L'epatite C è una patologia infiammatoria in cui sono colpite le cellule del fegato. La malattia si sviluppa a seguito della penetrazione del virus dell'epatite C (HVC) nel corpo umano.
La forma della malattia può essere acuta o cronica.
Molto spesso i sintomi della forma acuta di patologia nella maggior parte dei pazienti sono assenti, a volte la malattia è accompagnata da sensazioni dolorose nell'addome, diminuzione delle prestazioni, aumento della fatica, perdita di appetito, una sfumatura scura di urina, scolorimento delle feci, gonfiore della pelle e delle mucose, dolore alle articolazioni. Tali sintomi di solito si verificano 6-8 settimane dopo l'infezione, ma possono comparire dopo sei mesi.
Con lo sviluppo di tali fenomeni, è necessario contattare un'istituzione medica e sottoporsi a un esame completo dell'intero organismo. Come parte di una visita medica, viene eseguito un esame del sangue per l'epatite C.
Oggi, con l'aiuto delle moderne tecniche diagnostiche, questa patologia può essere identificata nella fase iniziale di sviluppo, che aumenta significativamente le possibilità di una cura completa della malattia.
I seguenti gruppi di persone sono tenuti a testare l'epatite C:
- le donne nel periodo del trasporto di un bambino;
- persone con segni di epatite;
- personale medico;
- potenziali donatori di organi e sangue;
- tossicodipendenti, persone infette da HIV, vita intima promiscua.
Elenco degli studi richiesti
Quali test dovrei prendere per l'epatite C? Per diagnosticare accuratamente la malattia, identificarne le cause e determinare lo stato del parenchima epatico, sono necessari i seguenti studi:
- esami generali delle urine e del sangue;
- analisi biochimica del sangue;
- Analisi PCR;
- esame del sangue per il rilevamento di anticorpi contro l'HVC;
- analisi del sangue per gli anticorpi disponibili alle proprie cellule epatiche;
- biopsia epatica.
La decifrazione di un esame del sangue per l'epatite C viene eseguita da uno specialista. Considerare ogni metodo di ricerca in modo più dettagliato, così come comprenderemo quale analisi dell'epatite C è la più accurata.
Analisi generale
Quando si esegue un emocromo completo per l'epatite C, è possibile valutare le condizioni del paziente. I cambiamenti nei parametri del sangue non sono percepiti come sintomi specifici di epatite, tuttavia, con questa malattia, ci sono tali disturbi come:
- concentrazione di emoglobina, piastrine e diminuzione dei leucociti;
- aumenta il contenuto di linfociti;
- la coagulazione del sangue è violata;
- aumenti della velocità di eritrosedimentazione (ESR).
L'analisi generale delle urine rende possibile rilevare nella sua composizione l'urobelina, un pigmento biliare che si verifica nelle urine a causa del funzionamento alterato del fegato.
Analisi biochimiche
L'analisi biochimica del sangue nell'epatite C consente di identificare tali disturbi come:
- livelli elevati di enzimi epatici (alanina transaminasi - ALT e aspartato aminotransferasi - AST), che entrano nel sangue quando gli epatociti sono danneggiati. In uno stato normale, questi indicatori per gli uomini non dovrebbero essere più di 37 IU / l, per le donne - non superiore a 31 IU // l. Un'aumentata concentrazione di ALT e AST nell'epatite C asintomatica è spesso l'unico sintomo di questa malattia. Inoltre, aumentano gli aumenti di fosfatasi alcalina glutamil transpeptidasi ematica (normalmente non superiore a 150 IU / l).
- il contenuto di bilirubina (sia generale che diretta) nel sangue viene superato. Se il livello di pigmento giallo nel siero supera 27-34 μmol / l, si verifica ittero (fino a 80 μmol / l in forma lieve, 86-169 μmol / l in moderatamente grave, sopra 170 μmol / l in forma grave).
- Il livello di albumina è abbassato, la concentrazione di gamma globuline, al contrario, è aumentata. Le gammaglobuline sono costituite da immunoglobuline - anticorpi che proteggono il corpo dalle sostanze che causano malattie.
- aumento della concentrazione di trigliceridi nel sangue.
Test PCR
Utilizzando la tecnica PCR, è possibile diagnosticare l'agente eziologico della malattia. L'esecuzione di questa analisi consente di rilevare un virus nel sangue, anche se la sua quantità è minima. L'analisi PCR per l'epatite C consente di determinare un'infezione esistente nel sangue già dopo 5 giorni dal momento dell'infezione, cioè molto tempo prima che compaiano gli anticorpi.
Se il risultato di un esame del sangue per epatite C mediante PCR è positivo, questo indica la presenza di un'infezione attiva nel corpo. Utilizzando questo metodo, è possibile condurre uno studio qualitativo e quantitativo di HVC RNA.
Durante l'analisi qualitativa della PCR per l'epatite C, è possibile rilevare un virus esistente nel corpo umano.
Questa procedura diagnostica viene eseguita se l'anti-HVC viene rilevato nel sangue.
La decifrazione dell'analisi per l'epatite C contiene informazioni che l'infezione è stata rilevata o non rilevata nel corpo. Normalmente, nel sangue non si trovano sostanze patologiche.
Se il test dell'epatite C è positivo, significa che il patogeno si divide continuamente e infetta le cellule del fegato.
I risultati di questa analisi possono essere inaffidabili, è possibile nei seguenti casi:
- biomateriale contaminato usato;
- in presenza di eparina nel sangue;
- in presenza di sostanze chimiche o proteiche (inibitori) nel biomateriale studiato, che influenzano gli elementi della PCR.
L'analisi quantitativa dell'epatite C fornisce informazioni sulla quantità di virus contenuto nel sangue, cioè determina la carica virale. Con questo concetto si intende il volume di HVC RNA presente nel sangue (ad esempio, in 1 ml). Nell'interpretazione dell'analisi quantitativa dell'epatite C, questo valore è espresso in equivalente digitale, misurato in UI / ml.
Il sangue per PCR per l'epatite C viene assunto prima delle misure terapeutiche. Dopo l'analisi viene eseguita a 1, 4, 12 e 24 settimane. Lo studio alla settimana 12 è indicativo e viene condotto per valutare l'efficacia delle procedure terapeutiche.
Se il test per l'epatite C durante la gravidanza è positivo e vengono superati i valori di carica virale, il rischio di trasmissione di agenti patogeni dalla madre malata al bambino aumenta più volte. Inoltre, con una elevata carica virale, l'implementazione di misure terapeutiche è difficile.
Secondo la trascrizione dei test per l'epatite C, se i valori di carica virale superano 800.000 IU / ml, allora è alto. Se le cifre sono inferiori a 400.000 IU / ml, il livello di carica virale è considerato basso.
L'analisi dell'epatite C mediante PCR è considerata la più accurata e presenta numerosi vantaggi rispetto ad altre opzioni di ricerca, in particolare:
- diagnosi diretta dell'agente eziologico della malattia. Quando si eseguono studi tradizionali sono determinati dalla presenza di marcatori proteici che sono prodotti di scarto di agenti patogeni. Questo indica solo che l'infezione è presente nel sangue. Durante il test per l'epatite C mediante PCR, è possibile determinare il tipo di patogeno della patologia pericolosa.
- specificità della tecnica. Durante questa procedura, nel biomateriale viene determinata una regione di DNA unica che corrisponde a un solo tipo di agente patogeno. Ciò minimizza la probabilità di risultati falsi.
- alta sensibilità. Quando si esegue l'analisi PCR, è possibile rilevare la quantità minima di virus. Questo è importante se vengono identificate sostanze patogene condizionatamente che rappresentano una minaccia solo se il loro livello aumenta.
- Quando si utilizza questa tecnica in un campione di biomateriale, è possibile rilevare diversi agenti patogeni contemporaneamente.
- può rilevare infezioni nascoste. Inoltre, l'analisi consente di diagnosticare microrganismi patogeni che vivono all'interno delle cellule e hanno un'elevata variabilità antigenica.
Se i risultati del test sono positivi, le tracce del virus si trovano nel biomateriale, quindi la rete ha un'infezione nel corpo.
Un'analisi PCR negativa per l'epatite C indica che non vi sono tracce di infezione nel biomateriale.
Studio immunologico
Questo metodo consente di identificare gli anticorpi contro tutti i tipi di virus dell'epatite, così come gli anticorpi contro le cellule del fegato del proprio corpo, la cui comparsa contribuisce allo sviluppo dell'epatite autoimmune.
I risultati ottenuti durante lo studio sono rilevanti per 3 mesi, quindi è necessario ri-donare il sangue per l'epatite C.
È anche possibile eseguire uno studio rapido utilizzando strisce reattive speciali. Questa analisi consente di determinare gli anticorpi del virus C nella composizione del sangue e della saliva, procedura che può essere eseguita indipendentemente, a casa.
Biopsia epatica
Per eseguire questa analisi, viene prelevato un elemento del parenchima epatico e viene eseguito un esame istologico del biomateriale ottenuto. Ciò consente di valutare le condizioni del corpo: identificare focolai infiammatori, necrotici, stadio di fibrosi e così via.
Oggi vengono utilizzati test che sostituiscono l'analisi istologica del parenchima epatico.
Per valutare lo stadio del danno epatico e l'intensità del processo di infiammazione, vengono utilizzati biomarcatori del sangue venoso specifici. Utilizzando Fibrotest, è possibile stimare il grado di crescita del tessuto fibroso.
Quando si esegue Actitest è possibile ottenere informazioni sull'intensità dei processi patologici nel parenchima epatico. Utilizzando Steatototesta è possibile diagnosticare il tessuto adiposo del fegato e valutare l'entità di questo processo. Fibromax comprende tutti i test sopra elencati e può includere altri studi.
Preparazione per lo studio
Quali sono i test per l'epatite C e come abbiamo scoperto questo o quel tipo di ricerca. È altrettanto importante sapere come prepararsi per l'analisi.
Per ottenere risultati affidabili, si raccomanda di rispettare i seguenti requisiti:
- Le prove dell'epatite C devono essere prese al mattino, a stomaco vuoto. L'ultima volta il cibo dovrebbe essere consumato almeno 8 ore prima dello studio.
- Il biomateriale può essere raccolto durante il giorno o la sera. In questo caso, è importante che trascorrano almeno 5-6 ore tra l'ultimo pasto e l'analisi.
- prima di donare il sangue per l'epatite C, scartare il tè, il caffè, il succo o altre bevande, è ammessa solo acqua.
- 48 ore prima dello studio, è necessario escludere l'uso di cibi grassi, fritti e bevande contenenti alcol.
- per almeno un'ora prima dell'analisi, devi astenersi dal fumare.
- l'analisi non deve essere eseguita immediatamente dopo un esame ecografico, strumentale, a raggi X, seduta di massaggio o fisioterapia.
- un giorno prima dell'esecuzione dello studio, è necessario escludere l'uso di droghe e attività fisica intensiva. Lo stress emotivo è anche controindicato.
- Si consiglia di trascorrere 15 minuti prima di eseguire lo studio in uno stato calmo.
Effettuare la procedura di raccolta del sangue
Dove fare il test per l'epatite C? Il biomateriale viene utilizzato per ulteriori indagini nel laboratorio di un istituto medico o a casa del paziente.
Il sangue da una vena è preso come segue:
- utilizzando un laccio emostatico speciale avvolto attorno all'avambraccio del paziente, il flusso venoso viene interrotto. Grazie a tali manipolazioni, le vene saranno riempite di sangue e saranno più visibili, il che faciliterà notevolmente il processo di inserimento dell'ago.
- l'area della pelle in cui verrà inserito l'ago viene accuratamente trattata con alcool o liquido contenente alcol.
- Un ago viene inserito delicatamente in una vena, quindi viene attaccata una provetta, appositamente progettata per la raccolta del sangue.
- Immediatamente dopo l'inserimento dell'ago nella vena, l'imbragatura viene rimossa dal braccio del paziente.
- dopo aver raccolto il volume di sangue necessario per l'analisi, l'ago viene delicatamente rimosso dalla vena.
- Sul sito di iniezione deve essere applicato un tampone di cotone sterile o una garza inumidita con alcool.
- per prevenire il verificarsi di un ematoma, il tampone deve essere premuto con un certo sforzo contro l'area di inserimento dell'ago, piegare il braccio all'altezza dell'articolazione del gomito e tenerlo in questa posizione per diversi minuti. Tali azioni aiuteranno anche a fermare il sangue più velocemente.
A condizione che la tecnica di amministrazione interna sia buona, questa procedura è assolutamente sicura e non causa sensazioni dolorose.
In rari casi, dopo la raccolta del sangue, le vene possono gonfiarsi. Questo fenomeno è chiamato "phlebitis". Un impacco (non caldo) aiuterà a risolvere il problema, dovrebbe essere applicato a zone gonfie della pelle più volte al giorno.
Alcuni problemi possono verificarsi anche in presenza di una patologia emorragica. L'assunzione di aspirina, warfarin e altri fluidificanti del sangue può causare sanguinamento. Ecco perché prima di eseguire l'analisi è necessario rifiutarsi di prendere qualsiasi farmaco. Se il trattamento non può essere annullato, è necessario informare lo specialista.
Date e prezzi
Quanto viene testato per l'epatite C? I risultati di un esame del sangue per l'epatite possono essere pronti in poche ore e in pochi giorni (di solito non più di 8 giorni). La durata della preparazione dei risultati dipende dal tipo di virus e dal metodo di analisi scelto. Più veloce è lo studio condotto con il metodo PCR. I risultati in questo caso saranno pronti in poche ore.
Quanto costa un test per l'epatite C? A seconda della clinica e della complessità dello studio, il prezzo della procedura può variare da 400 a 11.000 rubli.
Dovresti essere consapevole che potrebbero essere necessarie diverse settimane per formare una quantità sufficiente di anticorpi contro HVC. Pertanto, in una fase iniziale dello sviluppo della patologia, il risultato di uno studio potrebbe essere falso-negativo.
Inoltre, ottenere dati inaffidabili è possibile con analisi di scarsa qualità e violazione delle condizioni di trasporto del biomateriale ottenuto (i campioni devono essere consegnati al laboratorio per un massimo di 2 ore dopo il prelievo di sangue).
Se il risultato dello studio è positivo, è necessario contattare immediatamente un medico per le malattie infettive. Lo specialista effettuerà un ulteriore esame e prescriverà il trattamento appropriato.
Cos'è l'analisi PCR e la carica virale?
La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un metodo di laboratorio per la determinazione del DNA e dell'RNA. È stato testato per la prima volta quasi mezzo secolo fa dall'americano Carey Mullis. Questa analisi supersensibile è in grado di identificare il vettore del genoma da una singola molecola di origine contenuta nel sangue, nella saliva o nella pelle.
Il metodo PCR ha grandi prospettive, è usato non solo nella medicina, ma anche nell'ingegneria genetica e nella scienza forense. Con esso, clona e crea nuovi tipi di DNA, determina il grado di parentela. Un criminale è identificato da un pezzo di epitelio trovato sulla scena del crimine.
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Analisi PCR dell'epatite: cosa stanno facendo e perché?
Perché è necessaria un'analisi PCR per sospetta epatite C, che cos'è?
Il virus dell'epatite C è un virus a RNA che contiene 6 genotipi e fino a 500 sottotipi. Di tutte le epatiti, questo virus ha la più alta capacità di mutazione e supera la barriera protettiva del sistema immunitario. Del numero totale di casi di epatite, il virus C ha causato il 70% dei casi cronici e il 30% di cirrosi e cancro al fegato.
L'essenza del metodo: parte del gene in studio con l'aiuto di speciali enzimi e condizioni costretti a moltiplicarsi in vitro. L'analisi PCR consente di determinare il ceppo virale, senza il quale è impossibile condurre un trattamento efficace: ciascun genotipo è diversamente sensibile ai farmaci antivirali. Vengono utilizzati due tipi di PCR:
La terapia antivirale richiede un monitoraggio costante al fine di regolare tempestivamente il trattamento, e per questi scopi viene utilizzata anche la reazione a catena della polimerasi.
PCR qualitativa e quantitativa
La PCR qualitativa sull'epatite C dà la risposta: c'è un ceppo di virus C nel sangue del paziente e quale? La genotipizzazione è necessaria per chiarire la diagnosi, la prognosi della malattia e determinare i tempi del trattamento.
Secondo la classificazione accettata, un gene è indicato da un numero e un sottotipo è una piccola lettera latina.
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Istruzioni per l'uso
Decifrare la tabella dei virus del genotipo C:
- Genotipo 1a, 1b, 1c
- Genotipo 2a, 2b, 2c, 2 d
- Genotipo 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
- Genotipo 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
- Genotipo 5 a
- Genotipo 6 a
I genotipi più comuni 1,2,3. In Russia, i più comuni sono i ceppi 1a, 1b, 2 e 3 del virus C.
Il genotipo del virus 1b è più difficile di altri da trattare, nel 90% diventa cronico, di cui il 30% rinasce come cancro al fegato o cirrosi.
I genotipi 2a e 3a hanno un grado di cronicità del 33-50%, più reattivo alla terapia antivirale.
Quando si conferma la presenza del virus, viene eseguito un test quantitativo di PCR per l'epatite C, che viene utilizzato per calcolare il numero di molecole di RNA presenti nel campione di laboratorio del paziente.
Analisi di decodifica
L'analisi PCR di alta qualità ha due risposte:
Negativo PCR significa che non è stato rilevato alcun agente patogeno nei campioni di sangue.
Una risposta positiva suggerisce il contrario: si trova l'RNA di uno o un altro genotipo del virus C.
La probabilità di affidabilità del risultato è del 95%. Il restante 5% è un errore causato da una persona. Questa possibilità è consentita a causa degli elevati requisiti per lo studio:
- regole di conservazione dei reagenti;
- qualifiche appropriate del personale medico;
- purezza del biomateriale.
Il kit PCR ha una precisione diagnostica del 100%.
La PCR quantitativa dell'epatite C RNA consente di determinare la carica virale sul corpo del paziente. Con il suo aiuto:
- lo stadio della malattia è specificato (acuto, cronico);
- determina l'efficacia del trattamento antivirale;
- Si scopre la necessità di una biopsia epatica.
In alcuni casi, il paziente non avverte alcun segno della malattia, mentre l'infezione da HCV viene rilevata mediante il metodo PCR. Ciò significa che la malattia si trova in una fase iniziale di sviluppo o in una forma cronica. Sono necessari ulteriori studi per chiarire la diagnosi, per l'inizio precoce del trattamento antivirale.
Carica virale dell'epatite C.
Il carico virale mostra l'attività del virus epatico, quanto attivamente avviene la sua riproduzione.
Cos'è questo?
L'epatite C PCR quantitativa è misurata in Unità Internazionali per 1 ml o IU / ml, il che significa quante copie di acido ribonucleico di un certo ceppo di virus C si trovano in 1 ml di sangue in esame.
Cosa è alto, cosa è basso?
L'analisi della carica virale consente di determinare la presenza di RNA virale a una concentrazione di 50 UI / ml. La normale carica virale è quando nessuna molecola di RNA dell'HCV viene rilevata mediante PCR.
Tabella di carico virale:
- bassa concentrazione da 600 UI / ml 3 * 104 UI / ml;
- media concentrazione da 3 * 104 IU / ml a 8 * 105 MM;
- alto livello superiore a 8 * 105 UI / ml.
Una bassa carica virale è un segnale che il trattamento terapeutico viene scelto correttamente e la prognosi per una cura per l'epatite C è favorevole.
Un'alta concentrazione di cellule virali indica che la malattia è in fase acuta. Il sangue del paziente è una fonte pericolosa di infezione.
Il carico virale, i cui indicatori sono a livello medio, caratterizza o lo stadio cronico di HWS, o può avere due tendenze di sviluppo: aumentarlo o diminuirlo.
Al suo completamento, dopo 6 mesi, viene eseguito il controllo della PCR.
Costo della diagnostica PCR
I seguenti sintomi dovrebbero essere causa di preoccupazione:
- debolezza generale;
- decolorazione della pelle, sclera dell'occhio, scarico;
- nausea;
- diminuzione dell'appetito;
- dolore nei muscoli e nelle articolazioni;
- pesantezza nell'ipocondrio destro;
- elevati livelli ematici di AST e ALT.
In contatto con pazienti infetti, nel periodo preoperatorio, l'esame di emodialisi è anche raccomandato.
Le cliniche statali effettuano gratuitamente un esame del sangue per la PCR se vi è un riferimento da uno specialista di malattie infettive o da un epatologo.
I servizi di diagnostica a pagamento della PCR sono forniti in tutte le principali città russe. Il costo dipende dal tipo di test, dall'attrezzatura disponibile, dalla tempistica e da altri fattori.
L'analisi PCR di alta qualità a Mosca e San Pietroburgo avrà un costo compreso tra 600 e 900 rubli. Nelle regioni - da 300 a 800 rubli.
La determinazione della carica virale dell'epatite C costerà 17.000-22.000 rubli. Per altri tipi di infezione, il prezzo della ricerca quantitativa: 1200-10000 rubli.
Vantaggi e svantaggi del metodo PCR
Quali sono i vantaggi del metodo di reazione a catena della polimerasi rispetto ad altri metodi diagnostici?
- Una vasta gamma di applicazioni. Utilizzando la PCR, utilizzando l'attrezzatura standard, è possibile identificare qualsiasi virus.
- Precisione della determinazione dell'agente patogeno. Utilizzando varie combinazioni di enzimi e tecniche di analisi, si ottiene una specifica del 100% dello studio per l'infezione indicata.
- Alta sensibilità La tecnica consente di rilevare la presenza di una molecola di virus nel sangue.
- Efficienza. L'analisi qualitativa è pronta in poche ore, quantitativa - in due giorni.
- Diagnosi del virus nel periodo di incubazione. Durante la PCR, l'agente patogeno non è determinato dalla presenza di anticorpi, quando il corpo ha una risposta immunitaria, ma prima dell'inizio del processo patologico, che facilita il trattamento.
Gli svantaggi della PCR sono il risultato dei suoi vantaggi:
- la purezza dell'analisi richiede il massimo grado di purezza, compresa l'aria in laboratorio, in modo che il DNA "estraneo" non entri nel campione;
- requisiti elevati per il personale impegnato nella raccolta e analisi del biomateriale.
Diagnosi con PCR per l'epatite C
Non tutti sanno perché utilizzano il metodo diagnostico della PCR per l'epatite C. Uno dei gruppi più comuni di malattie sono le malattie infettive del tratto gastrointestinale. Lo stomaco (ulcere), l'intestino (colite, enterite) e il fegato (epatite) sono più comunemente colpiti.
Tra tutti gli organi sopra elencati, il peso maggiore viene imposto al fegato. Nel corpo, il ruolo del fegato è estremamente importante:
- Quasi tutte le reazioni metaboliche avvengono nel fegato (è qui che si formano tutti i tipi di componenti vitali che permettono al corpo di funzionare pienamente).
- Il fegato è il principale organo di disintossicazione. Con il suo aiuto (in particolare attraverso la bile), vengono rimossi molti substrati che possono causare intossicazione e portare a gravi conseguenze.
Sfortunatamente, molte persone non controllano la loro salute, motivo per cui il fegato inizia a soffrire. Di solito si sviluppano epatiti di varie eziologie (virali, tossiche).
Definizione di epatite
L'epatite virale occupa un posto importante tra le malattie del fegato. La gravità del decorso della malattia, la complessità del trattamento li mettono al primo posto nella patologia dell'altra natura di questo organo.
Tutta l'epatite è divisa in acuta e cronica. Le epatiti A e B sono classificate come acute, tra le quali l'epatite C cronica.
Questa malattia è causata dal virus dell'epatite C. Una caratteristica è che la malattia può durare a lungo senza manifestazioni cliniche.
È trasmesso principalmente attraverso il sangue. Con il flusso di sangue, il virus entra nel fegato, dove inizia a moltiplicarsi nelle sue cellule. Come risultato dell'accumulo di virioni, si verifica la distruzione dell'epatocita infetto. In risposta a questo, gli anticorpi cominciano a essere prodotti, che iniziano ad attaccare i resti di epatociti. A causa di ciò, una piscina contro le cellule del fegato si sviluppa nel tempo, il che aggrava il decorso della malattia.
A causa del fatto che la malattia è lieve asintomatica o asintomatica e i segni clinici compaiono solo quando le cellule sono significativamente colpite, questa malattia richiede la creazione di metodi diagnostici per rilevare la sua presenza e adottare misure appropriate.
Diagnosi dell'epatite C: analisi qualitativa e quantitativa
Attualmente, per la diagnosi dell'epatite C, vengono utilizzati metodi quali la biopsia epatica e l'immunogramma.
Permettono di determinare direttamente la presenza di epatociti infetti (campioni di biopsia epatica) o anticorpi specifici contro le cellule interessate (immunogramma). Tuttavia, esiste un metodo che consente di determinare in modo affidabile la presenza del virus stesso. Questa è la reazione a catena della polimerasi PCR.
L'essenza di questo metodo sta nel fatto che in determinate condizioni, si verifica la produzione di catene di RNA. Ciò è dovuto al fatto che ci sono frammenti di una particella virale nel sangue o la biopsia in questione. Quando li si collega con alcune molecole nel mezzo, si verifica la sintesi di catene complementari all'RNA virale. Nella loro successiva analisi e confronto con la nota sequenza nucleotidica del virus dell'epatite C, è possibile determinare se il virus è presente nel corpo e se è presente un danno al fegato.
La PCR viene eseguita dopo il rilevamento di anticorpi specifici contro il virus dell'epatite nel sangue. Dopo il test viene eseguito il risultato: l'RNA viene "rilevato" o "non rilevato". Occasionalmente può dire "non abbastanza materiale" - in questo caso è necessario ripetere il test per l'epatite C.
Se il numero di particelle virali è inferiore all'importo minimo richiesto, allora possiamo dire che non c'è epatite e che quantità minime di materiale genetico potrebbero essere "confuse" a causa della mimica di materiale genetico o di sequenze di nucleotidi che potrebbero coincidere con il virus.
- Con la PCR, è possibile osservare un risultato negativo quando nel sangue sono presenti particelle virali, ma sono così piccole (l'infezione si è verificata di recente o l'analisi è stata preceduta da una terapia antivirale intensiva a lungo termine) che il sistema di test non è stato in grado di determinare normalmente la concentrazione. RNA - "non rilevato."
- Se la PCR ha un risultato positivo, ci sono così tante particelle virali nel sangue che il loro numero supera la soglia di sensibilità inferiore del sistema di test. In questo caso, c'è un alto rischio di sviluppare un processo infettivo (o è già presente in uno stadio piuttosto avanzato). Di solito un'elevata quantità di virus è già un'indicazione per il trattamento e il successivo trapianto di fegato.
A volte un test può diventare falso positivo o falso negativo.
Un risultato di PCR falso negativo di epatite è osservato nel caso in cui alcuni componenti sono presenti nel mezzo di reazione che inibiscono la formazione di copie della particella virale. Per questo motivo, non è possibile ottenere un'immagine reale dello stato del sangue, che contribuisca al passaggio del virus e alla progressione della malattia. La presenza di eparina nel sangue può anche influenzare la reazione (riducendo la viscosità relativa del sangue). L'interpretazione errata dell'analisi è possibile anche quando le condizioni di trasporto e conservazione del materiale in esame non sono state soddisfatte.
Risultati falsi positivi, quando viene diagnosticata l'epatite C, la PCR si verifica più spesso quando la provetta o l'ambiente di lavoro sono contaminati. Inoltre, si possono osservare risultati positivi con la presenza di virus dell'epatite di altri gruppi (a causa di una reazione crociata).
Analisi qualitativa della PCR per il rilevamento dell'epatite C
Anche la presenza nel sangue di un gran numero di crioglobuline influisce direttamente sulla condotta della PCR. Per questo motivo è indispensabile determinare la loro concentrazione nel sangue prima di testare l'epatite C al fine di rilevare una distorsione del risultato in anticipo e prevenirlo.
Dopo questi test, diventa chiaro se ci sono particelle virali nel sangue. Nel determinarli, si raccomanda di iniziare immediatamente la terapia antivirale per rallentare la progressione del processo. A differenza dell'epatite B, non esiste una cura completa per l'epatite C; la malattia passa solo nello stadio latente e inizia a procedere più lentamente. Il danno al fegato è inevitabile. Nell'ultima fase del processo, quando il fegato non riesce più a far fronte alla sua funzione, potrebbe richiedere il suo trapianto.
Il trattamento viene effettuato principalmente con due farmaci: interferone e ribavirina.
Dimostrato la loro efficacia nel rallentare il processo di sconfitta degli epatociti. Lungo la strada, la terapia infusionale è necessariamente prescritta per facilitare il lavoro del fegato.
Tutti i pazienti che hanno visto un aumento del numero di particelle virali nel sangue sono necessariamente registrati con un epatologo. Diverse volte all'anno, si consiglia di sottoporsi a un esame preventivo per determinare la progressione del processo e la rilevazione tempestiva delle indicazioni per il trapianto. Inoltre, è possibile utilizzare epatoprotettori, sebbene le opinioni dei medici differiscano in qualche modo. Alcuni credono che questi farmaci ti consentano di sospendere il processo e proteggere gli epatociti ancora non colpiti; altri sono convinti che non è sensato assumerli e deve essere effettuata una terapia antivirale intensiva.
Pertanto, l'epatite C appartiene alla categoria delle malattie, la cui identificazione presenta alcune difficoltà. Migliorare i metodi diagnostici e gli esami preventivi tempestivi ridurranno l'incidenza di questa malattia. Altrettanto importante è la prevenzione di questa malattia. Bisogna evitare accuratamente il contatto con il sangue, rifiutarsi di assumere droghe, solo allora questa malattia sarà sradicata. La cosa principale nella prevenzione e nel trattamento è l'atteggiamento consapevole del paziente nei confronti della loro salute.
Metodo PCR per il rilevamento dell'epatite C
La PCR è una reazione a catena della polimerasi, che viene utilizzata per determinare la presenza di epatite C nel siero, il risultato può essere positivo e negativo.
I vantaggi del metodo PCR
Questo metodo diagnostico presenta i seguenti vantaggi:
- Il metodo PCR consente di determinare i seguenti risultati:
- la presenza di un virus RNA;
- grado di radiazione;
- informazione genetica originale;
- unicità e unicità dei dati genetici.
- Puoi usare qualsiasi materiale clinico necessario:
- il sangue;
- plasma;
- urine;
- fluidi corporei ed escrementi;
- espettorato e altri.
- Consente di determinare nel sangue di più di un microrganismo contemporaneamente, a differenza di altri campioni.
- Ottenere risultati entro 24 ore.
- Metodi semplificati per l'archiviazione e il trasporto dell'analisi, i patogeni sono determinati anche in un ambiente morto.
- L'unicità della PCR consente di identificare determinati microrganismi che non sono suscettibili a nessun altro campione.
- Alto grado di sensibilità dei reagenti, il test è il più preciso nel suo genere.
Caratteristiche dell'analisi qualitativa della PCR
Viene condotto un test qualitativo per determinare la presenza di un virus nel sangue e ottenere un risultato negativo o positivo.
L'indicazione per questo tipo di diagnosi è la rilevazione di anticorpi contro l'epatite C nel corpo del paziente.
Possibili risultati:
- rilevato (positivo);
- non rilevato (negativo).
Un test di qualità non è adatto a pazienti con un contenuto molto basso di virus nel sangue, quindi ha una certa sensibilità.
Risultato "rilevato"
Rileva il virus dell'epatite C può essere un paio di settimane dopo l'infezione del corpo, anche in assenza di anticorpi a questo patogeno. Questo risultato indica la presenza nel corpo e il gruppo sanguigno di un frammento di RNA caratteristico dell'epatite C.
Il paziente è considerato infetto da questo virus e subisce un'ulteriore diffusione di cellule patogene nel corpo.
Risultato "non rilevato"
Questa opzione suggerisce che nel campione di materiale biologico in studio non ci siano frammenti di RNA specifici per l'epatite C. Questo è un risultato negativo.
La sensibilità del test non rivela il basso contenuto di frammenti di RNA, quindi il risultato "non rilevato" non è sempre plausibile.
Caratteristiche dell'interpretazione dei risultati
La caratteristica principale dell'interpretazione dei risultati è la sensibilità alla soglia del metodo PCR.
Dipende dai seguenti indicatori:
- accuratezza dello studio;
- il tipo e la qualità delle attrezzature utilizzate.
Si noti che la sensibilità può variare tra 10-500 UI / ml. Da ciò consegue che se un virus è presente nel corpo del paziente in studio ad una concentrazione inferiore a 10 IU / ml, il test mostrerà il risultato "non rilevato". Ma questo non significa che l'agente patogeno sia completamente assente.
Varianti di sistemi diagnostici
Al momento, ci sono le seguenti opzioni per i sistemi diagnostici:
- Se il sangue viene prelevato da un paziente sottoposto a trattamento antivirale, devono essere utilizzati sistemi diagnostici con una sensibilità di almeno 50 UI / ml. I seguenti analizzatori sono utilizzati per questo scopo:
- Cobas Ampicolor HCV-Test;
- RealBest HCV RNA.
- Per effettuare la diagnosi finale di "Epatite C", è necessario rilevare il virus dell'RNA in tre diversi campioni di materiale biologico. Queste raccomandazioni sono sviluppate dall'Organizzazione Mondiale della Sanità. Se il risultato è tre volte negativo, la diagnosi non è confermata.
- Al momento, oltre al metodo PCR, c'è un test più accurato, chiamato TMA (metodo di amplificazione trascrizionale). La soglia di sensibilità è molto più alta rispetto ad altri metodi di diagnosi.
La gamma di modifiche ai virus rilevate
In questa fase dello sviluppo genetico sono noti diversi tipi e varianti di modificazione del virus.
La diagnostica di laboratorio nel nostro paese con assoluta precisione può determinare i seguenti genotipi:
Caratteristiche dell'analisi quantitativa PCR
L'analisi quantitativa è la definizione del virus dell'epatite C nel corpo umano. Durante lo studio, l'RNA e la carica virale nel materiale di partenza sono determinati mediante PCR. Altrimenti, possiamo dire che il test consente di identificare quante cellule virali si trovano in un fluido biologico. Per questo tipo di studio, viene utilizzato solo sangue venoso. Non esiste una preparazione specifica per il test.
L'analisi quantitativa consente di monitorare lo stadio del trattamento già iniziato e valutarne l'efficacia. Per la valutazione, i dati dei test sono presi prima e durante gli interventi terapeutici. Con l'aiuto dei risultati ottenuti è possibile prevedere il decorso della malattia.
Con il successo del metodo di trattamento scelto dopo 3 mesi, la quantità di RNA dovrebbe diminuire più volte. Secondo le raccomandazioni, l'analisi quantitativa viene eseguita dopo uno, quindi dopo tre e sei mesi. L'ultimo risultato con il successo del trattamento dovrebbe essere negativo.
Valutazione dei risultati del test quantitativo della PCR
Nel nostro paese, ci sono 2 opzioni possibili per valutare il risultato di un test PCR quantitativo:
- il numero di copie per millilitro di fluido biologico;
- il numero di unità internazionali per millilitro.
Per ottenere unità internazionali, il numero di copie è diviso per 4.
- alto con PCR superiore a 800.000 IU / ml;
- basso con PCR inferiore a 400.000 IU / ml.
Il risultato del test quantitativo fornisce 2 opzioni:
- "Sotto il campo di misura";
- "Non rilevato" (negativo).
Valutazione: "sotto il campo di misura"
Tale conclusione è stata presa quando un test quantitativo di RNA non ha rilevato l'agente eziologico dell'epatite C nel materiale di origine cellulare, ma il virus è ancora presente nel sangue. L'affidabilità dell'analisi è confermata dal metodo qualitativo, poiché la soglia di sensibilità del test quantitativo potrebbe non rilevare piccoli valori e concentrazioni del patogeno.
Valutazione: "non rilevato"
Tale conclusione è stata formulata quando i virus RNA dell'epatite C non sono stati rilevati nel materiale di partenza durante la diagnosi: si tratta di un risultato negativo.
Interpretazione dei risultati dell'analisi del test quantitativo della PCR
Utilizzando l'indicatore della carica virale determinare:
- il grado di abbandono della malattia;
- quanto è contagioso il paziente;
- efficacia della terapia antivirale.
Più alto è il tasso di virus dell'epatite C nel corpo, più pericoloso è il paziente per le altre persone e più progressiva è la sua malattia.
L'epatite C PCR è un metodo diagnostico importante, specialmente durante gli interventi terapeutici. Grazie ai risultati negativi o positivi ottenuti, è possibile valutare la loro efficacia, curare completamente il paziente o abbreviare il tempo di trattamento.
Analisi qualitativa per l'epatite C
8 marzo 2017, 12:29 Articoli esperti: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547
Un'analisi qualitativa della reazione a catena della polimerasi - la PCR per l'epatite C determina la presenza o l'assenza di HCV nel corpo. In condizioni di laboratorio, viene studiata la struttura dell'RNA, che includerà il virus. In caso di rilevamento del virus C, è necessario sottoporsi a un ciclo di trattamento, poiché lo stato trascurato del fegato si tradurrà in gravi conseguenze. La PCR di alta qualità viene eseguita dopo il recupero per confermare l'assenza di anticorpi. Nominato e per ispezione di routine. Con una bassa concentrazione dell'agente causale nel sangue, la PCR (qualitativa) potrebbe non rilevare nulla, poiché il sistema diagnostico ha le proprie soglie di sensibilità. Nel caso della fase iniziale della malattia o della forma lieve, la PCR viene eseguita mediante analisi ultradiagnostica su apparecchiature ultrasensibili.
Cos'è il virus RNA?
Il termine RNA del virus dell'epatite C (o RNA del virus dell'epatite C) è la stessa malattia del fegato. Il virus C si lega alla cellula sana del corpo penetrando all'interno. Nel corso del tempo, si sviluppa in tutto il corpo, è necessario solo entrare nel sangue. Di conseguenza, il patogeno penetra nel fegato, si fonde con le sue cellule e lavora sodo. Le cellule epatiche (epatociti) lavorano sotto la sua influenza, subendo cambiamenti e da questo muoiono. Più a lungo il virus C è nel fegato, maggiore è il numero di cellule muoiono. Nel corso del tempo si sviluppano malattie pericolose che portano a degenerazione e morte maligne.
L'infezione del fegato con questo tipo di virus potrebbe non manifestarsi esternamente. Per molti anni o decenni, una persona infetta si sente completamente in salute, e solo un esame casuale rivela molto spesso la patologia. Durante la donazione di sangue per l'epatite, viene esaminata una porzione della catena di RNA (acido ribonucleico) che fa parte del gene umano (DNA). I risultati degli esami di laboratorio non devono essere utilizzati per l'autotrattamento, perché questo è solo un indicatore. L'immagine esatta e l'ulteriore diagnosi sono meglio determinate dal medico.
Al termine: indicazioni per la ricerca
In conferma dell'HCV, l'analisi della PCR viene eseguita (reazione a catena della polimerasi). Gli studi sulla PCR aiutano a trovare l'agente eziologico nella struttura dell'RNA e prescrivono una terapia efficace. Nominato nei seguenti casi:
- individuazione dei segni di infiammazione del fegato;
- studi di screening per la prevenzione;
- esame delle persone in contatto;
- diagnosi di epatite di origine mista (determinazione dell'agente patogeno principale);
- determinare il livello di attività riproduttiva del virus nella forma cronica;
- cirrosi epatica;
- determinare l'efficacia del trattamento prescritto.
Esiste un'analisi qualitativa e quantitativa della PCR. La PCR quantitativa mostra la percentuale di RNA con i vettori del virus nel sangue e qualitativa indica la presenza o assenza virale. Un indicatore positivo di qualità (presenza di RNA dell'epatite C) richiede anche una ricerca quantitativa. Un alto livello di concentrazione dell'agente causale dell'epatite C è associato al rischio della sua trasmissione, cioè l'infezione di altri. I numeri bassi sono meglio curabili. La quantità di virus a RNA nel sangue non è correlata all'intensità della malattia. L'analisi della PCR viene eseguita anche nel caso della terapia con interferone al fine di prescrivere la durata e la complessità del ciclo di trattamento.
Caratteristiche di analisi PCR di alta qualità per l'epatite C
Un'analisi qualitativa viene assegnata con un indicatore di reazione a catena della polimerasi per tutti i pazienti che hanno anticorpi contro l'epatite C. Nel sangue, coloro che sono stati malati e recuperati devono ripetere il test. Si raccomanda di effettuare un'analisi per l'epatite B, quindi, in caso di conclusione positiva, e per l'epatite D. Inoltre, la reazione qualitativamente analizzata deve essere eseguita insieme ad altri esami del sangue. Le analisi mostreranno un quadro completo della diffusione virale.
Dai risultati del test, solo un test positivo per l'epatite C sarà visibile o negativo, cioè la presenza o l'assenza di un virus. Se l'output è "rilevato", il virus è e continua ad essere attivo. La designazione "non rilevato" indica l'assenza di un virus o la sua piccola quantità. Con questo indicatore, si dovrebbe tenere presente che la sensibilità analitica dei sistemi diagnostici è diversa e che l'epatite C dell'RNA potrebbe essere ancora nel sangue, ma non manifestarsi nell'analisi.
Un metodo PCR particolarmente sensibile rivela l'ultra epatite C anche in piccole quantità. Viene utilizzato uno studio di ibridazione a fluorescenza, che è molte volte superiore rispetto ai sistemi PCR standard. Il metodo è utilizzato in diversi casi:
- sospette forme nascoste di epatite C;
- La diagnostica della PCR non ha confermato l'agente patogeno, ma ci sono anticorpi;
- in caso di recupero;
- per rilevare l'infezione precoce.
Analisi di decodifica
La decodifica PCR dell'HCV influisce sulla decisione finale quando si effettua una diagnosi, in particolare con il metodo ultrametod. Il principale svantaggio di questo studio è la stretta aderenza alle condizioni sterili per il campione e i materiali. Una leggera deviazione a volte mostra conclusioni analitiche imprecise, complica la diagnosi e il successivo trattamento. L'analisi della PCR per la determinazione dell'RNA dell'epatite non sempre mostra con sicurezza un quadro della malattia, a volte sono consentite imprecisioni e in entrambe le direzioni.
Diagnosticare il virus dell'epatite, si consiglia di utilizzare un esame completo.
Norma degli indicatori
L'assenza di anticorpi JgM contro l'epatite C virale nei risultati dello studio è considerata la norma nell'analisi della reazione a catena della polimerasi. Allo stesso tempo, i risultati dell'analisi sierologica indicano la presenza di anticorpi contro il virus C e questo è anche entro il range normale. Una definizione qualitativa non mostra l'intensità della malattia, ma rivela solo l'agente eziologico dell'epatite C nell'RNA. Questa analisi viene ripetuta dopo il trattamento per confermare il recupero effettivo.
deviazioni
Se sono presenti anticorpi JgM per HCV RNA, questo indica un'infezione in via di sviluppo. La malattia procede allo stesso tempo in modo acuto o cronico, manifestandosi in diverse fasi. Se viene registrata una diminuzione del numero di anticorpi, l'analisi indicherà che i risultati del trattamento sono stati raggiunti durante il recupero. Vi sono casi estremamente rari di risultati falsi positivi nella diagnostica. Si trovano nelle donne durante la gravidanza e nelle persone con altre malattie infettive.
Quantitativo di PCR per l'epatite C
Il virus dell'epatite C è in grado di moltiplicarsi nelle cellule del sangue e causare malattie linfoproliferative. A causa di molteplici mutazioni, la difesa immunitaria del corpo si indebolisce, appaiono genotipi e sottotipi del virus. Con la determinazione corretta e tempestiva di un tipo specifico, dipende l'efficacia della terapia antivirale. Il pericolo di infezione è che la malattia è asintomatica. Solo il 15% dei 100 può manifestare nausea e vomito, perdita di peso e febbre.
Rilevazione del virus dell'epatite C
Il tasso standard di epatite C è nelle dimensioni da 40 a 60 nm, con la maggior parte dei lipidi, danni al fegato derivanti da un decorso acuto o cronico della malattia. L'epatite C, vale a dire il virus RNA della famiglia Togaviridae, è estremamente resistente, viene trasmessa mediante trasfusioni di sangue o l'uso di articoli non sterili, forniture di igiene improprie, ecc. L'analisi quantitativa consente di esaminare il sangue e identificare la struttura genetica del virus infetto.
Per l'epatite C e i suoi genotipi sono stati determinati, condurre un'analisi quantitativa. A seconda dell'analizzatore è possibile determinare i tre livelli di incidenza del virus dell'RNA.
I sottotipi possono produrre varie modifiche, quindi la specificità e la sensibilità dell'analizzatore devono essere al cento per cento. Oltre a rilevare la malattia in un paziente, è necessario determinare il grado della sua gravità. Alcuni laboratori non hanno tutti i dati sulla decodifica del virus RNA, esiste la possibilità di una falsa risposta positiva.
La ricerca sull'epatite C sarà più accurata quando si studiano questi indicatori:
AlAT, AsAT; Scudo alcalino; LDH.
Attirando l'attenzione sui risultati di questi indicatori e sulla condizione generale del corpo, viene visualizzato un risultato che mostra il grado di infezione, la forma e il numero di cellule epatite C nel sangue. Ciò contribuisce al processo di guarigione e all'efficacia della terapia antivirale.
Tipi di analisi per l'epatite C
Una reazione a catena multi-dimensionale (PCR) dà un'idea del numero di particelle di DNA nelle analisi dei pazienti effettuate, identificando correttamente l'agente infettivo.
Possono verificarsi agenti causativi di malattie infettive. Un'infezione del fegato, come l'epatite C, è curabile nei nostri tempi quando viene rilevata tempestivamente. Se si sospetta un virus, viene eseguita l'analisi PCR.
Dato che a lungo i sintomi del virus possono essere mascherati, una persona potrebbe non sentire l'insorgere della malattia. Ma con un esame approfondito nel 60-70% dei casi, viene rilevata l'epatite C, la prima analisi, che è ELISA, seguita dalla diagnosi PCR. L'analisi viene effettuata in determinati periodi per determinare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento appropriato. Per farne a meno, senza applicare tutte queste procedure, è possibile essere vaccinati contro l'epatite.
L'analisi, inclusa la diagnostica PCR, fornisce un quadro della malattia, quanto è attivo il virus in diversi periodi di sviluppo.
Innanzitutto, c'è un'analisi qualitativa che conferma solo l'ipotesi sull'infezione e quindi un quantitativo, determinando il carico sul fegato. L'opzione ideale sarebbe un risultato negativo per l'epatite C nel materiale genetico del paziente.
Analisi qualitativa e quantitativa
Ci sono analisi qualitative e quantitative. L'essenza del primo è che determina la presenza di infezione nel sangue. E questo significa che il virus infetta cellule epatiche sane. Quando si trovano anticorpi contro l'epatite C in un paziente, viene immediatamente eseguito un test qualitativo. Il tasso che il risultato dovrebbe dare è "non rilevato nel sangue". Quando si determina la concentrazione di un virus, è necessario conoscere la sensibilità del sistema diagnostico, poiché le persone sottoposte a terapia antivirale possono eseguire l'analisi. Il grado di sensibilità dell'analizzatore non deve essere inferiore a 50 IU / ml.
Quando viene rilevato un virus, viene eseguita un'analisi quantitativa, in altre parole, la carica virale, che determina la concentrazione del virus nel sangue e la gravità della malattia.
L'RNA virale, che è in una certa quantità di sangue, è definito come la norma al ritmo di 1 ml per 1 centimetro cubico. Dopo aver quantificato la carica virale, è possibile valutare il grado di infezione dell'ambiente ancora non infetto. Non appena la concentrazione di epatite C sale nel sangue, è necessario isolare dall'ambiente.
È importante nelle prime fasi rilevare il grado di concentrazione dell'epatite, al fine di determinare il ritmo della riabilitazione. Se il tasso di epatite C è superato di oltre 800 mila IU / ml, è considerato troppo alto, con un aumento fino a un milione - critico. Se l'intervallo quantitativo è inferiore a 400 mila IU / ml, si ritiene che l'infezione di quelli intorno sarà meno probabile. Questa cifra chiarisce che l'epatite C è presente nel corpo in dosi molto piccole. L'analisi non è stata in grado di determinare il valore quantitativo delle particelle di RNA del virus, per cui è stata rinominata diverse volte per una diagnosi accurata.
Risultati dell'analisi quantitativa
Il compito di determinare la quantità di carica virale nel sangue di un paziente è l'identificazione del grado di infezione per gli altri.
Test dell'epatite C
consente di valutare l'efficacia della terapia antivirale, il livello di infettività e il numero di tessuti infetti.
È importante prevenire la progressione della malattia, adottare misure preventive nel tempo, prescrivere il trattamento corretto basato sulla diagnostica della PCR. Se, in base ai risultati, il livello di carica virale è inferiore a 400 mila IU / ml, la concentrazione potrebbe essere minima, il che indica un possibile recupero completo. La norma per un risultato positivo è l'assenza di infezione.
I risultati dell'analisi PCR:
Una risposta positiva significa un'infezione nel materiale biologico. L'analisi consente di determinare il numero esatto di cellule infette. Una risposta negativa indica l'assenza di infezione, che viene attentamente ricercata nel corpo.
Il metodo di determinazione quantitativa dell'epatite C è accurato e informativo, eseguito su apparecchiature ad alta sensibilità. Decifrare i risultati dell'analisi consente di scoprire se l'infezione e la sua specificità, per vedere il minor numero di cellule infette su analizzatori altamente sensibili.
I risultati falsi positivi o opposti sono raramente dati dall'analisi, più spesso ciò avviene negli studi di immunodosaggio.
L'epatite C è una delle malattie virali più pericolose e difficili da diagnosticare. Per determinare la malattia, viene utilizzato il metodo PCR dell'epatite C. Si tratta di una nuova tecnica high-tech che consente di studiare il materiale genetico per l'esistenza della vita nelle particelle più piccole (molecole) e nelle più piccole quantità. Il virus dell'epatite è molto persistente, può vivere a lungo nell'ambiente ed è ben consolidato nel corpo umano.
Cos'è la PCR?
Oggi c'è un numero enorme di varie malattie. E non un numero inferiore di metodi per la loro determinazione. Poiché gli agenti di infezione hanno imparato a mettere radici nell'ambiente e ad evolversi facilmente, vengono utilizzate le ultime tecnologie per diagnosticare loro. La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un metodo più rapido e più accurato che cerca di trovare l'agente causale della malattia aumentando significativamente la porzione del DNA del virus dell'epatite nel campione. Di lui spesso scrive: cerca un ago in un pagliaio e poi costruisce una pila di aghi.
Tipi di metodo PCR
I test qualitativi aiuteranno a determinare la presenza del virus dell'epatite C nel corpo.
Assegni l'analisi qualitativa e quantitativa di epatite. Per determinare se il virus è nel corpo e coloro che hanno trovato anticorpi contro l'epatite C, eseguire test di alta qualità. L'analisi di decodifica dà il risultato: "positivo"; "Negativo". Significato negativo: o una persona è sana o non ci sono abbastanza agenti nel sangue e non possono essere trovati. Quindi vale la pena di fare un riesame dopo un po '.
Un risultato positivo indica l'esistenza di un'infezione. Questo è quasi sempre il valore esatto. I risultati errati di solito dipendono dal fattore umano (stoccaggio improprio o non conformità con le regole della procedura). Quando il tasso è, il risultato è negativo. Prima di testare non ci sono regole speciali, basta prendere il sangue da una vena.
Se trovato, condurre un'analisi quantitativa (carica virale) - dà valori numerici: quanto RNA del virus dell'epatite è in questo momento nel volume prescritto del materiale in studio. Con lo sviluppo attivo dell'infezione, può essere rilevato a 1-2 settimane in una persona infetta. Anche il sangue viene solitamente esaminato perché gli agenti circolano liberamente in esso.
Caratteristiche dell'analisi quantitativa della PCR
La PCR quantitativa ti aiuterà a scegliere il trattamento più efficace per l'epatite C.
La differenza nell'analisi quantitativa è che non tutto passa. Qualitativo - determina la presenza e quantitativa - aiuta con la conferma della conclusione "virus dell'epatite", la prognosi del decorso della malattia e determina il corso del trattamento. Quanto è efficace la terapia è dal numero di RNA prima e durante il trattamento. Inoltre con il suo aiuto determina la nomina di dosi di farmaci.
Di norma, viene prodotto prima dell'inizio del trattamento. Le principali indicazioni possono essere:
determinazione della carica virale e controllo della terapia antivirale, PCR di alta qualità trovato anticorpi di epatite C, individuazione di epatite C acuta e cronica, l'esistenza di epatite mista, quando si pianifica il trattamento, se uno studio qualitativo trova ancora la presenza della malattia dopo la dodicesima settimana di terapia.
Guarda anche, quale carica virale nell'epatite: bassa - la terapia viene eseguita con successo; aumentato - il trattamento non è efficace e deve essere cambiato.
Cosa viene eseguito in varie fasi della malattia?
L'analisi aiuterà a monitorare i risultati della terapia in tutte le fasi del trattamento.
In diverse fasi della malattia, viene effettuato uno studio per dare una revisione dei benefici del trattamento e la pianificazione della sua durata. Con buone risposte alla terapia, si accorcia. Altrimenti, con il lento ritiro del virus, il trattamento si prolunga. La PCR per l'epatite fa 1,4, 12, 24 settimane di terapia. Quando gli indicatori non cadono dopo 12 settimane, concludono che la terapia non è adatta a questo organismo. Questa analisi viene utilizzata per determinare quanto è attiva l'infezione e quanto è probabile che sia trasmessa. Ad esempio, durante la gravidanza c'è il rischio di infettare un bambino. Dopo la terapia, identificare il rischio di recidiva della malattia.
trascrizione
Dopo lo studio, l'analisi può decifrare non in numeri, ma con le parole: "sotto l'intervallo di misurazione" e "non rilevato". La PCR quantitativa è più sensibile alla qualità. La conclusione "non rilevata" può dire che l'infezione non è stata trovata. "Sotto l'intervallo di misurazione" - il test non ha rilevato il virus, ma ha un valore basso. In questa situazione, fai un secondo studio.
Il carico virale è la determinazione del numero di RNA infettivi in un volume di sangue prescritto (1 ml = 1 metro cubico quantitativamente). Formulato in misure internazionali IU / ml. Laboratori separati designano copie / ml. Diversi sistemi di test possono decifrare la traduzione di componenti in valori internazionali a modo loro. Tabella 1. Decifrazione dell'analisi quantitativa dell'RNA del virus
La diagnosi di epatite comprende una serie di test per determinare la presenza di un virus nel sangue. Un modo per individuare una malattia è un metodo di ricerca come la PCR per l'epatite C. Di cosa si tratta, perché l'analisi della PCR per l'epatite è tanto importante quanto viene eseguita e decodificata?
Cos'è?
La reazione a catena della polimerasi, o PCR, viene utilizzata per diagnosticare ulcere gastriche, colite, enterite. Ma il suo principale vantaggio è che aiuta a rilevare nel corpo sia il virus dell'epatite C che gli anticorpi che hanno la capacità di non causare reazioni del sistema immunitario a causa della loro capacità di mutare.
Lo studio e la sua essenza sta nella creazione di determinate condizioni in cui si verifica la reazione a catena dell'epatite RNA. Se, confrontate con la sequenza nucleotidica del virus dell'epatite C, si riscontrano coincidenze, ciò indica che nel sangue sono presenti particelle virali e che i processi di disintegrazione si verificano nel fegato. Se la quantità di virus è inferiore a un certo livello, viene fatta una diagnosi negativa e, se superiore, positiva.
Esistono due tipi di esami del sangue che utilizzano il metodo PCR per l'epatite: analisi quantitativa e analisi qualitativa.
La PCR quantitativa, come menzionato sopra, determina la concentrazione di RNA del virus dell'epatite. Inoltre, è in grado di fornire informazioni sull'intensità con cui si sviluppa la patologia e sull'efficacia del trattamento prescritto. Un'analisi quantitativa dell'epatite C è estremamente importante perché fissa la resistenza all'azione dei farmaci antivirali e consente di regolare la terapia.
Dopo che il paziente è stato sottoposto a un ciclo di trattamento, la PCR aiuta a determinare l'ulteriore ordine degli appuntamenti. In alcuni casi, la necessità di ulteriori sondaggi. Ad esempio, se il livello di ALP è aumentato (ma non più di 2 volte entro sei mesi) e la trascrizione dell'analisi indica una carica virale superiore a 105 IU / ml, al paziente viene prescritta una biopsia. Se un'analisi quantitativa della PCR rivela una grave infiammazione e fibrosi, al paziente viene prescritto un ciclo di trattamento con farmaci antivirali.
In situazioni in cui un gran numero di particelle virali è combinato con un'alta ALT, il paziente deve essere immediatamente trattato senza ulteriori misure diagnostiche.
Fai questo test e scopri se hai problemi al fegato.
Solo specialisti qualificati ed esperti possono decifrare qualitativamente in analisi quantitativa del sangue per l'epatite, e le moderne tecnologie aiutano a farlo con una bassa concentrazione del virus nel sangue.
L'analisi qualitativa della PCR ha lo scopo di determinare e confermare l'effettiva presenza del virus nel corpo. Viene eseguito quando nel sangue sono rilevati anticorpi contro l'epatite. È un'analisi qualitativa dell'epatite che garantisce l'accuratezza del risultato del 100% e consente di formulare una diagnosi nelle prime fasi della malattia, che consente di iniziare la lotta contro l'epatite già durante le prime settimane dopo l'infezione e aumenta le probabilità di guarigione completa (nel caso della malattia di tipo B).
Benefici della PCR
Nello studio mediante PCR e decifrando un esame del sangue per l'epatite, è anche possibile determinare il genotipo del patogeno. In totale, ci sono 6 genotipi del virus e un gran numero di sottotipi, tuttavia nella nostra regione sono diventati comuni genotipi 1, 2 e 3.
Altri vantaggi di questo tipo di diagnosi sono:
- alta precisione degli indicatori ottenuti e bassa probabilità di errore in essi;
- alto livello di sensibilità alle particelle virali nel sangue;
- la possibilità di identificare più agenti patogeni contemporaneamente;
- diagnosi di microrganismi patogeni intracellulari con elevata variabilità antigenica;
- lavorare con l'analisi della decodifica per l'epatite consente di rilevare infezioni nascoste attuali.
Chi è nominato
Le seguenti categorie di persone devono passare l'analisi PCR per l'epatite:
- donne incinte;
- personale sanitario;
- potenziale donatore di sangue e di organi;
- quelli che hanno segni caratteristici della malattia;
- Individui con infezione da HIV;
- tossicodipendenti;
- prostitute promiscue.
Come viene condotta l'analisi ed è necessario prepararla
Il prelievo di sangue per la PCR è fatto da una vena. Di norma, ciò si verifica al mattino prima che la persona abbia mangiato, perché dopo aver mangiato un pasto devono passare almeno 8 ore. In casi estremi, sangue può essere preso per l'esame durante il giorno o la sera, ma il divario di tempo tra analisi e assunzione di cibo dovrebbe essere di almeno 5 ore.
Il fattore umano può influenzare quantitativamente i risultati: la loro accuratezza in alcuni casi diminuisce dal 100% al 95%, pertanto è necessario preparare in anticipo la donazione del sangue. La qualità del biomateriale per l'analisi sarà appropriata quando il paziente segue le seguenti regole:
- prima di donare il sangue, puoi bere solo acqua pulita;
- due giorni prima dello studio, è necessario abbandonare l'assunzione di cibi fritti e grassi, così come le bevande alcoliche;
- un giorno prima della visita al laboratorio dovrebbe smettere di prendere medicine. Se ciò non è possibile, è indispensabile informare il tecnico di laboratorio e il medico curante;
- il giorno prima hai bisogno di evitare situazioni stressanti e sforzi fisici;
- ultrasuoni, esami radiografici e strumentali non dovrebbero essere eseguiti poco prima della donazione di sangue;
- per un'ora prima dell'analisi, devi astenersi dal fumare;
- 20 minuti prima di donare il sangue, è necessario distrarsi, calmarsi ed espirare.
Se un bambino di età inferiore ai 5 anni supera lo studio, i genitori devono assicurarsi di bere acqua bollita ogni 10 minuti per mezz'ora prima di assumere il biomateriale.
Decrittografia dei dati ricevuti
La decodifica dell'analisi può essere rappresentata in parole (nel caso di uno studio qualitativo), ad esempio "non rilevato" o "sotto l'intervallo di modifiche". Nel primo caso, ciò indica che l'infezione non è stata rilevata. Nel secondo - che il virus è presente, ma in piccole quantità. Questa situazione richiede una nuova ricerca.
Il carico virale è determinato dalla quantità di RNA infetto e viene indicato come IU / ml o copie / ml.
Un normale indicatore (norma) di un'analisi quantitativa per l'epatite C è compreso tra 1,8x102 e 2,4x107 IU / ml.
La concentrazione di virus nel sangue può essere:
- basso: da 600 IU / ml a 3x10 4 / ml;
- media: da 3x10 4 IU / ml a 8x10 5 IU / ml;
- alto: oltre 8x10 5 IU / ml.
L'analisi quantitativa e qualitativa della PCR per l'epatite consente di determinare la presenza del virus nel corpo e il livello della sua concentrazione. Una reazione a catena multi-dimensionale è in grado di diagnosticare la malattia nelle sue fasi iniziali, ma per questo è necessario che i pazienti si rivolgano il prima possibile alle strutture mediche per ricevere aiuto e seguano rigorosamente le raccomandazioni del medico curante.
Il virus dell'epatite C è in grado di moltiplicarsi nelle cellule del sangue e causare malattie linfoproliferative. A causa di molteplici mutazioni, la difesa immunitaria del corpo si indebolisce, appaiono genotipi e sottotipi del virus. Con la determinazione corretta e tempestiva di un tipo specifico, dipende l'efficacia della terapia antivirale. Il pericolo di infezione è che la malattia è asintomatica. Solo il 15% dei 100 può manifestare nausea e vomito, perdita di peso e febbre.
Rilevazione del virus dell'epatite C
Il tasso standard di epatite C è nelle dimensioni da 40 a 60 nm, con la maggior parte dei lipidi, danni al fegato derivanti da un decorso acuto o cronico della malattia. L'epatite C, vale a dire il virus RNA della famiglia Togaviridae, è estremamente resistente, viene trasmessa mediante trasfusioni di sangue o l'uso di articoli non sterili, forniture di igiene improprie, ecc. L'analisi quantitativa consente di esaminare il sangue e identificare la struttura genetica del virus infetto.
Per l'epatite C e i suoi genotipi sono stati determinati, condurre un'analisi quantitativa. A seconda dell'analizzatore è possibile determinare i tre livelli di incidenza del virus dell'RNA.
I sottotipi possono produrre varie modifiche, quindi la specificità e la sensibilità dell'analizzatore devono essere al cento per cento. Oltre a rilevare la malattia in un paziente, è necessario determinare il grado della sua gravità. Alcuni laboratori non hanno tutti i dati sulla decodifica del virus RNA, esiste la possibilità di una falsa risposta positiva.
La ricerca sull'epatite C sarà più accurata quando si studiano questi indicatori:
Attirando l'attenzione sui risultati di questi indicatori e sulla condizione generale del corpo, viene visualizzato un risultato che mostra il grado di infezione, la forma e il numero di cellule epatite C nel sangue. Ciò contribuisce al processo di guarigione e all'efficacia della terapia antivirale.
Tipi di analisi per l'epatite C
Una reazione a catena multi-dimensionale (PCR) dà un'idea del numero di particelle di DNA nelle analisi dei pazienti effettuate, identificando correttamente l'agente infettivo.
Possono verificarsi agenti causativi di malattie infettive. Un'infezione del fegato, come l'epatite C, è curabile nei nostri tempi quando viene rilevata tempestivamente. Se si sospetta un virus, viene eseguita l'analisi PCR.
Dato che a lungo i sintomi del virus possono essere mascherati, una persona potrebbe non sentire l'insorgere della malattia. Ma con un esame approfondito nel 60-70% dei casi, viene rilevata l'epatite C, la prima analisi, che è ELISA, seguita dalla diagnosi PCR. L'analisi viene effettuata in determinati periodi per determinare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento appropriato. Per farne a meno, senza applicare tutte queste procedure, è possibile essere vaccinati contro l'epatite.
Analisi qualitativa e quantitativa
Ci sono analisi qualitative e quantitative. L'essenza del primo è che determina la presenza di infezione nel sangue. E questo significa che il virus infetta cellule epatiche sane. Quando si trovano anticorpi contro l'epatite C in un paziente, viene immediatamente eseguito un test qualitativo. Il tasso che il risultato dovrebbe dare è "non rilevato nel sangue". Quando si determina la concentrazione di un virus, è necessario conoscere la sensibilità del sistema diagnostico, poiché le persone sottoposte a terapia antivirale possono eseguire l'analisi. Il grado di sensibilità dell'analizzatore non deve essere inferiore a 50 IU / ml.
Quando viene rilevato un virus, viene eseguita un'analisi quantitativa, in altre parole, la carica virale, che determina la concentrazione del virus nel sangue e la gravità della malattia.
L'RNA virale, che è in una certa quantità di sangue, è definito come la norma al ritmo di 1 ml per 1 centimetro cubico. Dopo aver quantificato la carica virale, è possibile valutare il grado di infezione dell'ambiente ancora non infetto. Non appena la concentrazione di epatite C sale nel sangue, è necessario isolare dall'ambiente.
È importante nelle prime fasi rilevare il grado di concentrazione dell'epatite, al fine di determinare il ritmo della riabilitazione. Se il tasso di epatite C è superato di oltre 800 mila IU / ml, è considerato troppo alto, con un aumento fino a un milione - critico. Se l'intervallo quantitativo è inferiore a 400 mila IU / ml, si ritiene che l'infezione di quelli intorno sarà meno probabile. Questa cifra chiarisce che l'epatite C è presente nel corpo in dosi molto piccole. L'analisi non è stata in grado di determinare il valore quantitativo delle particelle di RNA del virus, per cui è stata rinominata diverse volte per una diagnosi accurata.
Risultati dell'analisi quantitativa
Il compito di determinare la quantità di carica virale nel sangue di un paziente è l'identificazione del grado di infezione per gli altri.
I risultati dell'analisi PCR:
- Una risposta positiva significa un'infezione nel materiale biologico. L'analisi consente di determinare il numero esatto di cellule infette.
- Una risposta negativa indica l'assenza di infezione, che viene attentamente ricercata nel corpo.
Il metodo di determinazione quantitativa dell'epatite C è accurato e informativo, eseguito su apparecchiature ad alta sensibilità. Decifrare i risultati dell'analisi consente di scoprire se l'infezione e la sua specificità, per vedere il minor numero di cellule infette su analizzatori altamente sensibili.
I risultati falsi positivi o opposti sono raramente dati dall'analisi, più spesso ciò avviene negli studi di immunodosaggio.
Il virus dell'epatite C è un virus che contiene una molecola di RNA. È in grado di evitare la risposta immunitaria del corpo a causa della sua elevata capacità di mutare. Esistono sei principali genotipi del virus e molti sottotipi. Nella nostra regione, i genotipi 1, 2 e 3 sono distribuiti principalmente.
Nel 75-80%, la malattia diventa cronica, che causa la fibrosi epatica, una condizione in cui il tessuto epatico viene sostituito dal tessuto connettivo. La fibrosi, a sua volta, porta al cancro o alla cirrosi. La principale modalità di trasmissione della malattia è attraverso il sangue. Se una persona ha indicazioni per testare l'epatite C, gli verranno dati due test di base. Gli anticorpi del virus sono determinati e, in loro assenza, si ritiene che non abbia l'epatite. Se viene rilevata la presenza di anticorpi contro il virus dell'epatite nel sangue, viene eseguita l'analisi della PCR.
L'RNA mediante questo metodo è determinato nel sangue entro 10-12 giorni dall'infezione e indica che il virus si replica attivamente nel corpo. Durante questo periodo, è semplicemente impossibile rilevare il virus in un altro modo, poiché non produce ancora anticorpi specifici e il danno epatico non è visibile con test biochimici e biopsie.
Varietà di studi sulla PCR
L'analisi della reazione a catena della polimerasi presenta alcuni vantaggi:
- In questo studio, viene determinato il virus stesso e non i suoi prodotti metabolici. In questo caso, è possibile determinare il tipo di agente patogeno.
- La tecnica ha un'elevata specificità dovuta al fatto che solo una certa sezione del DNA viene studiata, la probabilità di ottenere risultati errati diminuisce.
- Ha una sensibilità molto elevata, è determinata anche dalla quantità minima di virus nel sangue.
Esistono due metodi principali per testare il sangue per l'epatite C mediante PCR: analisi qualitativa e quantitativa della PCR. Il metodo qualitativo viene utilizzato per determinare se è presente un virus. Qualcuno con anticorpi antiepatite è stato rilevato nel sangue, tale analisi viene effettuata. Il risultato può essere di due tipi: "rilevato" e "non rilevato", quest'ultimo valore è considerato la norma.
Un risultato positivo del test significa che nel campione sono stati trovati frammenti dell'RNA del virus che, a sua volta, indicano che la persona è stata infettata da epatite. Nel caso di un risultato negativo, sono possibili due opzioni: non c'era infezione o la sua concentrazione è così bassa da non essere rilevata da questa tecnica.
Il metodo quantitativo differisce nella sostanza della ricerca, nei suoi compiti e nelle indicazioni. Non tutti i pazienti con epatite subiscono tale analisi. Lui, come ogni altro, ha determinati obiettivi. Viene utilizzata la determinazione della carica virale o l'analisi quantitativa della PCR per l'RNA virale:
- per la determinazione dell'RNA del virus nel sangue e la diagnosi di "epatite virale";
- predire la cronicità dell'epatite e il decorso della malattia;
- monitorare il trattamento antivirale e decidere sulla sua estensione, riduzione o cambiamento nelle tattiche di trattamento.
Lo studio è condotto in presenza di tali indicazioni:
- L'epatite C è stata rilevata da uno studio qualitativo e gli anticorpi sono stati rilevati nel sangue;
- con epatite mista;
- se è prevista una terapia antivirale;
- durante e dopo il trattamento per l'epatite C;
- in presenza di epatite C cronica e acuta
Il test viene condotto per stimare il numero di unità virali in un dato volume di un campione di sangue di 1 cm³ o 1 ml. I risultati sono espressi in numeri. Indicatori utilizzati: IU / ml, che significa unità internazionale per millilitro e copie per ml, il numero di copie di RNA in 1 ml del campione. Più alto è l'indicatore quantitativo dell'analisi, maggiore è la probabilità di trasmissione del virus a un'altra persona.
L'R-DNA è un metodo di DNA ramificato. Metodo più semplice ed economico. Usato per più campioni, ha bassa sensibilità, da 500 IU / ml. Con tale sensibilità, c'è la possibilità di non identificare il virus, anche se è presente nel sangue.
TMA è un metodo di amplificazione della trascrizione. Questa tecnica rileva gli acidi nucleici nel sangue. Ha un basso costo e alta sensibilità, da 5-10 IU / ml. Una tecnica relativamente nuova che consente di accelerare e ridurre il costo del processo di test.
I risultati dell'analisi quantitativa della definizione del virus dell'RNA, presentata dal laboratorio, sono interpretati come segue: