Analisi qualitativa per l'epatite C

8 marzo 2017, 12:29 Articoli esperti: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

Un'analisi qualitativa della reazione a catena della polimerasi - la PCR per l'epatite C determina la presenza o l'assenza di HCV nel corpo. In condizioni di laboratorio, viene studiata la struttura dell'RNA, che includerà il virus. In caso di rilevamento del virus C, è necessario sottoporsi a un ciclo di trattamento, poiché lo stato trascurato del fegato si tradurrà in gravi conseguenze. La PCR di alta qualità viene eseguita dopo il recupero per confermare l'assenza di anticorpi. Nominato e per ispezione di routine. Con una bassa concentrazione dell'agente causale nel sangue, la PCR (qualitativa) potrebbe non rilevare nulla, poiché il sistema diagnostico ha le proprie soglie di sensibilità. Nel caso della fase iniziale della malattia o della forma lieve, la PCR viene eseguita mediante analisi ultradiagnostica su apparecchiature ultrasensibili.

Cos'è il virus RNA?

Il termine RNA del virus dell'epatite C (o RNA del virus dell'epatite C) è la stessa malattia del fegato. Il virus C si lega alla cellula sana del corpo penetrando all'interno. Nel corso del tempo, si sviluppa in tutto il corpo, è necessario solo entrare nel sangue. Di conseguenza, il patogeno penetra nel fegato, si fonde con le sue cellule e lavora sodo. Le cellule epatiche (epatociti) lavorano sotto la sua influenza, subendo cambiamenti e da questo muoiono. Più a lungo il virus C è nel fegato, maggiore è il numero di cellule muoiono. Nel corso del tempo si sviluppano malattie pericolose che portano a degenerazione e morte maligne.

L'infezione del fegato con questo tipo di virus potrebbe non manifestarsi esternamente. Per molti anni o decenni, una persona infetta si sente completamente in salute, e solo un esame casuale rivela molto spesso la patologia. Durante la donazione di sangue per l'epatite, viene esaminata una porzione della catena di RNA (acido ribonucleico) che fa parte del gene umano (DNA). I risultati degli esami di laboratorio non devono essere utilizzati per l'autotrattamento, perché questo è solo un indicatore. L'immagine esatta e l'ulteriore diagnosi sono meglio determinate dal medico.

Al termine: indicazioni per la ricerca

In conferma dell'HCV, l'analisi della PCR viene eseguita (reazione a catena della polimerasi). Gli studi sulla PCR aiutano a trovare l'agente eziologico nella struttura dell'RNA e prescrivono una terapia efficace. Nominato nei seguenti casi:

• individuazione dei segni di infiammazione del fegato;
• studi di screening per la prevenzione;
• esame delle persone in contatto;
• diagnosi di epatite di origine mista (determinazione dell'agente patogeno principale);
• determinare il livello di attività riproduttiva del virus nella forma cronica;
• cirrosi epatica;
• determinare l'efficacia del trattamento prescritto.

Ricerca PCR prescrive un medico per determinare l'efficacia del ciclo di trattamento dell'epatite.

Esiste un'analisi qualitativa e quantitativa della PCR. La PCR quantitativa mostra la percentuale di RNA con i vettori del virus nel sangue e qualitativa indica la presenza o assenza virale. Un indicatore positivo di qualità (presenza di RNA dell'epatite C) richiede anche una ricerca quantitativa. Un alto livello di concentrazione dell'agente causale dell'epatite C è associato al rischio della sua trasmissione, cioè l'infezione di altri. I numeri bassi sono meglio curabili. La quantità di virus a RNA nel sangue non è correlata all'intensità della malattia. L'analisi della PCR viene eseguita anche nel caso della terapia con interferone al fine di prescrivere la durata e la complessità del ciclo di trattamento.

Caratteristiche di analisi PCR di alta qualità per l'epatite C

Un'analisi qualitativa viene assegnata con un indicatore di reazione a catena della polimerasi per tutti i pazienti che hanno anticorpi contro l'epatite C. Nel sangue, coloro che sono stati malati e recuperati devono ripetere il test. Si raccomanda di effettuare un'analisi per l'epatite B, quindi, in caso di conclusione positiva, e per l'epatite D. Inoltre, la reazione qualitativamente analizzata deve essere eseguita insieme ad altri esami del sangue. Le analisi mostreranno un quadro completo della diffusione virale.

Dai risultati del test, solo un test positivo per l'epatite C sarà visibile o negativo, cioè la presenza o l'assenza di un virus. Se l'output è "rilevato", il virus è e continua ad essere attivo. La designazione "non rilevato" indica l'assenza di un virus o la sua piccola quantità. Con questo indicatore, si dovrebbe tenere presente che la sensibilità analitica dei sistemi diagnostici è diversa e che l'epatite C dell'RNA potrebbe essere ancora nel sangue, ma non manifestarsi nell'analisi.

Un metodo PCR particolarmente sensibile rivela l'ultra epatite C anche in piccole quantità. Viene utilizzato uno studio di ibridazione a fluorescenza, che è molte volte superiore rispetto ai sistemi PCR standard. Il metodo è utilizzato in diversi casi:

• sospette forme nascoste di epatite C;
• La diagnostica della PCR non ha confermato l'agente patogeno, ma ci sono anticorpi;
• in caso di recupero;
• per rilevare l'infezione precoce.

Torna al sommario

Analisi di decodifica

La decodifica PCR dell'HCV influisce sulla decisione finale quando si effettua una diagnosi, in particolare con il metodo ultrametod. Il principale svantaggio di questo studio è la stretta aderenza alle condizioni sterili per il campione e i materiali. Una leggera deviazione a volte mostra conclusioni analitiche imprecise, complica la diagnosi e il successivo trattamento. L'analisi della PCR per la determinazione dell'RNA dell'epatite non sempre mostra con sicurezza un quadro della malattia, a volte sono consentite imprecisioni e in entrambe le direzioni.

Diagnosticare il virus dell'epatite, si consiglia di utilizzare un esame completo.

Norma degli indicatori

L'assenza di anticorpi JgM contro l'epatite C virale nei risultati dello studio è considerata la norma nell'analisi della reazione a catena della polimerasi. Allo stesso tempo, i risultati dell'analisi sierologica indicano la presenza di anticorpi contro il virus C e questo è anche entro il range normale. Una definizione qualitativa non mostra l'intensità della malattia, ma rivela solo l'agente eziologico dell'epatite C nell'RNA. Questa analisi viene ripetuta dopo il trattamento per confermare il recupero effettivo.

deviazioni

Se sono presenti anticorpi JgM per HCV RNA, questo indica un'infezione in via di sviluppo. La malattia procede allo stesso tempo in modo acuto o cronico, manifestandosi in diverse fasi. Se viene registrata una diminuzione del numero di anticorpi, l'analisi indicherà che i risultati del trattamento sono stati raggiunti durante il recupero. Vi sono casi estremamente rari di risultati falsi positivi nella diagnostica. Si trovano nelle donne durante la gravidanza e nelle persone con altre malattie infettive.

Analisi qualitativa della PCR per l'epatite C

L'epatite è una malattia grave che ha molte cause. La base del suo sviluppo è il danno diretto o indiretto al fegato. Considerando la sua importanza per l'intero organismo, si può solo intuire quanto sia difficile la patologia. In questo articolo esamineremo più in dettaglio le caratteristiche del corso e la diagnosi di laboratorio dell'epatite C.

La causa della malattia è un agente virale che si riferisce a patogeni contenenti RNA. Ha una caratteristica distintiva: la capacità di mutare, cioè di cambiare la sua struttura. A causa di ciò, l'infezione sfugge all'attacco del sistema immunitario e nella maggior parte dei casi porta a un'infiammazione cronica nel fegato.

Data l'esistenza di diversi sottotipi del virus, la selezione dei farmaci dovrebbe essere basata sui risultati della genotipizzazione. Nonostante un lungo studio della malattia e le caratteristiche della struttura dell'HCV, non è stato ancora possibile sviluppare un vaccino specifico per la malattia.

Le difficoltà della diagnosi precoce si trovano nel decorso asintomatico dell'epatite, a seguito della quale una persona visita un medico nella fase della cirrosi. Al fine di rilevare una malattia nel tempo, sono richiesti regolari esami medici. Solo attraverso test di laboratorio sul sangue è possibile rilevare l'HCV e prevenire l'infezione di chi ti circonda. Il fatto è che il vettore dell'infezione può a lungo non indovinare la patologia e continuare a trasmettere il virus a persone sane.

Modi di trasmissione

Nella maggior parte dei casi, il virus si diffonde attraverso il sangue, poiché contiene la più alta concentrazione di agenti patogeni. Quindi, l'infezione viene trasmessa:

• con emodialisi;
• con un ago infetto;
• nel processo di combattimento, quando la pelle è ferita e si verifica un contatto con il sangue;
• con trasfusione di sangue (trasfusione di sangue).

La probabilità di infezione durante l'intimità è insignificante, poiché lo sperma e le perdite vaginali contengono una piccola quantità di agenti patogeni. Il rischio di infezione è significativamente aumentato in violazione dell'integrità della membrana mucosa dei genitali. Questo è osservato con il sesso aggressivo e anale.

Per quanto riguarda la modalità verticale di trasmissione, è effettuata nel processo di lavoro. Nel periodo di gestazione del feto, l'agente patogeno non può penetrare attraverso la placenta fino all'embrione. Durante il parto naturale, l'agente patogeno viene trasmesso al bambino traumatizzando la sua pelle, quando si osserva il contatto con il sangue della madre.

Dopo la penetrazione del patogeno in un organismo sano, inizia la sintesi degli anticorpi, che sono protezione dall'infezione e appartengono alle strutture immunitarie. Si trovano nello studio iniziale di una persona che utilizza ELISA.

Per confermare la diagnosi, il paziente è sottoposto a una reazione a catena della polimerasi. È un'analisi del materiale genetico di un agente patogeno e la determinazione della carica virale.

Diagnosi di laboratorio dell'epatite C

La diagnosi di laboratorio inizia con un test immunoenzimatico. Il suo compito principale è rilevare gli anticorpi prodotti contro il patogeno. La sua efficienza è quasi del 95%. Grazie a questa ricerca, è possibile identificare il vettore del virus nella fase preclinica e inviarlo per ulteriori esami.

Un'analisi qualitativa del test ELISA indica la presenza o l'assenza di immunoglobuline nel sangue del paziente. Il risultato potrebbe essere "positivo" o "negativo". Avendo ricevuto la prima risposta, la persona viene inviata per il prossimo esame - PCR. Il suo prezzo dipende dalla qualità dei reagenti e del laboratorio. Il costo della reazione a catena della polimerasi può raggiungere i 4 mila rubli.

Funzioni PCR

Usando una reazione a catena della polimerasi, anche una piccola quantità di materiale biologico ci consente di stimare la carica virale nel sangue, cioè di calcolare la concentrazione di agenti patogeni in un millilitro di fluido.

Con l'avvento della PCR, la diagnosi di epatite è diventata molto più facile. L'analisi consente di identificare l'RNA dell'HCV, per stabilire lo stadio del processo infettivo e l'infettività della portatrice del virus.

Esistono diversi tipi di diagnosi genetica:

1. Analisi qualitativa della PCR per l'epatite C - conferma la presenza o l'assenza di HCV nel sangue del soggetto:
2. quantitativo, attraverso il quale è possibile calcolare la concentrazione di virus e stabilire lo stadio della malattia. Il risultato è dato in UI / ml o copie / ml (a seconda del laboratorio);
3. genotipizzazione: necessaria per determinare il genotipo dell'HCV. Questo è necessario per una selezione accurata dei farmaci che saranno più efficaci in questo caso. L'analisi indica indirettamente la gravità del processo patologico nel fegato. Quindi, nel terzo genotipo dell'agente patogeno, la steatosi è più spesso osservata, la cui base è l'accumulo di grasso negli epatociti (le sue cellule). Inoltre, il tipo di virus influenza l'esito e la durata del corso terapeutico.

Analisi qualitativa della PCR per l'epatite C

Prima di tutto, il materiale biologico viene esaminato in laboratorio per la presenza dell'HCV RNA. È importante ricordare che un'analisi qualitativa dell'epatite C ha un certo livello di sensibilità e quindi potrebbe non dare sempre la risposta giusta. In questo caso, si consiglia di ripetere la diagnostica di laboratorio utilizzando altri reagenti.

Per ottenere risultati affidabili, devono essere utilizzati sistemi di prova con una sensibilità di almeno 50 UI / ml.

Il risultato diagnostico può essere "positivo" o "negativo". Se l'agente patogeno non si trova nel sangue, lo studio è completato. Se nel campione viene rilevato un agente patogeno, viene quantificata una carica virale.

Una risposta falsamente negativa si ottiene quando il processo viene violato, ad esempio, componenti attivi che sopprimono la costruzione di copie del patogeno entrano nel mezzo. Pertanto, non è possibile visualizzare una vera immagine del sangue, motivo per cui l'infezione di una persona non viene diagnosticata.

Un risultato falso positivo può essere ottenuto se il tubo per la raccolta di materiale biologico, così come l'ambiente per lo studio sono stati contaminati. Inoltre, tale risposta all'analisi è possibile quando si verificano infezioni miste, quando il fegato è influenzato da diversi virus, ad esempio, epatite C e D.

Indicazioni per la ricerca qualitativa

Il medico può prescrivere a un paziente uno studio qualitativo sull'identificazione dell'RNA del virus dell'epatite C:

• al ricevimento di una risposta immunologica enzimatica positiva o dubbia;
• per la verifica della diagnosi;
• determinare la carica virale;
• impostare lo stadio della malattia;
• diagnosi di infezione mista. L'epatite C spesso infetta il fegato contemporaneamente al virus "D";
• determinazione delle tattiche terapeutiche tenendo conto del genotipo dell'agente causale;
• valutare le dinamiche dei cambiamenti durante il trattamento con farmaci antivirali.

I vantaggi della reazione a catena della polimerasi includono:

1. alta sensibilità della tecnica, che consente di stabilire il fatto di infezione in fase preclinica;
2. identificazione del materiale genetico del patogeno e non dei suoi anticorpi;
3. la possibilità di stabilire un sottotipo di un agente patogeno;
4. alto tasso diagnostico, poiché non è richiesta la semina del materiale sul mezzo nutritivo ed è sufficiente utilizzare specifici sistemi di test. Una persona ottiene il risultato dopo 5 ore;
5. versatilità. L'analisi consente di identificare qualsiasi materiale genetico (RNA, DNA). Grazie a questo, il medico può confermare l'epatite C e altri tipi di malattia (B);
6. la capacità di rilevare l'infezione latente.

Ricerca quantitativa

Nello studio del sangue utilizzando la reazione a catena della polimerasi è possibile calcolare il numero di patogeni in un volume fisso di materiale biologico. L'indicatore è presentato in UI / ml. Attraverso l'analisi, è possibile determinare il grado di contagio del paziente, determinare lo stadio del processo infettivo e anche valutare l'efficacia della terapia farmacologica.

Sulla base della PCR, lo specialista decide quali dosi di farmaci possono bloccare la riproduzione dei patogeni. Inoltre, vengono determinati la durata del trattamento antivirale e la prognosi per la vita. È importante ricordare che i sistemi di test hanno un'alta sensibilità, pertanto il metodo consente di confermare l'infezione di una persona allo stadio preclinico.

genotipizzazione

Data la capacità del patogeno di mutare, il suo genotipo è necessario per determinare la tattica del trattamento e la scelta dei farmaci antivirali. Ad esempio, il trattamento dell'HCV 1 dura 48 settimane, con una tendenza positiva osservata solo nel 60% dei casi. I genotipi 2 e 3 hanno una prognosi più favorevole. I farmaci antivirali sono prescritti per 8 mesi e la loro efficacia raggiunge l'85%.

Secondo le statistiche, nella maggior parte dei casi, HCV 1, 2 e 3 sono registrati nella Federazione Russa.

Quando si decifra un test di laboratorio, questa risposta può essere indicata - "non digitato". Ciò significa che un virus circola nel sistema circolatorio del paziente e non può essere riconosciuto dal sistema di test. Il risultato dell'analisi in questo caso indica che il patogeno non è tipico per una determinata area geografica.

Come ottenere risultati affidabili?

Affinché uno studio qualitativo della PCR per rilevare l'RNA dell'agente causale dell'epatite C abbia mostrato i risultati corretti, è necessario seguire i requisiti per la preparazione alla diagnostica di laboratorio:

1. il prelievo di sangue viene effettuato a stomaco vuoto e il gap "affamato" non dovrebbe essere inferiore a 8 ore;
2. due giorni prima dello studio, si raccomanda di smettere di bere bevande alcoliche e di abbandonare piatti piccanti, grassi e affumicati;
3. annullare l'introduzione di farmaci che riducono la coagulazione del sangue, ad esempio l'eparina. Se questi farmaci sono prescritti per motivi di salute, è necessario informare il medico. Inoltre, lo specialista dovrebbe essere a conoscenza dell'ammissione di altri farmaci che possono influenzare il risultato della ricerca di laboratorio;
4. Alla vigilia della raccolta di materiale biologico, le procedure fisioterapeutiche non dovrebbero essere eseguite e dovrebbero essere sottoposte a gravi sforzi fisici.

I risultati dell'analisi possono essere influenzati non solo dalla persona che dona sangue, ma anche da altri fattori, vale a dire:

• prelievo di sangue di scarsa qualità;
• inosservanza delle raccomandazioni sul trasporto di materiale biologico;
• formazione insufficiente dei lavoratori di laboratorio;
• non conformità con la tecnica di ricerca;
• introduzione di anticoagulanti (eparina) alla vigilia del campionamento del sangue. Questo gruppo di farmaci riduce la coagulazione, rallentando così il lavoro dei reagenti.

In diversi laboratori, la risposta diagnostica può differire leggermente, ma questi errori non influenzano il risultato finale dello studio.

Particolare attenzione è rivolta ai tipi di sistemi di test utilizzati in laboratorio. Spesso viene data preferenza ai reagenti con alta sensibilità. Questo è importante per i pazienti con bassa carica virale perché è difficile da rilevare.

Quante volte viene eseguito un test di laboratorio?

La reazione a catena della polimerasi primaria viene eseguita in persone che sono state rilevate mediante immunodosaggio per gli anticorpi contro il patogeno dell'epatite. In questo caso, viene assegnato per confermare il fatto di infezione di una persona e stabilire lo stadio della malattia. Inoltre, l'analisi consente di determinare il sottotipo del virus, che è particolarmente importante per la scelta dei farmaci.

Il periodo successivo per i test di laboratorio obbligatori è di 3 mesi dall'inizio della terapia antivirale. La diagnostica consente di valutare l'efficacia dei farmaci, regolare la dose o sostituirli.

Oltre ai test di base, la PCR può essere eseguita anche a 4 e 24 settimane dall'inizio del trattamento. Una prognosi positiva della malattia è confermata da una diminuzione della carica virale dopo tre mesi di terapia. Ad esempio, dovrebbe diminuire da 1 milione di IU / ml a diverse centinaia di migliaia.

Se la concentrazione di agenti patogeni nel sangue rimane allo stesso livello o aumenta leggermente, ciò indica l'inefficacia degli agenti antivirali e richiede la loro sostituzione. Utilizzando la PCR alla fine del trattamento, è possibile confermare il recupero del paziente.

Per interpretare correttamente i risultati della diagnostica di laboratorio, è richiesta la consulenza di un epatologo o di uno specialista in malattie infettive. Data l'alta frequenza di false risposte in ELISA, l'analisi viene utilizzata esclusivamente per lo screening primario. Per un esame più approfondito del paziente ha usato la reazione a catena della polimerasi.

Analisi PCR per l'epatite C

L'epatite C passa da acuta a cronica nell'80% dei casi. La replicazione dei virus patogeni nelle cellule del fegato funzionali porta a disfunzione d'organo. Ciò è dovuto al fatto che il tessuto parenchimale è sostituito dal connettivo. Di conseguenza, la storia del paziente è integrata da sanguinamento nel tratto gastrointestinale, intossicazione del corpo, problemi di coagulazione del sangue. Pertanto, i primi cambiamenti patologici sono diagnosticati, maggiore è la possibilità di recupero del paziente. L'analisi PCR per l'epatite C è considerata il metodo di ricerca più accurato.

Questo metodo diagnostico può essere eseguito diversi giorni dopo l'infezione. La reazione a catena della polimerasi può determinare in modo affidabile il genotipo e la concentrazione del virus nel sangue. Per fare l'analisi, il paziente viene preso materiale biologico in cui può essere presente l'RNA agente causativo.

La PCR per l'epatite C si svolge in tre fasi:

• Analisi qualitativa - utilizzandola per determinare il materiale genetico del patogeno.
• Ricerca quantitativa - quindi rivela la carica virale.
• Genotipizzazione: in questa fase, il medico riconoscerà il tipo di malattia.

La tecnica è stata sviluppata circa 30 anni fa. È usato per diagnosticare molte malattie infettive. PCR consente di rilevare materiale genetico unico. Per fare questo, utilizzare i primer. I cosiddetti fili corti di RNA, che sono collegati all'inizio del gene.

Di conseguenza, il numero di frammenti di virus patogeno si moltiplica. Ogni fase richiede uno speciale regime di temperatura e un certo periodo di tempo. Una molecola di DNA si forma entro 3 minuti. L'amplificazione comprende circa 30 cicli. La PCR viene eseguita in laboratorio attraverso attrezzature speciali.

Indicazioni per appuntamento

L'analisi PCR può essere dovuta alla presenza di sintomi clinici di epatite C. La procedura è indicata per le persone che:

• contattato una persona infetta;
• soffre di malattia epatica acuta e cronica;
• essere trattati per cambiamenti patologici nel tessuto parenchimale;
• sono a rischio;
• sono donatori di sangue e dei suoi componenti.

La PCR viene eseguita non solo con l'epatite C. L'analisi viene utilizzata in medicina, biologia, medicina legale. Determinazione di indicatori specifici - la fase necessaria per la selezione di schemi di farmaci.

Benefici dell'analisi

Nello schema di esame diagnostico includono l'analisi di immunofluorescenza e PCR. Usando il primo, è possibile determinare la concentrazione di immunoglobuline. Queste sostanze sono prodotte da un meccanismo protettivo dopo l'ingresso di virus patogeni nel corpo. Contrariamente alla PCR, ELISA non è efficace durante il periodo di incubazione. Con l'aiuto della reazione a catena della polimerasi, l'epatite C può essere rilevata nei primi 7 giorni dopo l'infezione.

Questo studio clinico ha le seguenti caratteristiche:

• La probabilità minima di un risultato falso.
• Alta efficienza.
• Specificità.
• Sensibilità.
• Versatilità.
• Automatizza il processo.
• Sicurezza.
• Il tasso di ottenere indicatori.

L'unico svantaggio della PCR è la sua complessità tecnica. Ciò è dovuto al fatto che il medico deve scegliere la giusta composizione di nucleotidi, le cui funzioni sono la sintesi del DNA. A causa della maggiore sensibilità del metodo, è possibile ottenere risultati falsi positivi o falsi negativi.

Al fine di ottenere l'accuratezza di indicatori significativi, il materiale biologico viene accuratamente pulito dai farmaci e dai composti proteici. Per confermare il risultato, è necessario un confronto tra i campioni precedentemente testati. I fattori che provocano un errore includono:

Violazione dell'analisi della tecnica di campionamento

• Violazione della tecnica di analisi.
• Cambiamenti nella sequenza dei frammenti di RNA.
• La coincidenza dei nucleotidi sintetizzati e dei geni dei virus patogeni.

La probabilità di ottenere un risultato falso nell'epatite C è presente a causa dell'impossibilità di determinare la base genetica della malattia. La diagnostica PCR può identificare direttamente il patogeno. Utilizzando l'amplificazione del DNA, i patogeni vengono rilevati nel cibo, nell'acqua e nel terreno.

I limiti di questo metodo non riducono la sua efficacia e popolarità. La ricerca clinica viene eseguita regolarmente. Pertanto, il medico può valutare l'efficacia delle misure di trattamento adottate. La necessità di questo è dovuta al fatto che il virus dell'epatite C è in grado di mutare. L'assenza di un effetto positivo significa l'adattamento del virus ai farmaci utilizzati.

Preparazione per la consegna

Al fine di condurre una reazione a catena della polimerasi in un paziente affetto da epatite C, viene prelevato sangue venoso. Di solito sono necessarie due parti di materiale biologico per lo studio. Attraverso uno, la PCR viene eseguita direttamente e l'altra viene inviata per il test immunologico.

Sangue per analisi PCR prelevato dalla vena

La preparazione è importante. Il paziente dona sangue per PCR al mattino a stomaco vuoto. Alcuni giorni prima la procedura dovrà abbandonare cibo, alcool, nicotina e droghe dannosi. Il paziente deve evitare il contatto sessuale, eccessivo stress fisico ed emotivo. La piscina e la palestra sono vietate. Sarà necessario prepararsi in ogni caso.

Ci sono indicazioni specifiche per quanto riguarda le droghe mediche. Questo vale per antibiotici e antidepressivi. Le donne che hanno iniziato le mestruazioni dovrebbero ritardare i test per l'epatite C. La colposcopia è anche un motivo per rifiutare la procedura.

Le regole elencate sono piuttosto semplici. Grazie a loro, è possibile ottenere la massima affidabilità di questo metodo diagnostico. Decifrare i risultati deve specialista. Interpretarli in modo indipendente in un paziente è improbabile che abbiano successo.

Il processo di analisi

La diagnostica PCR è la seguente:

Il sangue è posto in un termostato.

• Per prima cosa, prendi il materiale biologico. Il sangue viene inserito in dispositivi sterilizzati. Il volume richiesto non supera 1-1,5 ml. Mantenere il sangue e i suoi componenti non dovrebbero essere più lunghi di 24 ore. La temperatura di conservazione non deve superare i 4 gradi Celsius.
• Dopo aver iniziato uno studio clinico. Il sangue preparato viene posto in un termostato insieme alla miscela di amplificazione. Di solito non richiede più di 25 ml di una composizione speciale. L'amplificazione viene eseguita automaticamente per diverse ore.
• In parallelo, effettuare test di controllo. Per fare questo, utilizzare materiali biologici presi da una persona sana. Ciò contribuirà ad evitare risultati falsi.
• Decodifica e registrazione degli indicatori. Il materiale genetico viene rilevato usando l'etidio bromuro. A causa dell'effetto specifico, i frammenti di DNA sono evidenziati. La presenza (assenza) del virus è rivelata concentrandosi su queste tabelle.

Decodifica risultati

Solo uno specialista di malattie infettive e un epatologo possono determinare il valore di questi indicatori. L'analisi PCR viene gestita con un complesso diagnostico insieme a esami del sangue biochimici, ultrasuoni, ELISA e biopsia. La diagnosi è fatta sulla base di tutti i risultati. La procedura per la decodifica dei test dipende dalla fase dell'esame diagnostico.

Nella prima fase della PCR, un risultato positivo del test è la rilevazione di frammenti di DNA del virus patogeno. Quando si esegue l'analisi quantitativa determinare il livello di carica virale. Può essere basso (meno di 8 * 10 ^ 5 IU / ml), medio (da 8 * 10 ^ 5 IU / ml), alto (più di 2.4 * 10 ^ 7 IU / ml). L'assenza di anticorpi specifici e particelle di RNA virale è considerata la norma (risultato negativo). Nella fase di genotipizzazione, l'infezione da un'infezione è indicata dall'RNA di un particolare genotipo.

Al ricevimento di un risultato positivo, al paziente viene prescritto un regime terapeutico efficace. Allo stesso tempo, devono essere prese in considerazione le informazioni sulla presenza del virus nel sangue, il grado della sua attività e il genotipo. Il prezzo della procedura dipende dal metodo di prova, dal tipo di materiale biologico. I costi per prendere sangue o altri liquidi possono essere aggiunti al costo totale. Quest'ultimo è dovuto al fatto che l'agente patogeno si trova spesso nelle urine, nelle feci e nello sperma.

Caratteristiche dei test per l'epatite C e dei metodi più accurati

L'epatite C è uno dei virus più insidiosi, poiché potrebbe non dare alcun sintomo per anni e molte persone non sono nemmeno a conoscenza della presenza di questa malattia. Il virus dell'epatite C viene spesso diagnosticato durante un esame generale o anche quando ha causato complicazioni come cirrosi epatica o altre gravi complicazioni.

Attenzione! L'epatite C è una delle forme più comuni. Più spesso, viene diagnosticata solo l'epatite B

È stato a lungo considerato non del tutto corretto dire che l'epatite C è incurabile e ora ci sono molti farmaci e metodi di terapia abbastanza efficaci. Tuttavia, secondo le previsioni più modeste fatte dall'OMS, nei prossimi due decenni, l'epatite C potrebbe diventare una vera epidemia nella maggior parte dei paesi.

In tempo per identificare l'infezione e iniziare il trattamento sarà utile l'analisi, che può essere fatta in qualsiasi grande città del nostro paese.

Quando e chi ha bisogno di essere testato per l'epatite C

Il test dell'epatite (tutte le forme) è raccomandato per ogni persona ogni pochi anni come misura preventiva.

Quali sono le caratteristiche dell'epatite C? Chi è raccomandato per i test? Come sapete, questa forma viene trasmessa esclusivamente attraverso il sangue ed è impossibile raccogliere l'infezione, ad esempio, da goccioline trasportate dall'aria.

Tuttavia, non si dovrebbe pensare che l'epatite C sia solo la maggior parte dei tossicodipendenti. Essere a rischio può essere facilmente, ad esempio, decidere di ottenere un piercing o un tatuaggio.

Precedentemente, durante la trasfusione di sangue da donatore si è verificato un numero elevato di casi di infezione, ma ora viene controllato e tutti i test per l'epatite C vengono fatti prima della procedura trasfusionale.

I test per l'epatite C sono raccomandati:

• prima della prossima gravidanza;
• cambiamento di partner sessuali;
• ricevere iniezioni o tagli con oggetti dubbiosi;
• diagnosticare malattie croniche;
• con lo scopo preventivo.

Necessario, l'analisi dell'epatite è la manifestazione di sintomi come:

• l'aspetto della pelle e degli occhi itterici;
• sensazione di disagio, pesantezza, dolore sotto le costole sul lato destro del corpo;
• reazione negativa del corpo a cibi piccanti e grassi;
• scolorimento delle urine a marrone;
• sbiancamento delle feci.

Test per l'epatite è necessario per tutti coloro che hanno bisogno di un libro di medicina, e questa è una lista enorme di professioni. Inoltre, sono anche obbligatori per determinati strati sociali, ad esempio, i consumatori registrati di sostanze stupefacenti o in una clinica per malattie veneree e della pelle.

Esame del sangue

Quali caratteristiche ha un esame del sangue per l'epatite C? Questo gruppo include sei tipi di virus. Pertanto, per condurre un'analisi completa è necessaria un'analisi completa.

Identificare gli anticorpi del virus, che indicheranno l'infezione è possibile nei primi 14 giorni dalla data dell'infezione. Tuttavia, tale analisi fornisce solo una risposta cumulativa ed è impossibile fare una diagnosi definitiva, poiché ciò può essere sia l'inizio della forma acuta che la condizione dopo l'infezione.

Quali test hai per sospetto di epatite C

Il risultato del test può essere positivo o negativo. Nel secondo caso, nel corso degli studi di laboratorio sul siero del sangue non ci sono anticorpi contro il virus. Se il risultato è positivo, tali anticorpi vengono rilevati, il che indica:

• infezioni nel periodo acuto;
• WASH cronico;
• precedentemente trasferito epatite C.

Pertanto, viene effettuato un ulteriore test di conferma per determinare la diagnosi finale e la natura degli anticorpi rilevati. Un elenco completo di test è impostato per ciascun paziente individualmente.

Metodo PCR per diagnostica qualitativa

La PCR è sinonimo di reazione a catena della polimerasi e, oggi, è uno dei migliori metodi esistenti per rilevare l'epatite C, sia in termini qualitativi che quantitativi.

La principale differenza del metodo PCR dall'analisi sierologica è che non solo rileva la presenza di anticorpi, ma rileva anche l'RNA (acido ribonucleico) del virus dell'epatite C.

Come è noto, gli anticorpi contro l'epatite sono presenti non solo in pazienti con una forma cronica o acuta, ma anche in persone che hanno già avuto un'infezione e recuperati. Ci sono anche casi in cui gli anticorpi vengono rilevati solo diversi mesi dopo l'infezione. Questo è il motivo per cui la diagnostica PCR dice che è il più informativo. Dopotutto, può essere utilizzato per produrre un'analisi qualitativa, basata su quali conclusioni si possono trarre su come il virus si moltiplica nel corpo e su quanto efficacemente venga condotto il trattamento antivirale.

Per quanto riguarda la sensibilità analitica di questo metodo, varia da 50 a 100 particelle virali per 5 μl.

L'epatite C può essere rilevata mediante PCR nei primi giorni e settimane dopo l'infezione, quando i marcatori sierologici sono ancora completamente assenti. Allo stesso tempo, la probabilità di un risultato falso positivo non può essere esclusa. Sono necessari altri studi per una diagnosi definitiva.

Attenzione! Ci sono raccomandazioni speciali dell'OMS, secondo le quali una diagnosi di epatite C dovrebbe essere fatta non prima che dopo il triplice rilevamento dell'RNA del virus.

La PCR è anche usata per:

• installazione dell'affidabilità degli studi sierologici, se vi sono motivi di dubbi sui loro risultati;
• stabilendo la forma esatta di epatite;
• identificare un gregge di una malattia o un'infezione che è già stata trasferita;
• monitorare l'efficacia della terapia.

Metodo PCR per diagnosi quantitativa

La diagnosi quantitativa è fondamentalmente diversa da quella qualitativa e serve a determinare l'intensità con cui l'epatite C si sviluppa nel corpo del paziente. Rende anche possibile giudicare quanto sia efficace la terapia scelta e scoprire che la resistenza a un particolare farmaco ha iniziato a svilupparsi in un paziente.

Più basso è il livello di viremia identificato, più favorevole è la prognosi.

Inoltre, questo metodo consente di determinare con maggiore precisione il sottotipo di epatite C, a seconda di quali possono esservi varie complicanze e potrebbero esserci differenze nel trattamento.

Il più pericoloso è il sottotipo 1b, in cui la forma cronica si sviluppa nel 90% dei casi, nonostante il fatto che i sottotipi 2a e 3a scorrano nella forma cronica in non più del 33-50% dei casi diagnosticati.

Metodo ELISA

L'abbreviazione ELISA sta per dosaggio immunoenzimatico. Sulla base di questa analisi, il rilevamento del virus dell'epatite C si basa sul rilevamento di marcatori sierologici. Pertanto, le revisioni ELISA non sono così inequivocabili, poiché possono determinare la presenza di anticorpi, ma non forniranno informazioni univoche sul patogeno.

Dopo aver analizzato il siero del sangue mediante ELISA, sarà necessario effettuare test di conferma e determinare il tipo specifico di epatite, sia che l'infezione sia in forma acuta o sia già stata trasferita in precedenza, ecc.

Il vantaggio del metodo è l'elevata precisione di rilevamento degli anticorpi e oggi l'industria medica produce molti sistemi di test di questo tipo, quindi i test ELISA, a differenza di altri tipi, sono disponibili per tutti. Puoi fare un'analisi simile in quasi tutte le cliniche o centri medici e il suo costo è estremamente basso.

Quantitativo di PCR per l'epatite C

Il virus dell'epatite C è in grado di moltiplicarsi nelle cellule del sangue e causare malattie linfoproliferative. A causa di molteplici mutazioni, la difesa immunitaria del corpo si indebolisce, appaiono genotipi e sottotipi del virus. Con la determinazione corretta e tempestiva di un tipo specifico, dipende l'efficacia della terapia antivirale. Il pericolo di infezione è che la malattia è asintomatica. Solo il 15% dei 100 può manifestare nausea e vomito, perdita di peso e febbre.

Rilevazione del virus dell'epatite C

Il tasso standard di epatite C è nelle dimensioni da 40 a 60 nm, con la maggior parte dei lipidi, danni al fegato derivanti da un decorso acuto o cronico della malattia. L'epatite C, vale a dire il virus RNA della famiglia Togaviridae, è estremamente resistente, viene trasmessa mediante trasfusioni di sangue o l'uso di articoli non sterili, forniture di igiene improprie, ecc. L'analisi quantitativa consente di esaminare il sangue e identificare la struttura genetica del virus infetto.

Per l'epatite C e i suoi genotipi sono stati determinati, condurre un'analisi quantitativa. A seconda dell'analizzatore è possibile determinare i tre livelli di incidenza del virus dell'RNA.

I sottotipi possono produrre varie modifiche, quindi la specificità e la sensibilità dell'analizzatore devono essere al cento per cento. Oltre a rilevare la malattia in un paziente, è necessario determinare il grado della sua gravità. Alcuni laboratori non hanno tutti i dati sulla decodifica del virus RNA, esiste la possibilità di una falsa risposta positiva.

La ricerca sull'epatite C sarà più accurata quando si studiano questi indicatori:

AlAT, AsAT; Scudo alcalino; LDH.

Attirando l'attenzione sui risultati di questi indicatori e sulla condizione generale del corpo, viene visualizzato un risultato che mostra il grado di infezione, la forma e il numero di cellule epatite C nel sangue. Ciò contribuisce al processo di guarigione e all'efficacia della terapia antivirale.

Tipi di analisi per l'epatite C

Una reazione a catena multi-dimensionale (PCR) dà un'idea del numero di particelle di DNA nelle analisi dei pazienti effettuate, identificando correttamente l'agente infettivo.

Possono verificarsi agenti causativi di malattie infettive. Un'infezione del fegato, come l'epatite C, è curabile nei nostri tempi quando viene rilevata tempestivamente. Se si sospetta un virus, viene eseguita l'analisi PCR.

Dato che a lungo i sintomi del virus possono essere mascherati, una persona potrebbe non sentire l'insorgere della malattia. Ma con un esame approfondito nel 60-70% dei casi, viene rilevata l'epatite C, la prima analisi, che è ELISA, seguita dalla diagnosi PCR. L'analisi viene effettuata in determinati periodi per determinare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento appropriato. Per farne a meno, senza applicare tutte queste procedure, è possibile essere vaccinati contro l'epatite.

L'analisi, inclusa la diagnostica PCR, fornisce un quadro della malattia, quanto è attivo il virus in diversi periodi di sviluppo.

Innanzitutto, c'è un'analisi qualitativa che conferma solo l'ipotesi sull'infezione e quindi un quantitativo, determinando il carico sul fegato. L'opzione ideale sarebbe un risultato negativo per l'epatite C nel materiale genetico del paziente.

Analisi qualitativa e quantitativa

Ci sono analisi qualitative e quantitative. L'essenza del primo è che determina la presenza di infezione nel sangue. E questo significa che il virus infetta cellule epatiche sane. Quando si trovano anticorpi contro l'epatite C in un paziente, viene immediatamente eseguito un test qualitativo. Il tasso che il risultato dovrebbe dare è "non rilevato nel sangue". Quando si determina la concentrazione di un virus, è necessario conoscere la sensibilità del sistema diagnostico, poiché le persone sottoposte a terapia antivirale possono eseguire l'analisi. Il grado di sensibilità dell'analizzatore non deve essere inferiore a 50 IU / ml.

Quando viene rilevato un virus, viene eseguita un'analisi quantitativa, in altre parole, la carica virale, che determina la concentrazione del virus nel sangue e la gravità della malattia.

L'RNA virale, che è in una certa quantità di sangue, è definito come la norma al ritmo di 1 ml per 1 centimetro cubico. Dopo aver quantificato la carica virale, è possibile valutare il grado di infezione dell'ambiente ancora non infetto. Non appena la concentrazione di epatite C sale nel sangue, è necessario isolare dall'ambiente.

È importante nelle prime fasi rilevare il grado di concentrazione dell'epatite, al fine di determinare il ritmo della riabilitazione. Se il tasso di epatite C è superato di oltre 800 mila IU / ml, è considerato troppo alto, con un aumento fino a un milione - critico. Se l'intervallo quantitativo è inferiore a 400 mila IU / ml, si ritiene che l'infezione di quelli intorno sarà meno probabile. Questa cifra chiarisce che l'epatite C è presente nel corpo in dosi molto piccole. L'analisi non è stata in grado di determinare il valore quantitativo delle particelle di RNA del virus, per cui è stata rinominata diverse volte per una diagnosi accurata.

Risultati dell'analisi quantitativa

Il compito di determinare la quantità di carica virale nel sangue di un paziente è l'identificazione del grado di infezione per gli altri.

Test dell'epatite C

consente di valutare l'efficacia della terapia antivirale, il livello di infettività e il numero di tessuti infetti.

È importante prevenire la progressione della malattia, adottare misure preventive nel tempo, prescrivere il trattamento corretto basato sulla diagnostica della PCR. Se, in base ai risultati, il livello di carica virale è inferiore a 400 mila IU / ml, la concentrazione potrebbe essere minima, il che indica un possibile recupero completo. La norma per un risultato positivo è l'assenza di infezione.

I risultati dell'analisi PCR:

Una risposta positiva significa un'infezione nel materiale biologico. L'analisi consente di determinare il numero esatto di cellule infette. Una risposta negativa indica l'assenza di infezione, che viene attentamente ricercata nel corpo.

Il metodo di determinazione quantitativa dell'epatite C è accurato e informativo, eseguito su apparecchiature ad alta sensibilità. Decifrare i risultati dell'analisi consente di scoprire se l'infezione e la sua specificità, per vedere il minor numero di cellule infette su analizzatori altamente sensibili.

I risultati falsi positivi o opposti sono raramente dati dall'analisi, più spesso ciò avviene negli studi di immunodosaggio.

L'epatite C è una delle malattie virali più pericolose e difficili da diagnosticare. Per determinare la malattia, viene utilizzato il metodo PCR dell'epatite C. Si tratta di una nuova tecnica high-tech che consente di studiare il materiale genetico per l'esistenza della vita nelle particelle più piccole (molecole) e nelle più piccole quantità. Il virus dell'epatite è molto persistente, può vivere a lungo nell'ambiente ed è ben consolidato nel corpo umano.

Cos'è la PCR?

Oggi c'è un numero enorme di varie malattie. E non un numero inferiore di metodi per la loro determinazione. Poiché gli agenti di infezione hanno imparato a mettere radici nell'ambiente e ad evolversi facilmente, vengono utilizzate le ultime tecnologie per diagnosticare loro. La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un metodo più rapido e più accurato che cerca di trovare l'agente causale della malattia aumentando significativamente la porzione del DNA del virus dell'epatite nel campione. Di lui spesso scrive: cerca un ago in un pagliaio e poi costruisce una pila di aghi.

Tipi di metodo PCR

I test qualitativi aiuteranno a determinare la presenza del virus dell'epatite C nel corpo.

Assegni l'analisi qualitativa e quantitativa di epatite. Per determinare se il virus è nel corpo e coloro che hanno trovato anticorpi contro l'epatite C, eseguire test di alta qualità. L'analisi di decodifica dà il risultato: "positivo"; "Negativo". Significato negativo: o una persona è sana o non ci sono abbastanza agenti nel sangue e non possono essere trovati. Quindi vale la pena di fare un riesame dopo un po '.

Un risultato positivo indica l'esistenza di un'infezione. Questo è quasi sempre il valore esatto. I risultati errati di solito dipendono dal fattore umano (stoccaggio improprio o non conformità con le regole della procedura). Quando il tasso è, il risultato è negativo. Prima di testare non ci sono regole speciali, basta prendere il sangue da una vena.

Se trovato, condurre un'analisi quantitativa (carica virale) - dà valori numerici: quanto RNA del virus dell'epatite è in questo momento nel volume prescritto del materiale in studio. Con lo sviluppo attivo dell'infezione, può essere rilevato a 1-2 settimane in una persona infetta. Anche il sangue viene solitamente esaminato perché gli agenti circolano liberamente in esso.

Caratteristiche dell'analisi quantitativa della PCR

La PCR quantitativa ti aiuterà a scegliere il trattamento più efficace per l'epatite C.

La differenza nell'analisi quantitativa è che non tutto passa. Qualitativo - determina la presenza e quantitativa - aiuta con la conferma della conclusione "virus dell'epatite", la prognosi del decorso della malattia e determina il corso del trattamento. Quanto è efficace la terapia è dal numero di RNA prima e durante il trattamento. Inoltre con il suo aiuto determina la nomina di dosi di farmaci.

Di norma, viene prodotto prima dell'inizio del trattamento. Le principali indicazioni possono essere:

determinazione della carica virale e controllo della terapia antivirale, PCR di alta qualità trovato anticorpi di epatite C, individuazione di epatite C acuta e cronica, l'esistenza di epatite mista, quando si pianifica il trattamento, se uno studio qualitativo trova ancora la presenza della malattia dopo la dodicesima settimana di terapia.

Guarda anche, quale carica virale nell'epatite: bassa - la terapia viene eseguita con successo; aumentato - il trattamento non è efficace e deve essere cambiato.

Cosa viene eseguito in varie fasi della malattia?

L'analisi aiuterà a monitorare i risultati della terapia in tutte le fasi del trattamento.

In diverse fasi della malattia, viene effettuato uno studio per dare una revisione dei benefici del trattamento e la pianificazione della sua durata. Con buone risposte alla terapia, si accorcia. Altrimenti, con il lento ritiro del virus, il trattamento si prolunga. La PCR per l'epatite fa 1,4, 12, 24 settimane di terapia. Quando gli indicatori non cadono dopo 12 settimane, concludono che la terapia non è adatta a questo organismo. Questa analisi viene utilizzata per determinare quanto è attiva l'infezione e quanto è probabile che sia trasmessa. Ad esempio, durante la gravidanza c'è il rischio di infettare un bambino. Dopo la terapia, identificare il rischio di recidiva della malattia.

trascrizione

Dopo lo studio, l'analisi può decifrare non in numeri, ma con le parole: "sotto l'intervallo di misurazione" e "non rilevato". La PCR quantitativa è più sensibile alla qualità. La conclusione "non rilevata" può dire che l'infezione non è stata trovata. "Sotto l'intervallo di misurazione" - il test non ha rilevato il virus, ma ha un valore basso. In questa situazione, fai un secondo studio.

Il carico virale è la determinazione del numero di RNA infettivi in ​​un volume di sangue prescritto (1 ml = 1 metro cubico quantitativamente). Formulato in misure internazionali IU / ml. Laboratori separati designano copie / ml. Diversi sistemi di test possono decifrare la traduzione di componenti in valori internazionali a modo loro. Tabella 1. Decifrazione dell'analisi quantitativa dell'RNA del virus

La diagnosi di epatite comprende una serie di test per determinare la presenza di un virus nel sangue. Un modo per individuare una malattia è un metodo di ricerca come la PCR per l'epatite C. Di cosa si tratta, perché l'analisi della PCR per l'epatite è tanto importante quanto viene eseguita e decodificata?

Cos'è?

La reazione a catena della polimerasi, o PCR, viene utilizzata per diagnosticare ulcere gastriche, colite, enterite. Ma il suo principale vantaggio è che aiuta a rilevare nel corpo sia il virus dell'epatite C che gli anticorpi che hanno la capacità di non causare reazioni del sistema immunitario a causa della loro capacità di mutare.

Lo studio e la sua essenza sta nella creazione di determinate condizioni in cui si verifica la reazione a catena dell'epatite RNA. Se, confrontate con la sequenza nucleotidica del virus dell'epatite C, si riscontrano coincidenze, ciò indica che nel sangue sono presenti particelle virali e che i processi di disintegrazione si verificano nel fegato. Se la quantità di virus è inferiore a un certo livello, viene fatta una diagnosi negativa e, se superiore, positiva.

Esistono due tipi di esami del sangue che utilizzano il metodo PCR per l'epatite: analisi quantitativa e analisi qualitativa.

La PCR quantitativa, come menzionato sopra, determina la concentrazione di RNA del virus dell'epatite. Inoltre, è in grado di fornire informazioni sull'intensità con cui si sviluppa la patologia e sull'efficacia del trattamento prescritto. Un'analisi quantitativa dell'epatite C è estremamente importante perché fissa la resistenza all'azione dei farmaci antivirali e consente di regolare la terapia.

Dopo che il paziente è stato sottoposto a un ciclo di trattamento, la PCR aiuta a determinare l'ulteriore ordine degli appuntamenti. In alcuni casi, la necessità di ulteriori sondaggi. Ad esempio, se il livello di ALP è aumentato (ma non più di 2 volte entro sei mesi) e la trascrizione dell'analisi indica una carica virale superiore a 105 IU / ml, al paziente viene prescritta una biopsia. Se un'analisi quantitativa della PCR rivela una grave infiammazione e fibrosi, al paziente viene prescritto un ciclo di trattamento con farmaci antivirali.

In situazioni in cui un gran numero di particelle virali è combinato con un'alta ALT, il paziente deve essere immediatamente trattato senza ulteriori misure diagnostiche.

Fai questo test e scopri se hai problemi al fegato.

Solo specialisti qualificati ed esperti possono decifrare qualitativamente in analisi quantitativa del sangue per l'epatite, e le moderne tecnologie aiutano a farlo con una bassa concentrazione del virus nel sangue.

L'analisi qualitativa della PCR ha lo scopo di determinare e confermare l'effettiva presenza del virus nel corpo. Viene eseguito quando nel sangue sono rilevati anticorpi contro l'epatite. È un'analisi qualitativa dell'epatite che garantisce l'accuratezza del risultato del 100% e consente di formulare una diagnosi nelle prime fasi della malattia, che consente di iniziare la lotta contro l'epatite già durante le prime settimane dopo l'infezione e aumenta le probabilità di guarigione completa (nel caso della malattia di tipo B).

Benefici della PCR

Nello studio mediante PCR e decifrando un esame del sangue per l'epatite, è anche possibile determinare il genotipo del patogeno. In totale, ci sono 6 genotipi del virus e un gran numero di sottotipi, tuttavia nella nostra regione sono diventati comuni genotipi 1, 2 e 3.

Altri vantaggi di questo tipo di diagnosi sono:

• alta precisione degli indicatori ottenuti e bassa probabilità di errore in essi;
• alto livello di sensibilità alle particelle virali nel sangue;
• la possibilità di identificare più agenti patogeni contemporaneamente;
• diagnosi di microrganismi patogeni intracellulari con elevata variabilità antigenica;
• lavorare con l'analisi della decodifica per l'epatite consente di rilevare infezioni nascoste attuali.

Chi è nominato

Le seguenti categorie di persone devono passare l'analisi PCR per l'epatite:

• donne incinte;
• personale sanitario;
• potenziale donatore di sangue e di organi;
• quelli che hanno segni caratteristici della malattia;
• Individui con infezione da HIV;
• tossicodipendenti;
• prostitute promiscue.

Come viene condotta l'analisi ed è necessario prepararla

Il prelievo di sangue per la PCR è fatto da una vena. Di norma, ciò si verifica al mattino prima che la persona abbia mangiato, perché dopo aver mangiato un pasto devono passare almeno 8 ore. In casi estremi, sangue può essere preso per l'esame durante il giorno o la sera, ma il divario di tempo tra analisi e assunzione di cibo dovrebbe essere di almeno 5 ore.

Il fattore umano può influenzare quantitativamente i risultati: la loro accuratezza in alcuni casi diminuisce dal 100% al 95%, pertanto è necessario preparare in anticipo la donazione del sangue. La qualità del biomateriale per l'analisi sarà appropriata quando il paziente segue le seguenti regole:

• prima di donare il sangue, puoi bere solo acqua pulita;
• due giorni prima dello studio, è necessario abbandonare l'assunzione di cibi fritti e grassi, così come le bevande alcoliche;
• un giorno prima della visita al laboratorio dovrebbe smettere di prendere medicine. Se ciò non è possibile, è indispensabile informare il tecnico di laboratorio e il medico curante;
• il giorno prima hai bisogno di evitare situazioni stressanti e sforzi fisici;
• ultrasuoni, esami radiografici e strumentali non dovrebbero essere eseguiti poco prima della donazione di sangue;
• per un'ora prima dell'analisi, devi astenersi dal fumare;
• 20 minuti prima di donare il sangue, è necessario distrarsi, calmarsi ed espirare.

Se un bambino di età inferiore ai 5 anni supera lo studio, i genitori devono assicurarsi di bere acqua bollita ogni 10 minuti per mezz'ora prima di assumere il biomateriale.

Decrittografia dei dati ricevuti

La decodifica dell'analisi può essere rappresentata in parole (nel caso di uno studio qualitativo), ad esempio "non rilevato" o "sotto l'intervallo di modifiche". Nel primo caso, ciò indica che l'infezione non è stata rilevata. Nel secondo - che il virus è presente, ma in piccole quantità. Questa situazione richiede una nuova ricerca.

Il carico virale è determinato dalla quantità di RNA infetto e viene indicato come IU / ml o copie / ml.

Un normale indicatore (norma) di un'analisi quantitativa per l'epatite C è compreso tra 1,8x102 e 2,4x107 IU / ml.

La concentrazione di virus nel sangue può essere:

• basso: da 600 IU / ml a 3x10 4 / ml;
• media: da 3x10 4 IU / ml a 8x10 5 IU / ml;
• alto: oltre 8x10 5 IU / ml.

L'analisi quantitativa e qualitativa della PCR per l'epatite consente di determinare la presenza del virus nel corpo e il livello della sua concentrazione. Una reazione a catena multi-dimensionale è in grado di diagnosticare la malattia nelle sue fasi iniziali, ma per questo è necessario che i pazienti si rivolgano il prima possibile alle strutture mediche per ricevere aiuto e seguano rigorosamente le raccomandazioni del medico curante.

Il virus dell'epatite C è in grado di moltiplicarsi nelle cellule del sangue e causare malattie linfoproliferative. A causa di molteplici mutazioni, la difesa immunitaria del corpo si indebolisce, appaiono genotipi e sottotipi del virus. Con la determinazione corretta e tempestiva di un tipo specifico, dipende l'efficacia della terapia antivirale. Il pericolo di infezione è che la malattia è asintomatica. Solo il 15% dei 100 può manifestare nausea e vomito, perdita di peso e febbre.

Rilevazione del virus dell'epatite C

Il tasso standard di epatite C è nelle dimensioni da 40 a 60 nm, con la maggior parte dei lipidi, danni al fegato derivanti da un decorso acuto o cronico della malattia. L'epatite C, vale a dire il virus RNA della famiglia Togaviridae, è estremamente resistente, viene trasmessa mediante trasfusioni di sangue o l'uso di articoli non sterili, forniture di igiene improprie, ecc. L'analisi quantitativa consente di esaminare il sangue e identificare la struttura genetica del virus infetto.

Per l'epatite C e i suoi genotipi sono stati determinati, condurre un'analisi quantitativa. A seconda dell'analizzatore è possibile determinare i tre livelli di incidenza del virus dell'RNA.

I sottotipi possono produrre varie modifiche, quindi la specificità e la sensibilità dell'analizzatore devono essere al cento per cento. Oltre a rilevare la malattia in un paziente, è necessario determinare il grado della sua gravità. Alcuni laboratori non hanno tutti i dati sulla decodifica del virus RNA, esiste la possibilità di una falsa risposta positiva.

La ricerca sull'epatite C sarà più accurata quando si studiano questi indicatori:

Attirando l'attenzione sui risultati di questi indicatori e sulla condizione generale del corpo, viene visualizzato un risultato che mostra il grado di infezione, la forma e il numero di cellule epatite C nel sangue. Ciò contribuisce al processo di guarigione e all'efficacia della terapia antivirale.

Tipi di analisi per l'epatite C

Una reazione a catena multi-dimensionale (PCR) dà un'idea del numero di particelle di DNA nelle analisi dei pazienti effettuate, identificando correttamente l'agente infettivo.

Possono verificarsi agenti causativi di malattie infettive. Un'infezione del fegato, come l'epatite C, è curabile nei nostri tempi quando viene rilevata tempestivamente. Se si sospetta un virus, viene eseguita l'analisi PCR.

Dato che a lungo i sintomi del virus possono essere mascherati, una persona potrebbe non sentire l'insorgere della malattia. Ma con un esame approfondito nel 60-70% dei casi, viene rilevata l'epatite C, la prima analisi, che è ELISA, seguita dalla diagnosi PCR. L'analisi viene effettuata in determinati periodi per determinare lo stadio della malattia e prescrivere il trattamento appropriato. Per farne a meno, senza applicare tutte queste procedure, è possibile essere vaccinati contro l'epatite.

Analisi qualitativa e quantitativa

Ci sono analisi qualitative e quantitative. L'essenza del primo è che determina la presenza di infezione nel sangue. E questo significa che il virus infetta cellule epatiche sane. Quando si trovano anticorpi contro l'epatite C in un paziente, viene immediatamente eseguito un test qualitativo. Il tasso che il risultato dovrebbe dare è "non rilevato nel sangue". Quando si determina la concentrazione di un virus, è necessario conoscere la sensibilità del sistema diagnostico, poiché le persone sottoposte a terapia antivirale possono eseguire l'analisi. Il grado di sensibilità dell'analizzatore non deve essere inferiore a 50 IU / ml.

Quando viene rilevato un virus, viene eseguita un'analisi quantitativa, in altre parole, la carica virale, che determina la concentrazione del virus nel sangue e la gravità della malattia.

L'RNA virale, che è in una certa quantità di sangue, è definito come la norma al ritmo di 1 ml per 1 centimetro cubico. Dopo aver quantificato la carica virale, è possibile valutare il grado di infezione dell'ambiente ancora non infetto. Non appena la concentrazione di epatite C sale nel sangue, è necessario isolare dall'ambiente.

È importante nelle prime fasi rilevare il grado di concentrazione dell'epatite, al fine di determinare il ritmo della riabilitazione. Se il tasso di epatite C è superato di oltre 800 mila IU / ml, è considerato troppo alto, con un aumento fino a un milione - critico. Se l'intervallo quantitativo è inferiore a 400 mila IU / ml, si ritiene che l'infezione di quelli intorno sarà meno probabile. Questa cifra chiarisce che l'epatite C è presente nel corpo in dosi molto piccole. L'analisi non è stata in grado di determinare il valore quantitativo delle particelle di RNA del virus, per cui è stata rinominata diverse volte per una diagnosi accurata.

Risultati dell'analisi quantitativa

Il compito di determinare la quantità di carica virale nel sangue di un paziente è l'identificazione del grado di infezione per gli altri.

I risultati dell'analisi PCR:

1. Una risposta positiva significa un'infezione nel materiale biologico. L'analisi consente di determinare il numero esatto di cellule infette.
2. Una risposta negativa indica l'assenza di infezione, che viene attentamente ricercata nel corpo.

Il metodo di determinazione quantitativa dell'epatite C è accurato e informativo, eseguito su apparecchiature ad alta sensibilità. Decifrare i risultati dell'analisi consente di scoprire se l'infezione e la sua specificità, per vedere il minor numero di cellule infette su analizzatori altamente sensibili.

I risultati falsi positivi o opposti sono raramente dati dall'analisi, più spesso ciò avviene negli studi di immunodosaggio.

Il virus dell'epatite C è un virus che contiene una molecola di RNA. È in grado di evitare la risposta immunitaria del corpo a causa della sua elevata capacità di mutare. Esistono sei principali genotipi del virus e molti sottotipi. Nella nostra regione, i genotipi 1, 2 e 3 sono distribuiti principalmente.

Nel 75-80%, la malattia diventa cronica, che causa la fibrosi epatica, una condizione in cui il tessuto epatico viene sostituito dal tessuto connettivo. La fibrosi, a sua volta, porta al cancro o alla cirrosi. La principale modalità di trasmissione della malattia è attraverso il sangue. Se una persona ha indicazioni per testare l'epatite C, gli verranno dati due test di base. Gli anticorpi del virus sono determinati e, in loro assenza, si ritiene che non abbia l'epatite. Se viene rilevata la presenza di anticorpi contro il virus dell'epatite nel sangue, viene eseguita l'analisi della PCR.

L'RNA mediante questo metodo è determinato nel sangue entro 10-12 giorni dall'infezione e indica che il virus si replica attivamente nel corpo. Durante questo periodo, è semplicemente impossibile rilevare il virus in un altro modo, poiché non produce ancora anticorpi specifici e il danno epatico non è visibile con test biochimici e biopsie.

Varietà di studi sulla PCR

L'analisi della reazione a catena della polimerasi presenta alcuni vantaggi:

1. In questo studio, viene determinato il virus stesso e non i suoi prodotti metabolici. In questo caso, è possibile determinare il tipo di agente patogeno.
2. La tecnica ha un'elevata specificità dovuta al fatto che solo una certa sezione del DNA viene studiata, la probabilità di ottenere risultati errati diminuisce.
3. Ha una sensibilità molto elevata, è determinata anche dalla quantità minima di virus nel sangue.

Esistono due metodi principali per testare il sangue per l'epatite C mediante PCR: analisi qualitativa e quantitativa della PCR. Il metodo qualitativo viene utilizzato per determinare se è presente un virus. Qualcuno con anticorpi antiepatite è stato rilevato nel sangue, tale analisi viene effettuata. Il risultato può essere di due tipi: "rilevato" e "non rilevato", quest'ultimo valore è considerato la norma.

Un risultato positivo del test significa che nel campione sono stati trovati frammenti dell'RNA del virus che, a sua volta, indicano che la persona è stata infettata da epatite. Nel caso di un risultato negativo, sono possibili due opzioni: non c'era infezione o la sua concentrazione è così bassa da non essere rilevata da questa tecnica.

Il metodo quantitativo differisce nella sostanza della ricerca, nei suoi compiti e nelle indicazioni. Non tutti i pazienti con epatite subiscono tale analisi. Lui, come ogni altro, ha determinati obiettivi. Viene utilizzata la determinazione della carica virale o l'analisi quantitativa della PCR per l'RNA virale:

• per la determinazione dell'RNA del virus nel sangue e la diagnosi di "epatite virale";
• predire la cronicità dell'epatite e il decorso della malattia;
• monitorare il trattamento antivirale e decidere sulla sua estensione, riduzione o cambiamento nelle tattiche di trattamento.

Lo studio è condotto in presenza di tali indicazioni:

• L'epatite C è stata rilevata da uno studio qualitativo e gli anticorpi sono stati rilevati nel sangue;
• con epatite mista;
• se è prevista una terapia antivirale;
• durante e dopo il trattamento per l'epatite C;
• in presenza di epatite C cronica e acuta

Il test viene condotto per stimare il numero di unità virali in un dato volume di un campione di sangue di 1 cm³ o 1 ml. I risultati sono espressi in numeri. Indicatori utilizzati: IU / ml, che significa unità internazionale per millilitro e copie per ml, il numero di copie di RNA in 1 ml del campione. Più alto è l'indicatore quantitativo dell'analisi, maggiore è la probabilità di trasmissione del virus a un'altra persona.

L'R-DNA è un metodo di DNA ramificato. Metodo più semplice ed economico. Usato per più campioni, ha bassa sensibilità, da 500 IU / ml. Con tale sensibilità, c'è la possibilità di non identificare il virus, anche se è presente nel sangue.

TMA è un metodo di amplificazione della trascrizione. Questa tecnica rileva gli acidi nucleici nel sangue. Ha un basso costo e alta sensibilità, da 5-10 IU / ml. Una tecnica relativamente nuova che consente di accelerare e ridurre il costo del processo di test.

I risultati dell'analisi quantitativa della definizione del virus dell'RNA, presentata dal laboratorio, sono interpretati come segue: