorare il materiale prima dell'uso asciugare con una garza.

Il vetro di copertura deve essere pulito prima della comparsa degli anelli colorati di Newton. Successivamente, la camera viene riempita con sangue diluito, mentre le prime due gocce vengono rilasciate su carta da filtro. Il liquido entra nella camera a causa della proprietà capillare dell'acqua. È importante assicurarsi che nulla si riversi nelle scanalature durante il riempimento. Se ciò accade, il liquido viene delicatamente rimosso con carta da filtro. Quindi lascia la griglia da solo per un minuto, in attesa che la FE smetta di muoversi.

Il conteggio dei globuli bianchi viene effettuato all'interno di un centinaio di grandi quadrati a basso ingrandimento, cioè con un oculare 10x e un obiettivo 8x, secondo la regola di Egorov. La figura risultante viene utilizzata nella formula.

X = (n × 250 × 20) / 100 o X = n × 50

X - il numero di leucociti.

n è il numero ottenuto contando nella camera.

Il numero di leucociti è determinato, tenendo conto del numero di grandi quadrati della griglia - 100 e della diluizione del sangue - 20.

Com'è il conteggio dei leucociti

Tasso e anomalie dei leucociti

Il tasso di leucociti nell'uomo è 4,0 - 9,0 × 10⁹ / l. O, diversamente, circa 6.000 globuli bianchi si trovano in 1 mm cubo di sangue.

I fattori fisiologici esterni possono influenzare le deviazioni dalla norma:

• assunzione di cibo prima della donazione di sangue;
• lo stress;
• gravidanza o mestruazioni nelle donne;
• ipotermia o surriscaldamento;
• grande sforzo fisico prima del test.

Se il numero di globuli bianchi supera 9,0 × 10⁹ / l (i leucociti sono elevati), questa condizione è chiamata leucocitosi. Un quadro simile può essere visto con malattie del sangue maligne, infezioni, danni da radiazioni e avvelenamento.

I farmaci possono anche aumentare il numero di leucociti. Necrosi di tessuti, forte sanguinamento, anche a causa di operazioni, coma renale, malattie cardiache - tutto questo può portare a leucocitosi.

La caduta del numero di leucociti inferiore a 3,9 × 10⁹ / l è chiamata leucopenia. Tuttavia, in alcune persone un numero fisso di leucociti è fissato a 3,5 × 10⁹ / l. Si ritiene che tali persone mantengano una riserva di queste cellule nei tessuti 50 volte di più rispetto al sangue. Esiste anche una leucopenia funzionale dopo somministrazione di analgesici, sulfonamidi e altri farmaci, dopo un lungo lavoro muscolare, a seguito di infezioni e virus (tifo, influenza, morbillo).

Formula dei leucociti

Tutti i tipi di leucociti costituiscono la formula dei leucociti. Su di esso puoi identificare alcune patologie. Le norme della formula variano con l'età e il periodo della vita di una persona. Il turno è chiaramente visibile nelle donne durante la gravidanza o dopo il parto.

Metodi diversi sono usati per calcolare il rapporto tra i tipi di queste cellule, ma sono tutti legati al fatto che le cellule più pesanti (i basofili, ad esempio) si trovano più vicine al bordo dello striscio, e i linfociti, come le cellule leggere, rimangono nel mezzo.

• Metodo Filipchenko. In questo metodo, il calcolo viene eseguito lungo la linea retta trasversale del bordo da un'estremità all'altra. L'ictus è mentalmente diviso in tre parti.
• Metodo Schilling I leucociti sono contati in quattro aree di una macchia.

I dati ottenuti sono registrati nella tabella. Individualmente il numero di ciascun tipo di globuli bianchi viene calcolato dalle formule. Segnati quegli elementi che sono venuti in vista. Il punteggio viene mantenuto fino al momento in cui la somma di tutte le celle contate è 100.

Metodi per il conteggio dei leucociti nelle urine

Nelle urine viene calcolato il numero di leucociti nella cellula Goryaeva Nechiporenko. Questa analisi è necessaria per monitorare la malattia renale. L'esame periodico delle urine aiuta a monitorare la correttezza del trattamento e l'efficacia della terapia prescritta.

Raccolta delle urine

Nello studio è solo la prima urina del mattino nel mezzo della minzione. È importante che il paziente segua le regole di base per la raccolta di questo biomateriale. Non è richiesto un ulteriore addestramento speciale per lo studio.

Metodo di calcolo

10 ml di urina appena raccolta vengono centrifugati per 3 minuti a 2,5 migliaia di giri al minuto. Prima di questo, è necessario assicurarsi che l'urina, al fine di evitare una parziale disintegrazione delle cellule, abbia una reazione debolmente acida.

Utilizzando una pipetta con un'estremità stretta e tirata, rimuovere lo strato superiore. Lasciare in vitro da 0,5 ml di urina a 1 ml, a seconda del volume di sedimento.

Il precipitato viene miscelato delicatamente con il supernatante. La soluzione risultante viene utilizzata per riempire la camera di conteggio Goryaev secondo un principio simile, che viene utilizzato nel calcolo del PV del sangue. La fotocamera viene lasciata in pace per 3 o 5 minuti.

I globuli bianchi devono essere contati in grandi quadrati su tutta la griglia con un oculare 7x e un obiettivo 40x.

La figura risultante viene utilizzata nella formula:

X = (a / 0,9) × (1000 / V)

X - il numero di leucociti in 1 ml di urina.

a - la quantità calcolata divisa per il volume della camera in 1 μl di sedimento urinario.

v - La quantità di urina prelevata per lo studio.

1000 - la quantità di sedimento.

Questo è importante! Norma dei leucociti: in 1 ml di urina non più di 2 × 10³ di globuli bianchi.

Conta leucocitaria nel sangue

Il personale di laboratorio per rilevare la conta ematica dei leucociti usa più spesso la camera di Goryaev. Il conteggio dei leucociti nella camera di Goryaev è un metodo meno accurato rispetto alla determinazione dei leucociti che utilizzano dispositivi elettronici. L'entità dell'errore è ± 7%.

Come è fatto il conteggio

1. Nel tubo versare 0.4 millilitri del fluido di diluizione e 0,02 millilitri di sangue capillare. L'allevamento pronto è considerato uguale a 1:20.
2. Come fluido di diluizione, viene solitamente utilizzata una soluzione al 3 o 5% di acido acetico. È pre-colorato con blu di metilene, che per reazione colora i nuclei dei leucociti.
3. Prima di riempire la camera, il tubo Goryaev viene scosso il più accuratamente possibile. Il riempimento della fotocamera è lo stesso del conteggio dei globuli rossi.

Funzionalità di calcolo

Per il numero di leucociti significativamente inferiori ai globuli rossi, è per questo motivo che il calcolo viene effettuato in 100 quadrati grandi. In 100 quadrati è stato calcolato un conteggio dei leucociti.

Con un volume di un quadrato piccolo di 14.000 millimetri cubici e una diluizione del sangue di 20 volte, il numero di leucociti viene calcolato come segue: 4000x20, e quindi diviso per 1600. Si scopre 1/2 x a.

Per ottenere un conteggio dei globuli bianchi in 1 μl, la cifra calcolata deve essere divisa per 2 e aggiungere altri due zeri.

La deviazione dei leucociti dal livello indica leucocitosi e leucopenia e richiede un esame dettagliato immediato, poiché vi è un'alta probabilità di presenza di tubercolosi, polmonite, sepsi, febbre tifoide, malattia da radiazioni.