Diagnostica PCR per epatite C

L'epatite C è un'infiammazione delle cellule del fegato che si verifica a seguito dell'infezione con il virus HCV (epatite C) attraverso il contatto con il sangue di una persona infetta. Il codice genetico del flavivirus HCV è trasportato da una molecola di RNA (acido ribonuclenico) contenuta nella struttura del virus. Questo fenomeno potenzialmente letale si distingue per segretezza nella fase iniziale della patologia. L'intervallo di tempo tra l'infezione e l'insorgenza dei sintomi (la risposta del sistema immunitario) può variare da un mese a sei mesi. Di norma, la malattia assume una forma cronica ed è difficile da curare.

La medicina moderna consente di diagnosticare patologie con danni al fegato minori. I metodi diagnostici più comuni ed efficaci includono l'analisi PCR. Considera in questo articolo che cos'è e che tipo di esso esiste.

Qual è lo studio

L'analisi PCR per l'epatite C è un esame di laboratorio che rileva il flavirus, il materiale genetico dell'acido ribonuclelenico (RNA). Determina il numero di molecole di RNA nel sangue, la qualità del materiale biologico, il tipo genetico di flavour HCV.

Il metodo PCR per l'epatite C rende possibile rilevare la quantità minima di flavirus prima della formazione di anticorpi, di norma, subito dopo l'infezione.

Lo studio viene spesso definito come analisi dell'RNA, in quanto rileva particelle di acido ribonucleico con dimensioni di 30-60 nm contenute nel flavavirus.

Lo studio è condotto come segue: a stomaco vuoto, il paziente dà sangue da una vena, che viene poi testato con vari metodi:

• La PCR in tempo reale viene eseguita in modo automatico chiuso e presenta un limite inferiore per la rilevazione del virus dell'RNA, pari a 15 IU / ml;
• COBAS AMPLICOR con una sensibilità di 50-100 UI / ml.

Maggiore è la soglia di sensibilità della tecnica diagnostica, maggiori sono le possibilità di trovare il contenuto virale più basso nel materiale biologico sotto esame.

Quali tipi di analisi utilizzare

Un'analisi che è stata utilizzata con successo per diversi decenni è chiamata epatite PCR e può essere rilevata abbastanza facilmente e rapidamente. In medicina, ci sono due metodi di reazione, fondamentalmente diversi l'uno dall'altro:

• il metodo qualitativo rivela la presenza nel materiale biologico della fonte genetica di un virus specifico;
• l'analisi quantitativa misura il numero di materia genetica, che consente di determinare lo stadio della patologia o valutare l'efficacia del decorso terapeutico;
• la genotipizzazione determina il tipo di virus presente nel corpo.

In generale, un esame del sangue aiuta a identificare la natura della viremia e il tipo genetico del patogeno. Di norma, la ricerca viene eseguita 1 volta in base al grado di sensibilità del sistema diagnostico. Se necessario, ripetere il test utilizzando un reagente ultrasensibile.

PCR di alta qualità

Cos'è l'RNA PCR di alta qualità per l'epatite C? L'essenza della reazione risiede nella presenza della sequenza dell'epatite RNA e la reazione è possibile solo in presenza di proteine ​​virali di etimologia simile nell'ELISA. Nel processo di confronto, vengono rilevati il ​​carico e il possibile danno all'area del fegato.

Una caratteristica distintiva di questo metodo è la capacità di rilevare anche la presenza di un gene separato.

Va notato che, dopo aver ricevuto i risultati dei test PCR e ELISA, il paziente richiede un trattamento appropriato, indipendentemente dal risultato finale immunologico. Positivo indica infezione e PCR negativo indica un numero ridotto di particelle virali rispetto al livello di sensibilità.

Esistono diverse condizioni che influenzano la produzione di PCR e ELISA negativi:

• mancanza di adeguate condizioni di raccolta dei materiali;
• l'analisi risultante contiene contaminazione;
• in caso di una precoce iniezione di eparina al paziente.

Il paziente non ha bisogno di seguire determinate regole per il prelievo di sangue per l'analisi PCR, in questo caso la qualità di questa analisi dipende dal professionista medico che esegue la procedura. La capacità di stabilire la presenza della malattia (specialmente nella forma acuta) appare entro poche settimane dopo l'infezione.

Analisi quantitativa

Un test quantitativo è raccomandato per il rilevamento della carica virale immediatamente prima della formazione di un'ulteriore terapia e della reazione del corpo. Il processo di prelievo del sangue viene eseguito in modo simile con PCR e ELISA di alta qualità, l'unica condizione è l'assenza della possibilità di fumare il paziente prima della procedura.

Per quanto riguarda le caratteristiche ottenute dallo studio dei dati, il carico aumentato è caratterizzato da indicatori da 800000 UI / ml, basso - 400000 UI / ml. La presenza di un virus nel corpo del paziente è indicata dalla PCR perché l'epatite non è un test qualitativo negativo.

Questo tipo di ricerca rende possibile determinare quanto sia pericoloso il paziente per le persone che lo circondano. Ad esempio, l'identificazione di un livello elevato indica una maggiore infettività del paziente. Inoltre, i risultati dell'analisi aiutano a formulare l'ulteriore trattamento più efficace e determinano quanto la terapia esistente è considerata efficace.

La rapida risposta negativa dei test indica il successo della tecnica scelta e quella lenta indica la necessità di aggiustamenti e l'uso di un trattamento multi-sfaccettato.

Il processo di assunzione della procedura di analisi dipende dal giorno specifico del decorso della malattia. La prima determinazione viene effettuata il primo giorno dopo che il paziente è ricoverato in ospedale, quindi la procedura viene ripetuta alle 4, 12 e 24 settimane dopo l'assunzione dei farmaci.

Pertanto, un'analisi quantitativa mostra quale terapia sia la più efficace, la durata della terapia disponibile e il pericolo del paziente in relazione ad altre persone.

genotipizzazione

Nello studio dell'analisi dei materiali, è importante determinare l'accuratezza del genotipo del virus, che ha luogo. Attualmente, ci sono 11 varietà del virus dell'epatite C, che a loro volta includono alcune sottospecie.

Tutte queste specie rispondono in modo diverso a trattamenti diversi, con singole varietà assolutamente resistenti a molti farmaci.

Il genotipo consente di determinare e mostrare lo stato del fegato. Non è raro che i risultati siano "non digitati" nei risultati, il che significa che il virus nel sangue del paziente non viene rilevato da questo sistema di test. Questo può essere rilevato se un particolare genotipo non corrisponde a questa zona. In tale situazione, l'analisi viene ripetuta più volte e viene utilizzato un sistema più sensibile per studiare il materiale.

Metodo Ultra Sensibile

Il metodo ultrasensibile è necessario in alcuni casi quando la diagnosi di epatite non può essere eseguita con altri metodi e quando effettuare un'analisi è determinata dal medico curante:

• se si sospetta la presenza di virus dell'epatite C in pazienti con una varietà nascosta della malattia;
• la presenza di anticorpi contro il virus dell'epatite C, non confermata dalla diagnostica PCR;
• al fine di determinare la qualità dell'efficacia del metodo di trattamento scelto e confermare l'eliminazione della malattia.

La sensibilità di questo metodo è molto più alta di quella comunemente usata, tuttavia, questo metodo non esclude l'ottenimento di risultati falsi, sia positivi che negativi. In tale situazione è importante controllare la qualità della procedura e la possibilità di contaminazione del materiale stesso.

Spiegazione dell'analisi PCR

La decodifica dell'analisi viene effettuata sulla base dei materiali presentati, mentre i risultati della ricerca di laboratorio includono alcuni dati sopra descritti.

Il trascritto può includere una reazione a catena della polimerasi PCR positiva e un ELISA negativo nel dosaggio, il che significa che il paziente non ha segni di epatite C nel sangue, ma in passato ha trasferito la forma acuta della malattia. Di norma, durante la diagnosi, gli specialisti ricorrono all'uso di indicatori di test della PCR.

Riassumendo quanto sopra, si può concludere che durante l'analisi è importante osservare tutte le regole e le raccomandazioni in modo che i risultati ottenuti siano il più precisi possibile e sulla base dei dati ottenuti è possibile determinare l'efficacia della terapia utilizzata e l'ulteriore possibilità di recupero completo.

Analisi qualitativa per l'epatite C

8 marzo 2017, 12:29 Articoli esperti: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

Un'analisi qualitativa della reazione a catena della polimerasi - la PCR per l'epatite C determina la presenza o l'assenza di HCV nel corpo. In condizioni di laboratorio, viene studiata la struttura dell'RNA, che includerà il virus. In caso di rilevamento del virus C, è necessario sottoporsi a un ciclo di trattamento, poiché lo stato trascurato del fegato si tradurrà in gravi conseguenze. La PCR di alta qualità viene eseguita dopo il recupero per confermare l'assenza di anticorpi. Nominato e per ispezione di routine. Con una bassa concentrazione dell'agente causale nel sangue, la PCR (qualitativa) potrebbe non rilevare nulla, poiché il sistema diagnostico ha le proprie soglie di sensibilità. Nel caso della fase iniziale della malattia o della forma lieve, la PCR viene eseguita mediante analisi ultradiagnostica su apparecchiature ultrasensibili.

Cos'è il virus RNA?

Il termine RNA del virus dell'epatite C (o RNA del virus dell'epatite C) è la stessa malattia del fegato. Il virus C si lega alla cellula sana del corpo penetrando all'interno. Nel corso del tempo, si sviluppa in tutto il corpo, è necessario solo entrare nel sangue. Di conseguenza, il patogeno penetra nel fegato, si fonde con le sue cellule e lavora sodo. Le cellule epatiche (epatociti) lavorano sotto la sua influenza, subendo cambiamenti e da questo muoiono. Più a lungo il virus C è nel fegato, maggiore è il numero di cellule muoiono. Nel corso del tempo si sviluppano malattie pericolose che portano a degenerazione e morte maligne.

L'infezione del fegato con questo tipo di virus potrebbe non manifestarsi esternamente. Per molti anni o decenni, una persona infetta si sente completamente in salute, e solo un esame casuale rivela molto spesso la patologia. Durante la donazione di sangue per l'epatite, viene esaminata una porzione della catena di RNA (acido ribonucleico) che fa parte del gene umano (DNA). I risultati degli esami di laboratorio non devono essere utilizzati per l'autotrattamento, perché questo è solo un indicatore. L'immagine esatta e l'ulteriore diagnosi sono meglio determinate dal medico.

Al termine: indicazioni per la ricerca

In conferma dell'HCV, l'analisi della PCR viene eseguita (reazione a catena della polimerasi). Gli studi sulla PCR aiutano a trovare l'agente eziologico nella struttura dell'RNA e prescrivono una terapia efficace. Nominato nei seguenti casi:

• individuazione dei segni di infiammazione del fegato;
• studi di screening per la prevenzione;
• esame delle persone in contatto;
• diagnosi di epatite di origine mista (determinazione dell'agente patogeno principale);
• determinare il livello di attività riproduttiva del virus nella forma cronica;
• cirrosi epatica;
• determinare l'efficacia del trattamento prescritto.

Ricerca PCR prescrive un medico per determinare l'efficacia del ciclo di trattamento dell'epatite.

Esiste un'analisi qualitativa e quantitativa della PCR. La PCR quantitativa mostra la percentuale di RNA con i vettori del virus nel sangue e qualitativa indica la presenza o assenza virale. Un indicatore positivo di qualità (presenza di RNA dell'epatite C) richiede anche una ricerca quantitativa. Un alto livello di concentrazione dell'agente causale dell'epatite C è associato al rischio della sua trasmissione, cioè l'infezione di altri. I numeri bassi sono meglio curabili. La quantità di virus a RNA nel sangue non è correlata all'intensità della malattia. L'analisi della PCR viene eseguita anche nel caso della terapia con interferone al fine di prescrivere la durata e la complessità del ciclo di trattamento.

Caratteristiche di analisi PCR di alta qualità per l'epatite C

Un'analisi qualitativa viene assegnata con un indicatore di reazione a catena della polimerasi per tutti i pazienti che hanno anticorpi contro l'epatite C. Nel sangue, coloro che sono stati malati e recuperati devono ripetere il test. Si raccomanda di effettuare un'analisi per l'epatite B, quindi, in caso di conclusione positiva, e per l'epatite D. Inoltre, la reazione qualitativamente analizzata deve essere eseguita insieme ad altri esami del sangue. Le analisi mostreranno un quadro completo della diffusione virale.

Dai risultati del test, solo un test positivo per l'epatite C sarà visibile o negativo, cioè la presenza o l'assenza di un virus. Se l'output è "rilevato", il virus è e continua ad essere attivo. La designazione "non rilevato" indica l'assenza di un virus o la sua piccola quantità. Con questo indicatore, si dovrebbe tenere presente che la sensibilità analitica dei sistemi diagnostici è diversa e che l'epatite C dell'RNA potrebbe essere ancora nel sangue, ma non manifestarsi nell'analisi.

Un metodo PCR particolarmente sensibile rivela l'ultra epatite C anche in piccole quantità. Viene utilizzato uno studio di ibridazione a fluorescenza, che è molte volte superiore rispetto ai sistemi PCR standard. Il metodo è utilizzato in diversi casi:

• sospette forme nascoste di epatite C;
• La diagnostica della PCR non ha confermato l'agente patogeno, ma ci sono anticorpi;
• in caso di recupero;
• per rilevare l'infezione precoce.

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Analisi di decodifica

La decodifica PCR dell'HCV influisce sulla decisione finale quando si effettua una diagnosi, in particolare con il metodo ultrametod. Il principale svantaggio di questo studio è la stretta aderenza alle condizioni sterili per il campione e i materiali. Una leggera deviazione a volte mostra conclusioni analitiche imprecise, complica la diagnosi e il successivo trattamento. L'analisi della PCR per la determinazione dell'RNA dell'epatite non sempre mostra con sicurezza un quadro della malattia, a volte sono consentite imprecisioni e in entrambe le direzioni.

Diagnosticare il virus dell'epatite, si consiglia di utilizzare un esame completo.

Norma degli indicatori

L'assenza di anticorpi JgM contro l'epatite C virale nei risultati dello studio è considerata la norma nell'analisi della reazione a catena della polimerasi. Allo stesso tempo, i risultati dell'analisi sierologica indicano la presenza di anticorpi contro il virus C e questo è anche entro il range normale. Una definizione qualitativa non mostra l'intensità della malattia, ma rivela solo l'agente eziologico dell'epatite C nell'RNA. Questa analisi viene ripetuta dopo il trattamento per confermare il recupero effettivo.

deviazioni

Se sono presenti anticorpi JgM per HCV RNA, questo indica un'infezione in via di sviluppo. La malattia procede allo stesso tempo in modo acuto o cronico, manifestandosi in diverse fasi. Se viene registrata una diminuzione del numero di anticorpi, l'analisi indicherà che i risultati del trattamento sono stati raggiunti durante il recupero. Vi sono casi estremamente rari di risultati falsi positivi nella diagnostica. Si trovano nelle donne durante la gravidanza e nelle persone con altre malattie infettive.

Diagnosi con PCR per l'epatite C

Non tutti sanno perché utilizzano il metodo diagnostico della PCR per l'epatite C. Uno dei gruppi più comuni di malattie sono le malattie infettive del tratto gastrointestinale. Lo stomaco (ulcere), l'intestino (colite, enterite) e il fegato (epatite) sono più comunemente colpiti.

Tra tutti gli organi sopra elencati, il peso maggiore viene imposto al fegato. Nel corpo, il ruolo del fegato è estremamente importante:

1. Quasi tutte le reazioni metaboliche avvengono nel fegato (è qui che si formano tutti i tipi di componenti vitali che permettono al corpo di funzionare pienamente).
2. Il fegato è il principale organo di disintossicazione. Con il suo aiuto (in particolare attraverso la bile), vengono rimossi molti substrati che possono causare intossicazione e portare a gravi conseguenze.

Sfortunatamente, molte persone non controllano la loro salute, motivo per cui il fegato inizia a soffrire. Di solito si sviluppano epatiti di varie eziologie (virali, tossiche).

Definizione di epatite

L'epatite virale occupa un posto importante tra le malattie del fegato. La gravità del decorso della malattia, la complessità del trattamento li mettono al primo posto nella patologia dell'altra natura di questo organo.

Tutta l'epatite è divisa in acuta e cronica. Le epatiti A e B sono classificate come acute, tra le quali l'epatite C cronica.

Questa malattia è causata dal virus dell'epatite C. Una caratteristica è che la malattia può durare a lungo senza manifestazioni cliniche.

È trasmesso principalmente attraverso il sangue. Con il flusso di sangue, il virus entra nel fegato, dove inizia a moltiplicarsi nelle sue cellule. Come risultato dell'accumulo di virioni, si verifica la distruzione dell'epatocita infetto. In risposta a questo, gli anticorpi cominciano a essere prodotti, che iniziano ad attaccare i resti di epatociti. A causa di ciò, una piscina contro le cellule del fegato si sviluppa nel tempo, il che aggrava il decorso della malattia.

A causa del fatto che la malattia è lieve asintomatica o asintomatica e i segni clinici compaiono solo quando le cellule sono significativamente colpite, questa malattia richiede la creazione di metodi diagnostici per rilevare la sua presenza e adottare misure appropriate.

Diagnosi dell'epatite C: analisi qualitativa e quantitativa

Attualmente, per la diagnosi dell'epatite C, vengono utilizzati metodi quali la biopsia epatica e l'immunogramma.

Permettono di determinare direttamente la presenza di epatociti infetti (campioni di biopsia epatica) o anticorpi specifici contro le cellule interessate (immunogramma). Tuttavia, esiste un metodo che consente di determinare in modo affidabile la presenza del virus stesso. Questa è la reazione a catena della polimerasi PCR.

L'essenza di questo metodo sta nel fatto che in determinate condizioni, si verifica la produzione di catene di RNA. Ciò è dovuto al fatto che ci sono frammenti di una particella virale nel sangue o la biopsia in questione. Quando li si collega con alcune molecole nel mezzo, si verifica la sintesi di catene complementari all'RNA virale. Nella loro successiva analisi e confronto con la nota sequenza nucleotidica del virus dell'epatite C, è possibile determinare se il virus è presente nel corpo e se è presente un danno al fegato.

La PCR viene eseguita dopo il rilevamento di anticorpi specifici contro il virus dell'epatite nel sangue. Dopo il test viene eseguito il risultato: l'RNA viene "rilevato" o "non rilevato". Occasionalmente può dire "non abbastanza materiale" - in questo caso è necessario ripetere il test per l'epatite C.

Se il numero di particelle virali è inferiore all'importo minimo richiesto, allora possiamo dire che non c'è epatite e che quantità minime di materiale genetico potrebbero essere "confuse" a causa della mimica di materiale genetico o di sequenze di nucleotidi che potrebbero coincidere con il virus.

1. Con la PCR, è possibile osservare un risultato negativo quando nel sangue sono presenti particelle virali, ma sono così piccole (l'infezione si è verificata di recente o l'analisi è stata preceduta da una terapia antivirale intensiva a lungo termine) che il sistema di test non è stato in grado di determinare normalmente la concentrazione. RNA - "non rilevato."
2. Se la PCR ha un risultato positivo, ci sono così tante particelle virali nel sangue che il loro numero supera la soglia di sensibilità inferiore del sistema di test. In questo caso, c'è un alto rischio di sviluppare un processo infettivo (o è già presente in uno stadio piuttosto avanzato). Di solito un'elevata quantità di virus è già un'indicazione per il trattamento e il successivo trapianto di fegato.

A volte un test può diventare falso positivo o falso negativo.

Un risultato di PCR falso negativo di epatite è osservato nel caso in cui alcuni componenti sono presenti nel mezzo di reazione che inibiscono la formazione di copie della particella virale. Per questo motivo, non è possibile ottenere un'immagine reale dello stato del sangue, che contribuisca al passaggio del virus e alla progressione della malattia. La presenza di eparina nel sangue può anche influenzare la reazione (riducendo la viscosità relativa del sangue). L'interpretazione errata dell'analisi è possibile anche quando le condizioni di trasporto e conservazione del materiale in esame non sono state soddisfatte.

Risultati falsi positivi, quando viene diagnosticata l'epatite C, la PCR si verifica più spesso quando la provetta o l'ambiente di lavoro sono contaminati. Inoltre, si possono osservare risultati positivi con la presenza di virus dell'epatite di altri gruppi (a causa di una reazione crociata).

Analisi qualitativa della PCR per il rilevamento dell'epatite C

Anche la presenza nel sangue di un gran numero di crioglobuline influisce direttamente sulla condotta della PCR. Per questo motivo è indispensabile determinare la loro concentrazione nel sangue prima di testare l'epatite C al fine di rilevare una distorsione del risultato in anticipo e prevenirlo.

Dopo questi test, diventa chiaro se ci sono particelle virali nel sangue. Nel determinarli, si raccomanda di iniziare immediatamente la terapia antivirale per rallentare la progressione del processo. A differenza dell'epatite B, non esiste una cura completa per l'epatite C; la malattia passa solo nello stadio latente e inizia a procedere più lentamente. Il danno al fegato è inevitabile. Nell'ultima fase del processo, quando il fegato non riesce più a far fronte alla sua funzione, potrebbe richiedere il suo trapianto.

Il trattamento viene effettuato principalmente con due farmaci: interferone e ribavirina.

Dimostrato la loro efficacia nel rallentare il processo di sconfitta degli epatociti. Lungo la strada, la terapia infusionale è necessariamente prescritta per facilitare il lavoro del fegato.

Tutti i pazienti che hanno visto un aumento del numero di particelle virali nel sangue sono necessariamente registrati con un epatologo. Diverse volte all'anno, si consiglia di sottoporsi a un esame preventivo per determinare la progressione del processo e la rilevazione tempestiva delle indicazioni per il trapianto. Inoltre, è possibile utilizzare epatoprotettori, sebbene le opinioni dei medici differiscano in qualche modo. Alcuni credono che questi farmaci ti consentano di sospendere il processo e proteggere gli epatociti ancora non colpiti; altri sono convinti che non è sensato assumerli e deve essere effettuata una terapia antivirale intensiva.

Pertanto, l'epatite C appartiene alla categoria delle malattie, la cui identificazione presenta alcune difficoltà. Migliorare i metodi diagnostici e gli esami preventivi tempestivi ridurranno l'incidenza di questa malattia. Altrettanto importante è la prevenzione di questa malattia. Bisogna evitare accuratamente il contatto con il sangue, rifiutarsi di assumere droghe, solo allora questa malattia sarà sradicata. La cosa principale nella prevenzione e nel trattamento è l'atteggiamento consapevole del paziente nei confronti della loro salute.

Condurre un'analisi PCR per l'epatite C e decodificare i risultati

L'analisi PCR dell'epatite C è uno studio il cui scopo principale è identificare il materiale genetico dell'agente causale. L'analisi rivela l'agente eziologico della malattia mediante l'uso della reazione a catena della polimerasi. Questa diagnosi ha un alto grado di precisione, specificità per rilevare l'assenza o la presenza di un'infezione virale.

L'essenza della diagnosi

Per effettuare un'analisi PCR per la determinazione del virus dell'epatite C da un paziente, viene prelevato sangue venoso, che potenzialmente contiene l'HCV dell'RNA (acido ribonucleico) del virus desiderato.

Il test PCR per l'epatite C implica una procedura per l'aggiunta alle particelle di sangue del paziente:

• primer (brevi regioni artificialmente sintetizzate del gene necessario);
• enzima speciale (RNA polimerasi).

Dopo il campionamento, il materiale biologico viene inviato per la ricerca al laboratorio. Una porzione di sangue è necessaria per l'analisi PCR diretta, la seconda è inviata per essere testata da ELISA. L'enzima è in grado in breve tempo di aumentare il numero di materiale genetico del virus del patogeno. In un apparecchio speciale, vengono eseguiti diversi cicli di processi di riscaldamento e raffreddamento. Nella fase finale, il materiale ottenuto viene confrontato con i geni del virus e viene fatta una conclusione sulla presenza o assenza di patologia nel corpo del paziente.

L'essenza e la condotta dell'analisi PCR in laboratorio. Girato da SiberianMedicalLaboratory.

Tipi di ricerca

Esistono 3 tipi di diagnostica, che consentono di determinare la presenza del virus dell'epatite C nel corpo umano:

• genotipizzazione;
• qualità;
• quantitativa.

Metodo qualitativo

La diagnosi di epatite C con un metodo qualitativo è applicabile ai pazienti in cui gli anticorpi al virus vengono rilevati nel test del sangue. Nel caso della presenza della fase acuta dell'HCV RNA, tali misure diagnostiche possono determinare la presenza della malattia entro 1-2 settimane dopo l'infezione. Durante questo periodo, gli anticorpi contro l'epatite C potrebbero non essere ancora sviluppati.

Metodo quantitativo

Viene utilizzato un metodo diagnostico quantitativo per determinare la concentrazione del virus nei campioni di sangue. Tale test per la viremia (grado di concentrazione) rende possibile determinare con precisione il numero di unità di RNA virale. Il risultato finale è espresso nel volume corrispondente. Se parliamo di analisi quantitativa, gli indicatori sono misurati in 1 ml (1 cubetto Cm).

Il parametro della carica virale indica il livello di infettività della malattia, cioè riflette il grado di "infettività" del paziente. In pratica, questo significa che maggiore è la concentrazione del virus nel sangue, maggiori sono le probabilità che il paziente infetti altri con epatite C. Un metodo di ricerca quantitativo consente anche di stabilire la qualità e l'efficacia del trattamento.

genotipizzazione

La genotipizzazione rivela mutazioni dell'agente causale della malattia. Prima di prescrivere un piano di trattamento, viene determinato il genotipo del virus: la qualità e la durata della terapia dipendono da questo. Ad esempio, nel trattamento della malattia di tipo I, l'efficienza è del 60%, nel caso del tipo II, III - circa l'80%.

Benefici dell'analisi PCR dell'epatite

Tra i principali vantaggi della procedura vi sono:

1. La possibilità di una diagnosi precoce. L'analisi PCR è in grado di rilevare la presenza di un virus nelle prime fasi dell'infezione.
2. Risultati di errore bassi. La risorsa biologica studiata consente di diagnosticare una sezione di materiale genetico che è caratteristico di un solo tipo di infezione virale. Questa circostanza consente di evitare risultati falsi diagnostici.
3. Alto grado di sensibilità. L'analisi PCR è in grado di rilevare l'RNA del virus in piccole quantità, il che rende possibile monitorare le infezioni latenti nel tempo.

Indicazioni per

I test per la PCR per l'epatite C sono necessari, se disponibili:

• avere contatti con persone malate, che potrebbero portare a infezioni;
• sintomi di cirrosi epatica (ingrossamento della milza, alterazioni non caratteristiche della dimensione del fegato, rilevamento di un plesso venoso sull'addome sotto la pelle);
• risultati positivi di ELISA;
• aumento dell'attività di AST e ALT (manifestata nell'analisi biochimica del sangue);
• la necessità di controllare la condotta della terapia antivirale;
• la fase iniziale del trattamento per la necessità di stabilire una carica virale;
• eseguire la fase finale della terapia per escludere possibili recidive;
• il paziente ha l'epatite B per escludere lo sviluppo di un danno epatico misto.

Come prepararsi alla donazione di sangue per la ricerca sulla PCR

La preparazione per l'analisi PCR include le seguenti raccomandazioni:

• il sangue è preso al mattino;
• l'analisi viene eseguita a stomaco vuoto, quindi è consigliabile fare una pausa tra l'ultima assunzione di cibo di 8-10 ore;
• alcuni giorni prima della diagnosi dovrebbero essere esclusi cibi grassi, piccanti e fritti, bevande alcoliche e fumo;
• un giorno prima dell'analisi si dovrebbe astenersi dallo sforzo fisico pesante, escludere le lezioni in palestra o in piscina.

Risultati dell'analisi: norme e deviazioni

L'analisi in sé non è a lungo termine e l'esperto epatologo o specialista in malattie infettive altamente qualificato decifra i risultati della PCR per l'epatite C. Sulla base dei risultati dell'analisi, il paziente viene diagnosticato.

Per decifrare correttamente i risultati del sondaggio, vengono presi in considerazione i seguenti indicatori:

• analisi biochimica del sangue;
• dati ad ultrasuoni;
• risultati della biopsia.

Interpretazione dell'analisi quantitativa

Quando si ottengono i risultati dell'analisi quantitativa della PCR, vengono presi in considerazione i seguenti indicatori:

Metodo PCR per il rilevamento dell'epatite C

La PCR è una reazione a catena della polimerasi, che viene utilizzata per determinare la presenza di epatite C nel siero, il risultato può essere positivo e negativo.

I vantaggi del metodo PCR

Questo metodo diagnostico presenta i seguenti vantaggi:

1. Il metodo PCR consente di determinare i seguenti risultati:
   • la presenza di un virus RNA;
   • grado di radiazione;
   • informazione genetica originale;
   • unicità e unicità dei dati genetici.
2. Puoi usare qualsiasi materiale clinico necessario:
   • il sangue;
   • plasma;
   • urine;
   • fluidi corporei ed escrementi;
   • espettorato e altri.
3. Consente di determinare nel sangue di più di un microrganismo contemporaneamente, a differenza di altri campioni.
4. Ottenere risultati entro 24 ore.
5. Metodi semplificati per l'archiviazione e il trasporto dell'analisi, i patogeni sono determinati anche in un ambiente morto.
6. L'unicità della PCR consente di identificare determinati microrganismi che non sono suscettibili a nessun altro campione.
7. Alto grado di sensibilità dei reagenti, il test è il più preciso nel suo genere.

Caratteristiche dell'analisi qualitativa della PCR

Viene condotto un test qualitativo per determinare la presenza di un virus nel sangue e ottenere un risultato negativo o positivo.

L'indicazione per questo tipo di diagnosi è la rilevazione di anticorpi contro l'epatite C nel corpo del paziente.

Possibili risultati:

• rilevato (positivo);
• non rilevato (negativo).

Un test di qualità non è adatto a pazienti con un contenuto molto basso di virus nel sangue, quindi ha una certa sensibilità.

Risultato "rilevato"

Rileva il virus dell'epatite C può essere un paio di settimane dopo l'infezione del corpo, anche in assenza di anticorpi a questo patogeno. Questo risultato indica la presenza nel corpo e il gruppo sanguigno di un frammento di RNA caratteristico dell'epatite C.

Il paziente è considerato infetto da questo virus e subisce un'ulteriore diffusione di cellule patogene nel corpo.

Risultato "non rilevato"

Questa opzione suggerisce che nel campione di materiale biologico in studio non ci siano frammenti di RNA specifici per l'epatite C. Questo è un risultato negativo.

La sensibilità del test non rivela il basso contenuto di frammenti di RNA, quindi il risultato "non rilevato" non è sempre plausibile.

Caratteristiche dell'interpretazione dei risultati

La caratteristica principale dell'interpretazione dei risultati è la sensibilità alla soglia del metodo PCR.

Dipende dai seguenti indicatori:

• accuratezza dello studio;
• il tipo e la qualità delle attrezzature utilizzate.

Si noti che la sensibilità può variare tra 10-500 UI / ml. Da ciò consegue che se un virus è presente nel corpo del paziente in studio ad una concentrazione inferiore a 10 IU / ml, il test mostrerà il risultato "non rilevato". Ma questo non significa che l'agente patogeno sia completamente assente.

Varianti di sistemi diagnostici

Al momento, ci sono le seguenti opzioni per i sistemi diagnostici:

1. Se il sangue viene prelevato da un paziente sottoposto a trattamento antivirale, devono essere utilizzati sistemi diagnostici con una sensibilità di almeno 50 UI / ml. I seguenti analizzatori sono utilizzati per questo scopo:
   • Cobas Ampicolor HCV-Test;
   • RealBest HCV RNA.
2. Per effettuare la diagnosi finale di "Epatite C", è necessario rilevare il virus dell'RNA in tre diversi campioni di materiale biologico. Queste raccomandazioni sono sviluppate dall'Organizzazione Mondiale della Sanità. Se il risultato è tre volte negativo, la diagnosi non è confermata.
3. Al momento, oltre al metodo PCR, c'è un test più accurato, chiamato TMA (metodo di amplificazione trascrizionale). La soglia di sensibilità è molto più alta rispetto ad altri metodi di diagnosi.

La gamma di modifiche ai virus rilevate

In questa fase dello sviluppo genetico sono noti diversi tipi e varianti di modificazione del virus.

La diagnostica di laboratorio nel nostro paese con assoluta precisione può determinare i seguenti genotipi:

Caratteristiche dell'analisi quantitativa PCR

L'analisi quantitativa è la definizione del virus dell'epatite C nel corpo umano. Durante lo studio, l'RNA e la carica virale nel materiale di partenza sono determinati mediante PCR. Altrimenti, possiamo dire che il test consente di identificare quante cellule virali si trovano in un fluido biologico. Per questo tipo di studio, viene utilizzato solo sangue venoso. Non esiste una preparazione specifica per il test.

L'analisi quantitativa consente di monitorare lo stadio del trattamento già iniziato e valutarne l'efficacia. Per la valutazione, i dati dei test sono presi prima e durante gli interventi terapeutici. Con l'aiuto dei risultati ottenuti è possibile prevedere il decorso della malattia.

Con il successo del metodo di trattamento scelto dopo 3 mesi, la quantità di RNA dovrebbe diminuire più volte. Secondo le raccomandazioni, l'analisi quantitativa viene eseguita dopo uno, quindi dopo tre e sei mesi. L'ultimo risultato con il successo del trattamento dovrebbe essere negativo.

Valutazione dei risultati del test quantitativo della PCR

Nel nostro paese, ci sono 2 opzioni possibili per valutare il risultato di un test PCR quantitativo:

• il numero di copie per millilitro di fluido biologico;
• il numero di unità internazionali per millilitro.

Per ottenere unità internazionali, il numero di copie è diviso per 4.

• alto con PCR superiore a 800.000 IU / ml;
• basso con PCR inferiore a 400.000 IU / ml.

Il risultato del test quantitativo fornisce 2 opzioni:

• "Sotto il campo di misura";
• "Non rilevato" (negativo).

Valutazione: "sotto il campo di misura"

Tale conclusione è stata presa quando un test quantitativo di RNA non ha rilevato l'agente eziologico dell'epatite C nel materiale di origine cellulare, ma il virus è ancora presente nel sangue. L'affidabilità dell'analisi è confermata dal metodo qualitativo, poiché la soglia di sensibilità del test quantitativo potrebbe non rilevare piccoli valori e concentrazioni del patogeno.

Valutazione: "non rilevato"

Tale conclusione è stata formulata quando i virus RNA dell'epatite C non sono stati rilevati nel materiale di partenza durante la diagnosi: si tratta di un risultato negativo.

Interpretazione dei risultati dell'analisi del test quantitativo della PCR

Utilizzando l'indicatore della carica virale determinare:

• il grado di abbandono della malattia;
• quanto è contagioso il paziente;
• efficacia della terapia antivirale.

Più alto è il tasso di virus dell'epatite C nel corpo, più pericoloso è il paziente per le altre persone e più progressiva è la sua malattia.

L'epatite C PCR è un metodo diagnostico importante, specialmente durante gli interventi terapeutici. Grazie ai risultati negativi o positivi ottenuti, è possibile valutare la loro efficacia, curare completamente il paziente o abbreviare il tempo di trattamento.

Analisi PCR per l'epatite C

Per la diagnosi di "epatite virale cronica C (CVHS)" è necessario un esame completo della persona, che comprende studi clinici, di laboratorio e strumentali. Importante dal punto di vista della diagnosi per la diagnosi corretta è il metodo di reazione a catena della polimerasi PCR.

Che cosa mostra questa analisi e perché è necessaria?

Questo metodo di laboratorio rileva l'RNA del virus dell'epatite C nel sangue umano. Insieme al test immunoassorbente legato all'enzima (ELISA) per gli anticorpi del virus, la PCR viene utilizzata per fare una diagnosi di CVHC e il genotipo del suo agente patogeno. Questa ricerca è uno dei metodi più recenti di diagnostica di laboratorio. La sua affidabilità a CVHS supera il 97%, che è considerato un ottimo indicatore per la ricerca.

Esistono tre esami del sangue per PCR per CVHS: genotipizzazione qualitativa, quantitativa e dei virus. Il primo studio (analisi qualitativa) del virus lo rileva nel sangue e pertanto viene utilizzato solo per la diagnosi.

Il secondo studio (quantitativo) determina il grado di carica virale sul corpo, pertanto, viene utilizzato per monitorare l'efficacia della terapia.

La terza PCR (genotipizzazione) chiarisce la diagnosi, stabilendo il genotipo del virus, che è molto importante per la nomina di un corretto trattamento antivirale.

L'essenza della tecnica di reazione a catena della polimerasi è l'uso di enzimi che moltiplicano il materiale genetico del patogeno nel biomateriale. Nel processo di tale replicazione, il tubo con sangue viene riscaldato più volte e raffreddato alla temperatura richiesta per accelerare la reazione enzimatica. Come risultato di queste manipolazioni, la quantità del genoma virale aumenta molte volte, permettendole di essere rilevata anche con una quantità minima.

La diagnostica PCR ha molti vantaggi rispetto ad altri test di laboratorio:

• alta sensibilità - 97-98%;
• specificità analitica garantita (rivela esattamente l'agente patogeno che si vuole trovare, e non la sua tensione correlata);
• velocità di conduzione (non ci vogliono più di 2 giorni per ottenere una conclusione).

Tre tipi di saggi PCR

L'analisi PCR di alta qualità viene assegnata a tutti i pazienti in cui l'analisi ELISA ha rilevato anticorpi contro il virus HVGS. Dopo aver eseguito una PCR di alta qualità, è possibile ottenere due opzioni di risposta: "RNA viene rilevato" o "RNA non rilevato." Per rilevare la quantità minima di virus nel sangue, sono necessari sistemi di test con una sensibilità di almeno 50 UI / ml. Se la concentrazione del virus nel sangue del paziente è inferiore a quanto può determinare il diagnostico, il risultato dello studio potrebbe essere falso negativo. Per evitare tale errore diagnostico, i laboratori che eseguono la diagnostica PCR dovrebbero essere dotati di sistemi di test altamente sensibili. Nel laboratorio "Invitro", ad esempio, vengono utilizzati test con una sensibilità di 15 UI / ml. Gli operatori di laboratorio sono obbligati a fornire informazioni sulla sensibilità dei test a pazienti e medici alla loro prima richiesta.

L'analisi quantitativa della PCR determina il grado di viremia, cioè la concentrazione dell'agente patogeno nel sangue, la carica virale. Il risultato di questo studio, in contrasto con la PCR di alta qualità, è espresso in numeri, ad esempio 2 × 10 * 6 UI / ml, che significa 2 milioni di unità internazionali in 1 ml di sangue. Alcuni laboratori usano un altro indicatore: il numero di copie / ml. Questi due indicatori sono facili da convertire: 1 unità internazionale equivale a 4 copie di RNA. Pertanto, 2 × 10 * 6 IU / ml significherà che 8 × 10 * 6 copie di RNA virale in 1 ml, vale a dire 8 milioni di copie in 1 ml di sangue.

La genotipizzazione è la definizione di uno dei sei genotipi di un virus. Il quadro clinico, il tasso di sviluppo delle complicazioni dal fegato e la prognosi per la vita futura del paziente dipendono dal genotipo patogeno. Il genotipo del virus è molto importante già nella fase della diagnosi, poiché la combinazione di farmaci e la durata del corso terapeutico da assegnare al paziente dipendono dalla sua corretta determinazione.

Tuttavia, anche questa ricerca di laboratorio apparentemente "perfetta" ha i suoi lati negativi:

• lo studio replica il materiale genetico di tutti i patogeni, anche non viventi, che possono distorcere il risultato. Pertanto, al fine di monitorare l'efficacia con l'aiuto della PCR, la ri-analisi viene effettuata non prima di 2 mesi dopo la precedente, in modo che i virus morti possano "lasciare" il corpo del paziente;
• parte del genoma virale, che è determinata utilizzando i sistemi di test, può teoricamente essere presente in altri virus o microrganismi, quindi esiste una possibilità di una risposta falsa positiva;
• i virus mutano rapidamente. A volte la velocità e l'estensione della mutazione virale sono così elevate che il sistema di test interrompe la cattura del genoma. Di conseguenza, è possibile un risultato falso negativo.

Per ovviare a queste carenze, i produttori di sistemi di test di laboratorio per la diagnostica PCR conducono costantemente i loro test, comprese le reazioni incrociate e la sensibilità a un particolare genotipo del virus.

Come fare un test PCR per l'epatite C?

Affinché la conclusione di un esame PCR sia affidabile, è necessario osservare scrupolosamente le regole di preparazione per la sua condotta:

• lo studio è condotto a stomaco vuoto (glucosio, grassi, minerali che entrano nel sangue dal cibo, possono influenzare la velocità e la qualità della reazione enzimatica);
• il divario tra l'ultimo pasto e il prelievo di sangue per l'analisi dovrebbe essere di almeno 8 ore;
• alla vigilia dello studio è vietato prendere alcolici e consumare cibi grassi, il cui periodo di eliminazione è protratto;
• un giorno prima di andare in laboratorio dovrebbe evitare forti stress fisici ed emotivi;
• fino al momento del prelievo di sangue non è raccomandato fumare.

Al fine di evitare la comparsa di false conclusioni, il presunto paziente deve venire in laboratorio un po 'prima del prelievo di sangue. Ci vogliono 15-20 minuti perché una persona riprenda fiato, calmati. L'adrenalina, che è presente nel sangue dopo una breve passeggiata, può influenzare il risultato dell'esame.

Se il paziente di riferimento per l'analisi prende qualche farmaco, dovrebbe comunicarlo al medico. È possibile che alcuni di essi debbano essere rifiutati per qualche tempo (se possibile).

Il risultato dell'analisi della PCR per l'epatite C

Decodifica i risultati coinvolti nel medico di laboratorio del laboratorio che ha condotto l'analisi. La decodifica è la determinazione della deviazione del risultato ottenuto dalla norma. Il tasso di indicatori è stabilito direttamente dal produttore del sistema di test, che viene utilizzato dal laboratorio per la diagnostica. Pertanto, non sorprende che in alcuni laboratori la carica virale sia determinata in UI / ml e in altre copie / ml.

Una volta ricevuta la conclusione, è necessario essere in grado di interpretarla correttamente. Il trattamento dei risultati dello studio deve essere eseguito dal medico curante del paziente con epatite C. Solo dopo un esame obiettivo, strumentale e di laboratorio del paziente, il medico può ottenere una quantità sufficiente di dati per una corretta interpretazione dei risultati ottenuti dalla PCR.

La valutazione di analisi qualitativa, di regola, non causa difficoltà, perfino in pazienti. Il risultato può essere solo uno: "rilevato" o "non rilevato". In questo caso, il secondo di loro è la norma.

Gli indicatori dell'analisi quantitativa sono più difficili da interpretare. Mostra il grado di carica virale sul paziente. Anche tra gli epatologi, non c'è consenso su come trattare la viremia rilevata. La maggior parte dei medici è incline a ritenere che debba essere preso in considerazione un carico elevato di oltre 8 × 10 * 5 UI / ml. Un carico superiore a 1 × 10 * 7 UI / ml è considerato molto alto, mentre un carico ridotto è inferiore a 4 × 10 * 5 UI / ml.

Il grado di carica virale indica virulenza (aggressività) del virus: maggiore è la sua quantità nel sangue, più velocemente si possono sviluppare le complicanze del fegato. Un'alta concentrazione del virus nel sangue di una donna incinta aumenta la probabilità della sua penetrazione attraverso la barriera emato-placentare al feto. La viremia influisce anche sull'efficacia del trattamento: con un numero basso, l'efficacia della terapia è più alta che con quelle elevate.

Per essere certi della precisione dell'analisi della PCR per l'epatite C, è necessario dare la preferenza solo a quei laboratori che sono ben provati. La politica dei prezzi in questo caso non dovrebbe svolgere un ruolo primario.

Studio PCR sull'epatite C: tipi, indicazioni, trascrizione

L'epatite C virale è una malattia grave che si verifica con danni al fegato. Nell'otto percento dei pazienti, diventa cronico. Il virus si moltiplica nelle cellule del fegato - gli epatociti - e causa la loro morte. Il tessuto morto viene sostituito da focolai di tessuto connettivo, si sviluppa la fibrosi.

Man mano che la fibrosi si sviluppa, il fegato non è in grado di svolgere le sue funzioni, inizia la cirrosi epatica, che è pericolosa per le sue complicanze: aumento della pressione nel sistema delle vene portale, sanguinamento gastrointestinale, alterata coagulazione del sangue, alterazioni mentali dovute al danneggiamento dei nuclei cerebrali da parte di prodotti tossici.

La causa della malattia è l'infezione da parte di un virus della famiglia Flaviviridae, che appartiene al tipo di virus a RNA. Ciò significa che il materiale genetico mediante il quale le proteine ​​del patogeno sono sintetizzate è codificato nella molecola di acido ribonucleico. L'infezione avviene attraverso il sangue, sessualmente, e da una donna incinta al feto. Sfortunatamente, una quantità sufficiente di tempo può passare tra l'infezione e l'inizio della produzione di anticorpi - da due settimane a sei mesi. Ciò non consente di determinare l'infezione da ELISA e iniziare il trattamento in una fase precoce.

Cos'è l'analisi PCR?

La PCR è un metodo di analisi molecolare, che consente di rilevare il materiale genetico del patogeno già nella prima settimana dopo l'infezione con l'aiuto della reazione a catena della polimerasi. Lo studio ha un'elevata specificità, accuratezza e consente non solo di determinare la presenza o l'assenza del virus, ma anche la sua concentrazione e il genotipo.

Per lo studio, viene prelevato il sangue di un paziente in cui l'RNA del virus può potenzialmente essere localizzato. I primer vengono aggiunti al sangue - regioni artificialmente sintetizzate del gene desiderato di piccola lunghezza, e l'RNA polimerasi è un enzima speciale che aumenta ripetutamente la quantità del materiale genetico del patogeno. Utilizzando un apparecchio speciale, vengono eseguiti diversi cicli di riscaldamento e raffreddamento. Quindi il materiale viene analizzato e confrontato con i geni noti del virus, sulla base dei quali viene formulata una conclusione sulla presenza o assenza di infezione.

Tipi di analisi PCR per l'epatite C

Esistono tre tipi di analisi PCR:

Analisi qualitativa della PCR. La prima fase dello studio. Ti permette di identificare il materiale genetico del virus nel sangue.

Analisi quantitativa della PCR. Consente di determinare la carica virale - la concentrazione del materiale genetico del patogeno in un millilitro di sangue. Questo studio viene condotto prima dell'inizio della terapia, e poi nella prima, quarta, dodicesima e (se il corso è lungo) ventiquattr'ore della settimana di trattamento per valutare la sua efficacia.

Genotipizzazione. L'agente eziologico dell'epatite C si modifica spesso e rapidamente. C'erano sette varianti di questo genotipo di virus trovato sul pianeta. In Russia, il primo, il secondo e il terzo tipo sono comuni. Ognuno dei genotipi ha una diversa resistenza alla terapia, per esempio, l'efficacia del trattamento del primo tipo è del sessanta per cento, e per il secondo e il terzo questa cifra raggiunge ottantacinque. Pertanto, al fine di selezionare i farmaci appropriati e prescrivere un ciclo di trattamento di durata sufficiente, è necessario determinare esattamente quale tipo di virus è stato infettato dal paziente.

Indicazioni per l'analisi PCR per l'epatite C

Lo studio PCR è prescritto nei seguenti casi:

• contatto con una persona ammalata alla quale potrebbe verificarsi un'infezione;
• saggio immunoenzimatico positivo;
• segni di cirrosi epatica: un cambiamento delle dimensioni del fegato, una milza ingrossata, la comparsa di un plesso venoso sottocutaneo sull'addome;
• la comparsa di sintomi di danno epatico: dolore all'addome destro, ingiallimento della pelle;
• aumento dell'attività di ALT e AST nell'analisi biochimica del sangue;
• prima di iniziare il trattamento per determinare la carica virale;
• monitorare l'efficacia della terapia antivirale;
• dopo il trattamento per controllare la ricaduta;
• in presenza di diagnosi di epatite B, per escludere un danno epatico misto.

Spiegazione degli studi PCR sull'epatite C

La decodifica dell'analisi PCR e del saggio immunologico enzimatico per l'epatite C dovrebbe essere eseguita da un epatologo o da uno specialista in malattie infettive. L'analisi dei risultati della PCR è necessaria in combinazione con i dati dell'analisi biochimica del sangue, della biopsia e degli ultrasuoni. Solo un medico qualificato sarà in grado di analizzare i risultati della ricerca e, sulla base di essi, prescriverà il trattamento corretto.

Decodifica dell'analisi qualitativa.

Nel materiale biologico analizzato trovato il materiale genetico del patogeno. Infezione confermata

L'infezione è assente o la quantità di RNA patogeno è inferiore al limite di sensibilità.

Decodifica dell'analisi quantitativa.

Tasso normale per persone sane. Significa che il materiale di test non contiene RNA dell'epatite C o la sua concentrazione è inferiore alla soglia di sensibilità dello studio.

La concentrazione di RNA è inferiore all'intervallo di quantificazione. Questi risultati sono interpretati molto attentamente, li correlano con i dati di altri studi, spesso riesaminano.

Il livello di carica virale a una determinata concentrazione è considerato basso. Di solito, una diminuzione della quantità di virus significa che la terapia ha successo.

Più di 8 * 10 ^ 5 IU / ml

Il livello di carica virale a una data concentrazione è considerato alto.

Più di 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

La quantità di RNA è superiore al limite superiore dell'intervallo di quantificazione. È impossibile trarre conclusioni sul grado di carica virale con questo risultato. Solitamente in tali casi, il test viene ripetuto con la diluizione di un campione di sangue.

Genotipizzazione decodifica.

RNA di un genotipo specifico rilevato

Il virus dell'epatite C di un determinato genotipo e sottotipo è stato rilevato nel biomateriale. Il risultato è codificato in numeri romani e lettere latine, ad esempio - 1a, 2b. In totale ci sono sette genotipi e sessantasette sottotipi, ma in Russia ci sono solo tre primi tipi.

Rilevato RNA del virus dell'epatite C

L'RNA è stato trovato nel sangue di un raro genotipo per la Russia, che non può essere attribuito al primo, al secondo o al terzo tipo. Sono necessarie ulteriori ricerche

Questo risultato indica che il paziente è sano o che la quantità di RNA patogeno è troppo piccola.

È possibile che l'analisi PCR per l'epatite C sia negativa e il saggio immunoassorbente legato all'enzima riconosca gli anticorpi contro il virus. Ciò significa che il paziente ha avuto un'epatite C acuta e si è ripreso da solo. Circa venti casi di infezione provocano un recupero spontaneo se il corpo del paziente ha una resistenza sufficiente all'infezione.

Sebbene la PCR sia estremamente accurata, i suoi risultati potrebbero essere distorti nelle seguenti situazioni:

• il sangue è stato trasportato in laboratorio in condizioni inadeguate, la temperatura è stata violata;
• il campione di biomateriale era contaminato;
• c'erano tracce residue di eparina e altri anticoagulanti nel sangue;
• Gli investigatori sono stati trovati per essere inibitori - sostanze che rallentano o fermano la reazione a catena della polimerasi.

I vantaggi della PCR rispetto ad altri metodi

Diagnosi nelle prime fasi. PCR rileva il materiale genetico dell'agente causale. Utilizzando l'analisi di immunofluorescenza, è possibile identificare solo le immunoglobuline, sostanze che il corpo produce in risposta a un'infezione. In caso di infezione da epatite C, il divario tra l'infezione e l'insorgenza della risposta immunitaria può essere di diverse settimane e mesi, in questo momento l'ELISA sarà inefficace. La PCR darà una risposta nella prima settimana dopo l'infezione.

Bassa probabilità di errore. Nel materiale in studio determinare l'area del materiale genetico, che è caratteristico di un solo tipo di agenti patogeni. Questo elimina risultati falsi. Quando sono possibili errori ELISA, poiché lo stesso tipo di anticorpo può essere rilasciato contro diversi virus - tali anticorpi sono chiamati anticorpi.

Alta sensibilità La PCR consente di rilevare l'RNA dell'agente causativo anche in quantità minime. Questo rende possibile identificare le infezioni nascoste.

Come prepararsi alla donazione di sangue per la ricerca sulla PCR

Per l'analisi PCR dell'epatite C, viene raccolto sangue venoso. Di solito, due porzioni di sangue vengono prelevate dalla vena del paziente alla volta: il primo viene inviato per la PCR e il secondo da ELISA. Questo viene fatto per valutare con maggiore precisione quanto un paziente è stato infettato da un virus e in che modo l'immunità combatte contro di esso.

Di solito al paziente è richiesto di seguire le seguenti regole:

• un esame del sangue viene effettuato al mattino;
• L'intervallo tra l'ultimo pasto e la donazione di sangue dovrebbe essere da otto a dieci ore;
• due o tre giorni prima dell'analisi, è necessario abbandonare cibi fritti e grassi e alcol;
• per ventiquattro ore prima dell'analisi, il paziente dovrebbe evitare lo sforzo fisico: non portare pesi, non andare in palestra o in piscina.